雅鲁藏布江尖裸鲤胚胎和仔稚鱼发育研究

尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)成熟卵呈圆形,黄色,沉性,卵径(2.57±0.07)mm,受精卵吸水充分膨胀后卵径为(3.22±0.07)mm。水温9.5～11.8℃,尖裸鲤胚胎发育历时265h,根据胚胎发育的外部形态及典型特征,将其分为受精卵、胚盘形成、卵裂、囊胚、原肠、神经胚、器官分化和孵化共8个阶段、32个时期。出膜仔鱼全长(10.27±0.15)mm,出膜20d后卵黄耗尽,全长(15.22±0.27)mm。出膜后80d,鱼苗全长(23.65±0.59)mm,臀鳞出现,各鳍均已出现,鱼苗侧线全部形成且清晰,体色和体型接近成鱼。尖裸鲤早期发育的特点反映了其对雅鲁藏布江水域的适应性。报道了尖裸鲤胚胎发育和仔稚鱼发育的生物学特性,为雅鲁藏布江特有鱼类资源保护利用提供科学依据和理论基础。

尖裸鲤病变死亡后微生物群落结构变化分析

【目的】本文探讨了尖裸鲤因水霉菌病变死亡后的微生物群落结构变化特征。【方法】采用Illumina-Miseq高通量测序技术对尖裸鲤健康个体和因水霉菌病变死亡个体的表皮皮肤粘液及肠道内容物的微生物多样性进行分析。【结果】尖裸鲤因水霉菌病变死亡后其表皮皮肤和肠道中细菌群落多样性减少,而其真菌多样性增加。尖裸鲤病变死亡后其表皮皮肤粘液中Pseudomonas sp.、Vagococcus sp.、Providencia sp.、Morganella sp.、Pleosporales、Mucorales、Tremellales和Agaricomycetes等8种优势微生物菌群减少,而Acinetobacter sp.、Proteus sp.、Carnobacterium sp.和Malassezia sp.等4种优势微生物菌群增加。同时,尖裸鲤病变死亡后其肠道中Acinetobacter sp.、Flavobacterium sp.、Vagococcus sp.、Carnobacterium sp.、Bacillus sp.和Malassezia sp.等6种优势微生物菌群减少,而Pseudomonas sp.、Tremellales和Agaricomycetes等3种优势微生物菌群增加。【结论】细菌和真菌的群落结构变化是尖裸鲤病变死亡的主要原因。

尖裸鲤5种组织乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的电泳分析

为了了解尖裸鲤的生化遗传特性,丰富尖裸鲤种质资源研究的内容,通过配制不连续浓度聚丙烯酰胺凝胶,采用聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对尖裸鲤5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳。结果表明:所测样本鱼心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中的LDH酶带数分别为:12～16条,17～18条,6～13条,6～10条和12～17条; MDH酶带数分别为3条,4条,3～5条,2条和4～7条。LDH在尖裸鲤厌氧器官(骨骼肌和肝脏)中表达的酶带数总体少于非厌氧器官(心脏和肾脏)。尖裸鲤的MDH分为上清液型(s-MDH)和线粒体型(mMDH)。尖裸鲤的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性,尖裸鲤相对较多的LDH酶带数可能与其独特的栖息环境和A亚基与B亚基的变异共同作用有关。本研究可从生化遗传角度为尖裸鲤的资源保护和利用提供一定理论依据。

拉萨河尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)肌肉营养组成与分析评价

采用常规生化检测方法测定了拉萨河尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)肌肉主要营养成分,并首次对肌肉中的23种脂肪酸进行检测。结果显示:拉萨河尖裸鲤肌肉(干样)中蛋白质含量为74.40%,4种微量营养元素钙(Ca)1.85%、镁(Mg)1.48%、钾(K)1.68%、磷(P)0.68%;肌肉中含有17种氨基酸,其中7种人体必需氨基酸总量为25.96%,4种鲜味氨基酸的总量为23.39%;肌肉中含量较高的23种脂肪酸中,n-3型(EPA)与n-6型(DHA)含量分别为39.27%和5.38%,比其他淡水经济鱼类含量高。研究表明拉萨河尖裸鲤具有较高的食用价值和开发前景。

尖裸鲤实时荧光定量PCR内参基因的筛选

为筛选能够稳定表达的内参基因用于尖裸鲤Oxygymnocypris stewarti实时荧光定量PCR分析,以尖裸鲤血液、心脏、肝、脾、鳃、头肾、中肾、后肾、前肠、中肠、后肠、性腺、眼、垂体、脑、红肌、白肌和皮肤18个组织为材料,应用实时荧光定量PCR技术比较了GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)、HPRT1(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶1)、RPL13(核糖体蛋白L13)、RPL19(核糖体蛋白L19)、RPL13a(核糖体蛋白L13a)、SDHA(琥珀酸脱氢酶亚基A)和ACTB(β-肌动蛋白)7个候选内参基因的表达情况,并采用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件对7个候选内参基因的稳定性进行分析。结果表明:GeNorm分析显示,7个候选内参基因的平均表达稳定值(M)依次为RPL13=RPL13a<RPL19<GAPDH<ACTB<SDHA<HPRT1,其中RPL13和RPL13a的M值均最小(0.62);NormFinder分析显示,7个候选内参基因的M值依次为RPL13<RPL13a<RPL19<GAPDH<ACTB<SDHA<HPRT1,其中RPL13的M值最小(0.30);BestKeeper分析显示,7个候选内参基因的标准差(S.D.)依次为RPL13<RPL19<GAPDH<HPRT1<RPL13a<SDHA<ACTB,变异系数(CV)值依次为RPL13<RPL19<HPRT1<GAPDH<SDHA<RPL13a<ACTB,其中RPL13的标准差(0.84)和变异系数(4.54%)均最小;7个候选内参基因在尖裸鲤不同组织中的表达量存在差异。研究表明,7个内参基因中RPL13的表达较为稳定,可作为尖裸鲤实时荧光定量PCR分析的适宜内参基因,本研究结果可为尖裸鲤遗传学及分子生物学等研究提供基础数据。

尖裸鲤染色体核型分析及进化地位研究

【目的】对尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)的染色体核型进行分析,为其进化生物学、种质标准制定及杂交育种亲本选择提供细胞遗传学依据。【方法】以西藏自治区农牧科学院水产科学研究所和中国水产科学研究院黑龙江水产研究所联合驯养的尖裸鲤为试验对象,取其头肾采用冷滴片法制备染色体标本,PI染色,荧光显微镜下拍照,使用Photoshop和曲线测量工具E-ruler对染色体进行测量和配对,获得染色体核型,并与已报道的19种(或亚种)裂腹鱼亚科鱼类的中部着丝粒染色体(m)+亚中部着丝粒染色体(sm)和亚端部着丝粒染色体(st)+端部着丝粒染色体(t)的数量比进行比对,分析尖裸鲤的进化地位。【结果】尖裸鲤染色体数目为2n=92,核型公式为26m+28sm+20st+18t,臂数(NF)=146,进化地位在裂腹鱼亚科中处于中等水平。【结论】明确了尖裸鲤的染色体核型和进化地位,其特化程度为高度特化等级。

尖裸鲤人工驯养常见疾病防治试验

尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)是国家二级保护动物,西藏自治区一级保护动物,是雅鲁藏布江特有鱼类。近年来藏区流动人口增加,开发力度加大,带来捕鱼强度不断增强,捕捞量远远超过其生长的速度;水电站的建设对尖裸鲤越冬、产卵和索饵等场所造成一定程度破坏,导致其种群数量锐减,所以人工饲养、人工繁殖对种群的恢复极为重要。在养殖过程中,发现其容易患小瓜虫病、水霉病、烂鳍病、赤皮病等疾病,给人工养殖带来很大难度。对尖裸鲤人工养殖的疾病防治方法进行了探讨。

雅鲁藏布江水系尖裸鲤的分布和食性差异研究

为了保护与合理利用尖裸鲤(Oxygymnocypris stewarti)资源,利用2015~2020年对西藏自治区重点水域渔业资源调查的资料,研究了尖裸鲤的资源分布和食性差异。研究结果表明,在西藏自治区,尖裸鲤仅在雅鲁藏布江水系分布,尖裸鲤主要分布在雅鲁藏布江上游和中游(仲巴县至仁布县江段)及其支流,零星分布在朗县江段和派镇江段,在高原湖泊巴松措中也分布着尖裸鲤,分布的海拔范围为2900~4700 m;在雅鲁藏布江中上游仲巴县江段、萨嘎县江段、拉孜县江段和日喀则市江段分布的尖裸鲤都以鱼类为主要食物,随着海拔的降低,各江段尖裸鲤的食物组成无显著差异,但是尖裸鲤对食物的摄食强度存在差异,仲巴县江段和萨嘎县江段尖裸鲤的食物平均饱满指数值显著偏大,而拉孜县江段和日喀则市江段的尖裸鲤的食物平均饱满指数值较小。近年来,尖裸鲤资源呈现衰减趋势,因此,应该在雅鲁藏布江上游江段和中游的仲巴县江段建立尖裸鲤自然保护区,加强对尖裸鲤的保护和资源恢复力度,加强尖裸鲤的增殖放流和相关基础研究工作。

温度对尖裸鲤胚胎发育及其仔稚鱼生长性状的影响

采用实验生态学方法研究温度对尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)胚胎发育及仔稚鱼生长性状的影响,旨在掌握温度对其早期发育的影响。结果表明,随着温度的升高,胚胎的孵化时间缩短,发育速度加快。在平均水温5℃、8℃、11℃、14℃和17℃下,尖裸鲤的胚胎孵化时间分别为530.78 h、366.12 h、214.22 h、220.63 h、153.95 h,温度和孵化时间呈幂函数关系,有效积温在水温为11℃时最低,为2 356.4 h·℃。尖裸鲤胚胎不同发育时期在不同温度下的累计时间均呈现指数函数关系。随着温度的升高,孵化率呈现先降低后升高的趋势,水温范围在11～17℃时,温度系数Q10值和Q13值最接近2。尖裸鲤初孵仔鱼全长与温度间呈现三次多项式函数,全长与温度之间不存在显著性关系;而初孵仔鱼卵黄囊体积与温度间呈现显著性的二次多项式函数。综合各项指标表明,尖裸鲤胚胎的适宜孵化水温为11～17℃,仔稚鱼的适宜生长水温为14～17℃。

不同饵料对3种西藏鱼类仔鱼生长及存活的影响

研究了卤虫无节幼体、专用仔鱼料、鳗鱼仔鱼料等3种不同饵料对西藏尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)、异齿裂腹鱼(Schizothorax o'connori Lloyd)、拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni Regan)等3种鱼类仔鱼生长和存活的影响。实验尖裸鲤、异齿裂腹鱼、拉萨裂腹鱼仔鱼的初始全长分别为(13.29±0.52)mm、(12.29±0.44)mm、(15.81±0.50)mm,实验周期分别为25 d、25 d、15 d。结果表明:与其他饵料组相比,投喂专用仔鱼料组,异齿裂腹鱼仔鱼和拉萨裂腹鱼仔鱼的平均全长、全长增加倍数以及存活率均高于其他各组,并有显著差异;尖裸鲤仔鱼的平均全长和全长增长倍数也高于其他各组,但存活率较投喂卤虫无节幼体低,并有显著差异。

“渔”眼观西藏!

世界第三极,壮美新西藏。经广东省渔业技术推广总站批准,应广州市千江水生态科技有限公司邀请,作为首席顾问,笔者和该公司总经理陈方灿,公司业务骨干韩哲一、龙鑫玲一行4人于2019年7月2日至5日前往西藏藏族自治区.