不同储存时间的少白细胞单采血小板中外泌体释放及内容物

目的:探讨不同储存时间对少白细胞单采血小板(leukocyte-reduced apheresis platelet,LRA-Plt)中外泌体(exosome,EXO)释放及内容物的影响。方法:应用ExoQuick获得不同储存时间对LRA-Plt中的EXO,采用透射电镜术(transmission electron microscopy,TEM)、蛋白免疫印迹法、动态光散射(Dynamic Light Scattering,DLS)法分别进行形态、免疫标记、粒径分布检测。应用DLS检测不同储存时间LRA-Plt中EXO的粒径分布变化,通过Nanodrop■ND-2000检测不同储存时间LRA-Plt中EXO的蛋白和RNA含量变化。结果:成功获取类杯状、CD63/TSG101富集、Calnexin阴性、直径分布在30-200 nm的LRA-Plt来源EXO。储存早期(储存d 1、2),LRA-Plt来源EXO的粒径较小,分布多在30-40 nm;蛋白和RNA含量较低;2组间粒径分布、蛋白和RNA含量无显著差异(P>0.05)。储存中晚期,LRA-Plt来源EXO的粒径较储存早期大,分布多在130-200 nm;蛋白和RNA含量较早期显著上升;与储存早期相比,储存中晚期LRA-Plt中EXO在粒径分布、蛋白和RNA含量上均出现显著上升(P<0.05)。结论:储存中晚期的LRA-Plt中EXO形态与储存早期存在差异,且粒径分布、蛋白和RNA含量显著高于储存早期。EXO携带的大量蛋白和RNA可能参与了血小板输注后多种功能作用的执行。

连续过滤去除白细胞单采血小板质量及输注疗效

目的了解连续过滤白细胞去除单采血小板质量和输注疗效。方法检测连续过滤白细胞去除单采血小板产量、白细胞混入量、红细胞混入量、pH值等指标,并对输注疗效跟踪调查。结果血小板产量(3.10±0.31)×1011/袋;白细胞混入量(0.08±0.07)×106/袋;红细胞混入量(0.02±0.01)×109/袋;没有出现血小板输注无效、非溶血性发热反应等。结论单采血小板过程中连续过滤白细胞,能够进一步降低白细胞混入量,有效预防白细胞残留引起的输血不良反应。

单采血小板献血者血液因素对采集量影响的分析

目的了解血小板捐献者血液因素对终产品质量的影响。方法检测血小板采集前捐献者的各血液因素状况，跟踪检测连续过滤白细胞去除单采血小板产量，并进行多元回归分析，将献血者采前外周血血小板计数（Pit）、血小板平均体积（MPV）、红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞平均体积（MCV）、红细胞压积（Hct）、血容量（Bv）7个因素作为自变量，单采血小板产品计数作为因变量，进行多因素回归分析，采用逐步引入回归方程法。结果进入回归方程的自变量为Plt，没有显著意义的MPV、Hct、RBC、Hb、MCV、BV从回归方程中剔除。回归方程：Y=2．285＋0．003775Pit。结论在排除机器本身因素对采集的影响后，多元回归分析显示，捐献者单采前Pit计数是影响少白细胞血小板采集量的主要因素。