利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的变性

通过比较蛋白质变性时的色谱行为和生物物理特性，提出利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质变性时的构象变化．根据色谱参数中的保留时间，比较蛋白质变性时体积的相对变化；利用色谱峰数，确定形成变体的数目；根据峰形和峰数的变化，描述蛋白质的伸展程度；利用不同波长下峰高的变化，推断蛋白质变性时芳香族氨基酸残基的暴露情况．利用建立的尺寸排阻色谱法观察了液体和固体α－淀粉酶在低温下放置时的变性情况，讨论了变性时间和变性温度对强白质展开行为的影响．

N-和C-末端组氨酸标记基因重组AxCeSD的柱层析分离特性

Immobilization metal affinity chromatography(IMAC)and size-exclusive chromatography(SEC)have been widely used in the purification of recombinant protein.In order to apply the column chromatography to the separation and purification of the gene recombinant with histidine-tags,the column chromatographic separation characteristics of N-terminal histidine-tagged(N-AxCeSD)and C-terminal histidine-tagged(C-AxCeSD)gene recombinant protein AxCeSD,one of the subunit involved in the cellulose synthesis in Acetobacter xylinum were studied.In the ring-shaped three-dimensional structure of AxCeSD,N-terminal histidine-tags were located in the inner of ring,while C-terminal histidine-tags were located in the outer.A higher imidazole concentration was necessary for eluting the C-AxCeSD from the IMAC column due to the C-terminal histidine-tags had stronger chelating interaction with the Ni2+ on the IMAC media.Moreover,the retention time for eluting C-AxCeSD from the same SEC gel column was shorter than that for N-AxCeSD,because the larger protein homolog was formed in the C-AxCeSD solution through the inter-molecular hydrogen bonds between the C-terminal histidine-tags.

马尔文发布使用Viscotek SEC-MALS20测量蛋白团聚的最新应用报告

最近，马尔文官方网站发布了一个关于利用马尔文最新SEC—MALS20光散射检测器的应用报告——利用ViscotekSEC—MALS20测量蛋白团聚物，展示了这种新的系统在多种蛋白样本尺寸排阻色谱法分析中的作用，

用于HPLC—SEC分析的超纯水

适用于HPLC-SEC分析的超纯水高效液相色谱（HPLC）是一种进行物质分离、鉴定和定量的分析方法。与其它通常采用梯度模式的各种生物聚合物HPLC（离子交换、疏水相互作用和反相色谱）不同，SEC（尺寸排阻色谱法）通常采用等度方法。

Sephadex G-50纯化生姜蛋白酶的研究

采用Sephadex G-50为填料对粗提生姜蛋白酶进行了纯化,充分利用了尺寸排阻层析简便、高效、重复性好的特点,以酶得率、纯化倍数、柱效分析等参数为指标,研究了凝胶柱床高度、洗脱速度、上样量等条件对纯化效果的影响。确定了最佳纯化方案为:柱床高度50cm,上样量3mL粗酶,流速45cm/h,洗脱液总用量150mL。纯化后的生姜蛋白酶比活性是姜汁的4.192倍,粗酶的2.113倍,而且还去除了色素、不溶物等杂质,纯化效果极佳。

吉妥单抗复兴史

采用访谈的形式,以首个上市的抗体偶联药物“吉妥单抗”的传奇历程为明线,靶向药物在化学分子设计和分析检测上的进步为暗线,讲述了抗体偶联药物的发展史。较为全面地介绍了抗体偶联药物的化学结构、设计思路、分析方法与发展前景。