少阳膝痹方调节LXR-α/NF-κB信号通路对膝骨关节炎大鼠的干预作用及机制

目的观察少阳膝痹方对大鼠膝骨关节炎的干预效应,初步从LXR-α/NF-κB信号通路探讨其可能的作用机制。方法采用改良hulth法建立大鼠双侧膝关节膝骨关节炎模型,随机分为假手术组、模型组、美洛昔康组、低、中、高剂量中药复方组,模型制备成功后灌胃给药,给药4周后观察软骨表面大体形态学,HE染色观察软骨病理变化,ELISA法检测血清中基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)、前列腺素2E(PGE2)、基质金属蛋白13(MMP13)指标,Western Blot检测大鼠膝关节TNF-α、调节肝X受体α(LXR-α)、核因子κB(NF-κB)P65、NF-κB P-P65蛋白的表达;建立膝关节软骨细胞培养体系,通过LXR-α激动剂及抑制剂干预,分为空白对照组、模型组、中药复方组、中药复方+抑制剂组、中药复方+激动剂组,检测PGE2、MMP13及TNF-α的表达情况。结果术后4周,大体形态学观察显示中药复方各组软骨表面较模型组更完整,HE染色显示各中药复方组关节软骨略有损伤,潮线略有杂乱,骨皮质略有损伤,较模型组有所改善。与假手术组比较,模型组MMP13浓度、PGE2、TNF-α蛋白表达、P-P65蛋白表达、P-P65/P65相对蛋白表达升高(P<0.05),NF-κB P65蛋白表达下降(P<0.05)。与模型组比较,美洛昔康组、各剂量中药复方组MMP13浓度、P-P65蛋白表达、P-P65/P65蛋白相对表达降低,TIMP-1浓度、TIMP-1/MMP13比值、LXR-α基因及蛋白表达升高(P<0.05);美洛昔康组、低、高剂量中药复方组PGE2、TNF-α蛋白降低,中剂量中药复方组TNF-α蛋白表达量亦降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组MMP13、PGE2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,中药复方组及中药复方+激动剂组MMP13、PGE2蛋白表达量降低(P<0.05),TNF-α基因表达升高(P<0.05);与中药复方+抑制剂组比较,中药复方组、中药复方+激动剂组MMP13、PGE2表达量降低(P<0.05),TNF-α基因表达降低(P<0.05)。结论少阳膝痹方可降低血清中的MMP13、PGE2改善炎性微环境,减轻软骨退变,降低软骨中炎性因子TNF-α表达,这可能与上调LXR-α表达、降低NF-κB P65、P-P65有关。