基于UPLC-MS/MS技术的更年宁水蜜丸中藏柴胡掺伪方法的研究

目的建立更年宁中藏柴胡掺伪检查方法,考察生产企业是否存在使用藏柴胡替代柴胡投料的情况。方法采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用技术,选择Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温35℃,进样量1μL;采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式,进行多反应监测(MRM),选择m/z 943.5→635.4、m/z 943.5→797.5和m/z 943.5→781.5为尼泊尔柴胡皂苷K的检测离子对。结果尼泊尔柴胡皂苷K质量浓度在93.3~3734 ng·mL^(-1)内与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9998);精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均小于2.0%;3个浓度平均加样回收率为96.4%~99.6%(RSD均<3.0)。更年宁中藏柴胡掺伪比例在3%~100%内与尼泊尔柴胡皂苷K质量浓度的线性关系良好(r=0.9947)。以掺伪藏柴胡不得过10%为限度,对44批更年宁样品进行筛查,结果5批更年宁掺伪藏柴胡22%~36%,超出拟订限度。结论该方法准确、可靠,可用于更年宁中藏柴胡掺伪检查及市场监管。

基于UPLC-MS/MS技术检查银柴颗粒中柴胡掺伪的鉴别研究

目的:建立银柴颗粒中藏柴胡的检查方法,考察生产企业是否存在使用藏柴胡代替柴胡投料的现象。方法:采用高效液相色谱-质谱法,选择Agilent Eclipse Plus C18(100 mm×3 mm,1.8μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-水(B),二元梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃;采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),进行多反应监测(MRM),选择m/z 943.5→797.5、m/z 943.5→635.4和m/z943.5→781.5为检测离子对。结果:尼泊尔柴胡皂苷K在0.1~5μg·mL^(-1)浓度范围与峰面积呈现出良好的线性关系(r=0.9920),仪器精密度RSD(n=6)为0.57%,样品重复性RSD(n=6)为0.95%。以掺杂藏柴胡不得过10%为限度,对27批银柴颗粒样品进行筛查,结果4批银柴颗粒分别掺杂藏柴胡59%、21%、32%、71%,超过拟定限度。结论:该方法经过方法学验证,灵敏、准确,可作为银柴颗粒中柴胡掺杂藏柴胡的检查方法,为打击藏柴胡掺伪提供有力技术支持。

感冒清热颗粒中藏柴胡检查方法的研究

目的:建立感冒清热颗粒中藏柴胡的检查方法,考察柴胡的掺伪情况。方法:采用液相色谱-串联质谱法,选择Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(100 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温35℃,进样量5μL;采用电喷雾离子源(ESI),选择m/z 943.5→797.5、m/z 943.5→781.2和m/z 943.5→635.5为尼泊尔柴胡皂苷K检测离子对,以多反应监测(MRM)模式进行测定。结果:尼泊尔柴胡皂苷K质量浓度在0.049~4.866μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999),精密度、重复性良好(RSD分别为1.42%、2.24%)。以0.8μg·mL-1为掺伪判定浓度,220批感冒清热颗粒中有17批样品溶液尼泊尔柴胡皂苷K的浓度为1.2~3.5μg·mL^(-1),判定为检出藏柴胡,不合格率7.7%。结论:建立的方法准确、可靠,可用于感冒清热颗粒中柴胡的掺伪检查及市场监管。

UPLC-MS/MS检测全粉投料中成药制剂中柴胡掺杂藏柴胡成分方法的研究

目的:以藏柴胡特征成分尼泊尔柴胡皂苷k为指标,建立超高效液相色谱-质谱法检测全粉投料中成药制剂中柴胡掺伪藏柴胡成分。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18(100 mm×3 mm, 1.8μm)色谱柱,以水(A)-乙腈(B)为流动相,二元梯度洗脱(0~3 min, 75%A→70%A;3~12 min, 70%A→68%A;12~12.5 min, 68%A→10%A;12.5~15.5 min, 10%A),流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量1μL。采用电喷雾负离子化,多反应监测(MRM)模式,选择m/z 943.5→797.5、943.5→781.5和943.5→635.4为检测离子对。结果:尼泊尔柴胡皂苷k质量浓度在0.05~5μg·mL^(-1)范围与峰面积呈现出良好的线性关系(r=0.996 5),仪器精密度RSD(n=6)为1.4%,掺伪10%藏柴胡参比溶液重复性RSD(n=6)为1.8%,掺伪检测限为1%。对代表性品种逍遥丸、加味逍遥丸、补中益气丸、龙胆泻肝丸进行筛查,结果9批逍遥丸中有2批,8批加味逍遥丸中有4批,10批补中益气丸中有1批,10批龙胆泻肝丸中有2批含尼泊尔柴胡皂苷k超过拟定限度。结论:本方法经过方法学验证,专属性强,灵敏度高,可应用于全粉投料中成药制剂中柴胡掺杂藏柴胡成分的检查。