双重RT-PCR快速检测水仙普通潜隐病毒和尼润潜隐病毒

目的:针对水仙上水仙普通潜隐病毒(Narcissus common latent virus, NCLV)和尼润潜隐病毒(Nerine latent virus, NeLV)建立同时检测两种病毒的双重RT-PCR方法。方法:参照GenBank上已报道的NCLV和NeLV CP基因序列设计特异性引物,在单一RT-PCR检测方法的基础上,通过对PCR反应体系和反应条件的优化,建立了可以同时检测NCLV和NeLV的双重RT-PCR方法,并对其特异性、灵敏度进行了测定,同时应用于水仙实际样品的检测。结果:建立的双重RT-PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏度,能够有效区分水仙上NCLV、NeLV两种病毒,并且检测灵敏度不低于单一RT-PCR,水仙实际样品检测结果与单一RT-PCR检测结果相符。结论:建立的NCLV、NeLV双重RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、准确性好,适用于口岸及农业生产上NCLV、NeLV的快速检测。