紫杉醇对尤文肉瘤细胞系诱导凋亡及生长抑制的研究

目的 研究抗微管药紫杉醇在体外实验条件下对尤文氏肉瘤细胞系RD—ES的诱导凋亡及生长抑制作用。方法 不同浓度的紫杉醇作用于体外培养的RD—ES细胞,通过形态学观察,台盼兰染色,Gicmsa染色,流式细胞仪分析技术,原位末端标记分析凋亡细胞DNA降解产物等方法,观察紫杉醇诱导RD—ES凋亡的作用。结果 通过与其他化疗药物比较,及随时间剂量改变的情况,可见紫杉醇对RD—ES细胞的诱导凋亡作用呈时间,剂量依赖关系,细胞分裂受阻,凋亡峰明显,多核瘤细胞增多,胞浆中空泡明显。原位末端标记可见DNA降解后的阳性反应。结论 体外诱导实验证实紫杉醇对RD—ES细胞系的有丝分裂有明显的抑制作用及诱导凋亡作用且随时间,剂量增加而增大。

尤文肉瘤EWS—FLI 1与特异序列结合并调节表达的研究

95％的尤文肉瘤家族（Ewing family of tumor，EFT）具有特异的EWS—FLI1融合基因。EWS—FLI1是一个比正常的FLI1强多许多倍的转录因子，并且可以与特异ACCGGAAGT基因序列结合。把该特异性结合序列插入到荧光素酶报告基因载体（pGL3-Promoter，promega公司）中，构建了新表达载体pS2。我们用脂质体法转染pS2到尤文肉瘤细胞系（RD—ES、SK—ES）及对照细胞系（NIH3T3、Hela），然后进行荧光定量检测，检测各组细胞系相对荧光强度。结果证实尤文肉瘤的EWS—FLI1确实能够与该特异序列结合并促进下游虫荧光素酶基因的高表达。