尾加压素Ⅱ在肾癌患者血液和孵育组织中的表达

目的测定肾癌患者和正常对照人群血液和孵育组织中尾加压素Ⅱ(Urotensin Ⅱ,UⅡ)的表达量,以期探讨UⅡ表达在肾透明细胞癌发生中的临床意义。方法对20例肾透明细胞癌患者及20例对照人群通过放免方法检测血液和孵育组织UII的表达。结果肾癌患者和正常对照人群血液和孵育组织中均有UⅡ表达。放免结果显示肾透明细胞癌组患者血浆UII水平(50.08±4.77 pg/ml)与正常对照组血浆UⅡ(45.55±6.05 pg/ml)相比差异无统计学意义(P>0.05)。肾透明细胞癌组织孵育后UII水平(30.83±8.51 pg/mg pro)明显高于正常肾组织(16.09±3.13 pg/mgpro)(P<0.01)。结论肾透明细胞癌组织可分泌UⅡ,且较正常肾组织高,提示UⅡ可能与肾透明细胞癌的发生、发展有关,UⅡ可能通过自分泌或旁分泌的方式发挥作用。

尾加压素Ⅱ水平与冠状动脉慢血流现象关系的研究

目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)水平与冠状动脉慢血流(CSF)现象的关系。方法:选择2010年1月至2014年12月间,来我院接受检测确诊的CSF患者40例(CSF组,n=40),另选择同期冠状动脉血流速度正常患者40例作为对照组(对照组,n=40)。冠状动脉血流速度的评价采用TIMI血流计帧法进行,血清UⅡ水平利用人UⅡ ELISA试剂盒采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定,比较两组患者之间临床特征、生化指标及血液学指标差异。并应用多因素非条件Logistic回归分析影响CSF发生的危险因素。结果:两组患者在性别、年龄、糖尿病史、高血压、高脂血症、吸烟史、收缩压、舒张压、药物使用(血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体阻断剂、β-受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、阿司匹林、他汀类药物、噻吩并吡啶)方面,差异无统计学意义。两组患者在空腹血糖、血肌酐、TC、TG、C-LDL、AGB方面差异无统计学意义;在白细胞、血清UⅡ、C反应蛋白(CRP)水平方面差异有统计意义(P<0.05),其中CSF组白细胞水平、血清UⅡ水平、CRP水平显著高于对照组,CSF组C-HDL水平显著低于对照组。CSF患者血清UⅡ水平与收缩压、舒张压、空腹血糖、血肌酐、TC、TG、C-LDL、C-HDL、血红蛋白无相关性(P>0.05),与帧计数、白细胞水平、CRP水平呈正相关(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析结果显示,CRP水平升高、血清UⅡ水平升高、白细胞水平升高是CSF发生的危险性因素(P<0.05)。结论:CSF患者中血清UⅡ水平显著高于非CSF患者,提示血清UⅡ水平是CSF的影响因素。

妊娠期糖尿病尾加压素Ⅱ基因多态性与胰岛素抵抗的关系

目的探讨尾加压素II(UTS2)基因rs228648的单核苷酸多态性与GDM及IR的关系。方法选取GDM患者(GDM组)120例和糖耐量正常孕妇(GNGT)100名,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法检测UTS2基因型,并分析相关临床资料。结果两组UTS2基因rs228648的基因型分布,差异有统计学意义(χ2=9.94,P=0.007)。GDM组危险等位基因G的分布频率高于GNGT组[147(61.25%)vs 94(47.00%),χ2=8.94,P=0.01]。GDM组G/G基因型FIns、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均高于非G/G基因型(P=0.00)。结论 UTS2基因多态性与GDM发病相关,G/G基因型可能是GDM的易感基因;UTS2基因G/G基因型与GDM患者IR的发生有关。

尾加压素Ⅱ抑制葡萄糖激酶的表达和葡萄糖诱导的胰岛素分泌

本研究旨在探讨尾加压素II(urotensin II,UII)对胰岛β细胞功能的影响及其机制。在整体实验中,采用Wistar大鼠进行糖耐量试验,检测不同剂量UII(3、30、300nmol/kg)对大鼠血糖和胰岛素水平的影响;在细胞实验中,βTC-6细胞孵育实验检测UII对葡萄糖引起的胰岛素分泌(glucose-induced insulin secretion,GIIS)的影响,酸化乙醇抽提法和实时荧光定量PCR分别测定细胞内胰岛素含量和mRNA的水平,Western blot检测胰十二指肠同源盒1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)和葡萄糖激酶(glucokinase,GCK)表达水平。糖耐量试验结果显示,相对对照组,急性静脉注射较高剂量的UII(30、300nmol/kg)使大鼠血浆胰岛素浓度在腹腔注射葡萄糖后15min显著下降,并且使大鼠血糖在腹腔注射葡萄糖后90min明显升高。βTC-6细胞孵育实验结果显示,UII孵育2h能抑制βTC-6细胞的GIIS,但是对细胞内的胰岛素含量和mRNA水平没有影响。UII对GIIS的抑制作用可以被UII受体拮抗剂urantide所阻断,部分被蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)非特异性抑制剂chelerythrine chloride(CTC)和生长抑素受体非特异性拮抗剂cyclosomatostatin(CSS)所阻断。Western blot结果显示,UII抑制了βTC-6细胞内GCK的表达,但对PDX-1表达量没有影响。以上结果表明,UII通过激活其特异性受体(较高浓度的UII可能同时激活生长抑素受体)抑制胰岛β细胞GIIS,其作用机制涉及PKC通路的激活、GCK表达受抑所引起的胰岛素颗粒胞吐作用的减弱,但不涉及胰岛素本身表达的下降。

尾加压素Ⅱ在哮喘小鼠气道重塑中的表达

目的：观测小鼠哮喘激发后尾加压素（UrotensinII；U—II）水平及气道形态学参数变化，探究U—II在哮喘气道重塑中的作用。方法：哮喘组：20只健康小鼠，分为2组，用卵蛋白超声雾化激发哮喘，分别连续4周和8周；对照组：生理盐水雾化激发哮喘，观察3组气道形态学参数、血浆及肺泡灌洗液U—II水平有无统计学差异及相关性。结果：血浆及肺泡灌洗液u—II比较，哮喘8周组〉哮喘4周〉对照组，差异有显著性（P〈0．01），气道形态学参数比较，哮喘8周组〉哮喘4周〉对照组，差异有显著性（P〈0．05）；气道形态学参数与哮喘激发时问呈正相关（R=0．96～0．97，P〈0．01）；血浆U—II水平与哮喘激发时间呈正相关（R=0．97，P〈0．01），肺泡灌洗液与血清中U—II含量亦呈正相关（R=0．99，P〈0．01）。结论：U—II可能参与了哮喘的病理生理过程，并参与了哮喘气道重塑。

H_2O_2诱导小鼠肌原细胞系C2C12 UII/UT系统的高表达

目的:观察外源给予H2O2对C2C12细胞中UII/UT系统表达的影响。方法:培养小鼠肌原细胞系C2C12细胞株,应用胎盘蓝染色和测定细胞培养液中LDH的含量检测H2O2对细胞损伤的影响,应用放射免疫的方法检测细胞培养液和裂解液中UII的含量,应用RT-PCR法测定C2C12中UT mRNA的表达,应用Western Blot检测不同浓度H2O2对肌原细胞系C2C12中UT蛋白表达的影响。结果:外源给予不同浓度的H2O2,C2C12细胞裂解液中UII的含量各组间无明显差异,但增加了细胞孵育液中UII的含量,10-4 M和10-3 M时分别增加了83.1%(p<0.01)和94.5%(P<0.01)。低浓度H2O2(0.5×10-6 M,10-6 M,10-5 M,10-4 M)刺激明显增加了UT m RNA的表达,而高浓度的H2O2(10-3M)刺激反而使UT mRNA的表达降低。高浓度的H2O2(10-6 M,10-5M,10-4 M,10-3M)刺激使UT蛋白表达分别增加了200.1%、255.6%、111.1%和100.1%(均p<0.05)。结论:H2O2作为T2DM发病因素之一的活性氧族,可能是T2DM时骨骼肌组织中UII/UT系统表达增加的一个因素。