尾型同源盒基因2、缺氧诱导因子-1α蛋白表达及肿瘤芽孢在结直肠癌中的相关性研究

目的探讨结直肠癌组织中尾型同源盒基因2(cadual homeobox gene 2,CDX2)、缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α蛋白表达情况及肿瘤芽孢间的相关性。方法回顾性收集西安交通大学第一附属医院2012年1月至2015年9月期间符合本研究纳入条件的63例手术切除的结直肠癌标本,利用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接两步法检测CDX2和HIF-1α蛋白表达,光学显微镜下观察染色情况及肿瘤芽孢并对肿瘤芽孢分级,利用Spearman等级相关性检验分析三者之间的相关性。结果CDX2和HIF-1α在结直肠癌组织中的蛋白阳性表达者分别为35例(55.6%)和47例(74.6%),二者的蛋白阳性表达呈负相关(r_(s)=–0.302,P=0.017);CDX2和HIF-1α在结直肠癌组织中芽孢部位的蛋白阳性表达者分别为21例(51.2%)和26例(63.4%),二者的蛋白阳性表达亦呈负相关(r_(s)=–0.336,P=0.031),但未发现肿瘤芽孢分级与结直肠癌组织中CDX2或HIF-1α蛋白阳性表达之间有相关性(r_(s)=0.113,P=0.370;r_(s)=–0.026,P=0.838)。结论从本研究结果看,同一结直肠癌标本及其内芽孢部位中CDX2和HIF-1α蛋白阳性表达均呈负相关,未发现肿瘤芽孢分级与结直肠癌组织中CDX2、HIF-1α蛋白阳性表达之间有关,提示在结直肠癌恶性进展过程中缺氧环境可能参与了CDX2水平的下调。

Musashi-1和尾型同源盒基因2在胃黏膜肠上皮化生中的表达及意义

目的探讨Musashi-1（Msi-1）和尾型同源盒基因2（CDX2）在不同形态胃窦黏膜肠上皮化生中的表达。方法采用回顾性队列研究方法。收集2009年3月至2013年6月郑州大学第二附属医院收治256例胃炎[慢性非萎缩性胃炎（CNAG）46例、萎缩性胃炎伴肠上皮化生210例]患者的临床病理资料。标本取材由2名内镜科医师负责完成，标本送检，由3名病理科医师独立阅片进行病理学诊断。对萎缩性胃炎伴肠上皮化生标本进行胃镜下分型（局灶隆起型、疣状隆起型、“棉絮状”增厚或凹陷型）和黏液染色检查分型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型）；对标本进行免疫组织化学染色检测和免疫荧光双标染色检测。计数资料比较采用，检验。正态分布的计量资料以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验。结果（1）临床检查结果：胃镜分型：210例萎缩性胃炎伴肠上皮化生患者中，局灶隆起型65例，疣状隆起型85例，“棉絮状”增厚或凹陷型60例。黏液染色分型：Ⅰ型肠上皮化生70例，Ⅱ型肠上皮化生75例，Ⅲ型肠上皮化生65例。（2）免疫组织化学染色检测结果：204例患者的标本（CNAG36例、局灶隆起型萎缩性胃炎伴肠上皮化生52例、疣状隆起型萎缩性胃炎伴肠上皮化生68例、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生48例，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肠上皮化生分别为56、60、52例）进行免疫组织化学染色检测。在CNAG组织的腺体颈、峡部发现Msi-1少量阳性表达，在萎缩性胃炎伴肠上皮化生组织中表达呈阳性。Msi-1在CNAG、局灶隆起型、疣状隆起型、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生标本中阳性表达率分别为25．0％（9／36）、69．2％（36／52）、76．5％（52／68）、75．0％（36／48），几者比较，差异有统计学意义（χ^2=31．850，P〈0．05）。局灶隆起型、疣状隆起型、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生Msi—1阳性表达率分别与CNAG比较，差异均有统计学意义（χ^2=16．655，25．714，20．677，P〈0．05）。Msi-1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肠上皮化生组织中阳性表达率分别为71．4％（40／56）、73．3％（44／60）、76．9％（40／52），3者比较，差异无统计学意义（χ^2=0．432，P〉0．05）。CNAG组织中未发现在特定部位CDX2表达增强；在萎缩性胃炎伴肠上皮化生组织的腺体表达明显。CDX2在CNAG、局灶隆起型、疣状隆起型、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生组织中阳性表达率分别为13．9％（5／36）、80．8％（42／52）、82．4％（56／68）、83．3％（40／48），几者比较，差异有统计学意义（，=65．973，P〈0．05）。局灶隆起型、疣状隆起型、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生CDX2阳性表达率分别与CNAG比较，差异均有统计学意义（χ^2=38．289．45．496，39．886，P〈0．05）。CDX2在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肠上皮化生组织中阳性表达率分别为89．3％（50／56）、80．0％（48／60）、76．9％（40／52），3者比较，差异无统计学意义（χ^2=3．102，P〉0．05）。（3）免疫荧光双标染色检测结果：52例患者的标本（CNAG10例、局灶隆起型萎缩性胃炎伴肠上皮化生13例、疣状隆起型萎缩性胃炎伴肠上皮化生17例、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生12例）进行免疫荧光双标染色检测。CNAG组织未发现Msi-1和CDX2双阳性共表达细胞。萎缩性胃炎伴肠上皮化生组织中可见杯状细胞周围Msi-1和CDX2双阳性共表达细胞明显增多。局灶隆起型、疣状隆起型、“棉絮状”增厚或凹陷型萎缩性胃炎伴肠上皮化生中Msi-1和CDX2双阳性共表达率分别为41．4％±11．9％、43．7％±12．7％、42．8％±12．7％，3者比较，差异无统计学意义（F=0．131，P〉0．05）。Msi--1和CDX2双阳性共表达在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肠上皮化生组织中阳性表达率分别为33．8％±10．6％、43．8％±10．1％、51．0％±2．7％，3者比较，差异有统计学意义（F=9．817，P〈0．05）；Ⅰ型分别与Ⅱ、Ⅲ型比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；而Ⅱ型与Ⅲ型比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Msi-1、CDX2、Msi-1和CDX2双阳性的表达与肠上皮化生的3种形态无关；Msi-1和CDX2双阳性共表达可能是肠上皮化生组织向胃黏膜瘤变过程的重要机制之一。

尾型同源盒基因2基因表达对胃癌细胞生长影响的研究

目的观察尾型同源盒基因2（Cdx2）基因过表达对胃癌细胞生物学性状的影响。方法构建人Cdx2真核表达载体，并转染胃癌细胞MGC-803。实验分为四组：未转染组、转染pCMV-HA组、转染pCMV-GAPDH-HA组、转染pCMV-Cdx2-HA组。应用荧光定量PCR检测各组Cdx2基因的表达情况，Western blot法检测各组Cdx2蛋白的表达情况，MTT法观测细胞增殖，透射电镜观察转染细胞形态学的改变，流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果成功构建了pCMV-Cdx2-HA真核表达载体，在瞬时转染pCMV-Cdx2-HA质粒48h的MGC-803细胞有较高水平的Cdx2基因mRNA和蛋白的表达；与未转染组、转染pCMV-HA组、转染pCMV-GAPDH-HA组比较，转染pCMV-Cdx2-HA组的胃癌细胞在转染72h时生长受到明显抑制，G0／C1期比例上升，S期比例下降，胃癌细胞的凋亡率也明显升高（P〈0．05）；转染pCMV-Cdx2-HA的胃癌细胞胞核消失，核染色质固缩、解体，内质网、高尔基复合体膨大成泡状。结论Cdx2基因可明显抑制胃癌细胞的生长，提示Cdx2参与了胃癌的生长调控。

尾型同源盒基因2过表达对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的影响

目的探讨尾型同源盒基因2（Cdx2）过表达对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP的多药耐药性的影响。方法将SGC7901／DDP细胞分为实验组[Cdx2过表达重组慢病毒载体（pCMA-Cdx2-HA）处理]、空载体组[慢病毒载体（pCMA-HA）处理]、对照组（不做处理）3组。MTT法检测各组SGC7901／DDP细胞对化疗药物的敏感性；流式细胞仪检测各组SGC7901／DDP细胞阿霉素的泵出蓄积量、细胞周期分布及凋亡情况；Westernblot技术进一步检测Cdx2蛋白和多药耐药基因1（MDRl）的蛋白表达水平。组间比较采用方差分析。结果SGC7901／DDP细胞感染慢病毒载体72h后，转染效率达90％以上。实验组Cdx2蛋白的相对表达量为0．374-0．06，较空载体组的0．12±0．02和对照组的0．11±0．03明显升高，3组比较，差异有统计学意义（F=82．37，P〈0．05）。实验组SGC7901／DDP细胞对阿霉素、5．氟尿嘧啶和顺铂的半数凋亡浓度分别为（1．10±0．08）mg／L、（4．81±0．12）mg／L、（3．81±0．15）mg／L，均高于空载体组的（0．59±0．05）mg／L、（3．71±0．14）mg／L、（2．20±0．15）mg／L和对照组的（0．63±0．04）mg／L、（3．92±0．15）mg／L、（2．92-4-0．11）mg／L，3组比较，差异有统计学意义（F=158．75，98．06，188．78，P〈0．05）。实验组阿霉素的泵出率为18．20％±0．12％，高于空载体组的7．22％±0．09％和对照组的8．79％4-0．11％，3组比较，差异有统计学意义（F=146．31，P〈0．05）。实验组G．期细胞的比例为52．2％±4．4％，明显低于空载体组的62．0％±5．O％和对照组的67．8％±3．3％；实验组S期的细胞比例为40．4％±1．5％，明显高于空载体组的25．6％±2．O％和对照组的21．8％±1．3％，3组细胞G．期和S期比较，差异均有统计学意义（F=17．08，236．83，P〈0．05）。实验组细胞凋亡率为7．6％±1．3％，明显低于空载体组的11．1％±1．1％和对照组的10．8％±1．0％，3组比较，差异有统计学意义（F=16．29，P〈0．05）。实验组中MDRl蛋白的表达量为1．854-0．18，高于空载体组的1．124-0．08和对照组的1．024-0．09，3组比较，差异有统计学意义（F=76．22，P〈0．05）。结论Cdx2基因的过表达可降低胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP对化疗药物的敏感性，降低化疗药物在胃癌细胞内的蓄积浓度，增强胃癌多药耐药细胞的耐药性。

尾型同源盒基因2沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的逆转

目的探讨尾型同源盒基因2（Cdx2）沉默对逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的影响。方法将对数生长期的人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP接种于培养板中，分为3组：感染RNA干扰Cdx2基因沉默重组慢病毒载体（pLL—Cdx2-shRNA）作为实验组；感染慢病毒空载体作为阴性对照组；空白对照组不做任何处理。Westernblot及RT—PCR检测Cdx2及凋亡相关基因C—myc、cyclinD1、survivin等蛋白及mRNA表达水平；MTT法检测3组细胞对化疗药物阿霉素、5．氟尿嘧啶、顺铂的敏感性；流式细胞技术检测3组细胞阿霉素的泵出率、细胞周期分布及细胞凋亡情况。计量资料用面±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用SNK—q检验，计数资料采用，检验。结果实验组、阴性对照组、空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP中各蛋白相对表达量：Cdx2分别为0．187±0．060、0．535±0．033、0．567±0．014，C—myc分别为0．086±0．004、0．379±0．006、0．354±0．004，cyclin D1分别为0．016±±0．005、0．141±0．003、0．162±0．008，survivin分别为0．276±0．012、0．672±0．009、0．517±0．313，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述蛋白表达量明显下降，差异有统计学意义（F=247．385，3．353，597．882，98．628，P〈0．05）。实验组、阴性对照组、空白对照组mRNA相对表达量：cdx2分别为0．184±0．010、0．894±0．056、0．837±0．049，c—myc分别为0．212±0．022、0．538±0．021、0．545±0．032，cyclinD1分别为0．045±0．009、0．163±0．009、0．157±0．010，survivin分另4为0．401±0．027、0．824±0．016、0．782±0．056，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述基因mRNA表达量明显下降，差异有统计学意义（F=243．776，161．793，138．523，118．426，P〈0．05）。MTT法检测实验组、阴性对照组和空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP阿霉素Ic50值分别为（0．12±0．05）mg／L、（0．33±0．08）mg／L、（0．39±0．15）mg／L，5-氟尿嘧啶Ic50值分别为（0．52±0．13）mg／L、（4．10±1．25）mg／L、（4．05±1．44）mg／L，顺铂Ic50值分别为（0．82±0．13）mg／L、（2．81±0．50）mg／L、（3．28±1．03）mg／L。实验组、阴性对照组、空白对照组中人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP对阿霉素泵出率分别为0．21％、0．37％和0．35％。与阴性对照组和空白对照组比较，实验组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP对阿霉素、5一氟尿嘧啶和顺铂的Ic。值及对阿霉素的泵出率显著降低，差异均有统计学意义（F=8．101，13．854，15．159，X2=7．106，P〈0．05）。实验组、阴性对照组与空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDPG0／G1期细胞比例分别为17．87％、34．71％、37．20％，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组G0／G1期细胞减少，差异有统计学意义（X^2=1．055，P〈0．05）；实验组G1／M期的细胞比例为11．93％，细胞凋亡率为31．13％，均明显高于阴性对照组的0．26％、16．58％和空白对照组的0．35％、13．18％，差异有统计学意K（X^2=2．249，11．030，P〈0．05）。结论Cdx2基因沉默可有效提高人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP对化疗药物的敏感性，增加化疗药物在胃癌细胞内的蓄积浓度，逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP的耐药性。

尾型同源盒基因-2过表达对结肠癌细胞生物学性状的影响

目的观察尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞生物学性状的影响,探讨CDX2基因在结肠癌发生发展中的作用。方法克隆人结肠CDX2基因,构建含CDX2的pEGFP-C1-CDX2表达载体,同时设pEGFP-C1空载体组及空白对照组。利用脂质体法将pEGFP-C1-CDX2和pEGFP-C1质粒分别转染Lovo细胞,应用Western blotting技术检测Lovo细胞中CDX2基因的表达;应用MTT法及流式细胞仪检测CDX2对Lovo细胞增殖、凋亡及周期的影响;应用ELISA法检测CDX2过表达对Lovo细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。结果成功构建含CDX2真核表达载体。瞬时转染pEGFP-C1-CDX2的Lovo细胞48 h有较高水平的CDX2蛋白的表达;与pEGFP-C1空载体组及空白对照组比较,转染pEGFP-C1-CDX2组的Lovo细胞在转染72 h时生长未见明显抑制,G1期及S期所占比例无明显改变,凋亡率亦无明显增加(P均>0.05),但MMP-2分泌明显减少(P<0.05)。结论 CDX2过表达对Lovo细胞增殖、凋亡及周期无明显影响,但能够明显减弱Lovo细胞的侵袭力,从而对结肠癌浸润转移起抑制作用。

下调尾型同源盒基因-2对结肠癌细胞的侵袭及迁移能力的影响及其机制

目的观察下调尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探讨CDX2基因在结肠癌发生发展过程中的作用及机制。方法构建CDX2RNAi慢病毒载体,并转染人结肠癌SW480、HT29细胞,应用Western blotting及qRT-PCR技术检测CDX2基因的干扰效率;应用Transwell及划痕实验检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞侵袭、迁移能力的影响;Western blotting及RT-PCR检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因(E-cadherin、ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail)表达的影响。结果构建的CDX2RNAi慢病毒载体可有效地抑制SW480、HT29细胞中CDX2基因的表达;转染LV-CDX2-shRNA组与转染空病毒组(LV-NT-shRNA)及空白对照组相比,侵袭、迁移能力显著增强(P<0.05);且E-cadherin表达下降,ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail表达均升高。结论下调CDX2可诱导EMT发生,从而增强结肠癌细胞的侵袭迁移能力。

携带人尾型同源盒基因-2基因慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的构建尾型同源盒基因-2(CDX2)基因的慢病毒表达载体并进行鉴定。方法 PCR扩增CDX2基因片段后,将其克隆入慢病毒表达载体pWPI,通过PCR、酶切和测序鉴定重组质粒。重组质粒转染包装细胞293T后获得包装的病毒颗粒。病毒颗粒感染直肠癌细胞XB1847,经PCR和Western Blot证明重组慢病毒携带的CDX2在XB1847细胞内表达的情况。结果经PCR扩增、酶切及测序验证,重组质粒构建成功,命名为pWPI-CDX2。PCR和Western Blot证明重组慢病毒感染XB1847细胞后CDX2能稳定表达。结论成功构建了携带CDX2的慢病毒载体,为研究CDX2在直肠癌中的功能提供了实验基础。

SIVA-1基因和Cdx2基因在胃癌发生发展中的作用、作用机制及其相互作用研究进展

胃癌的发生发展过程是一个多种因素诱发、多个基因和信号通路共同参与的复杂严密的过程。细胞凋亡诱导因子SIVA-1可通过XIAP/TAK1/TAB1以及ARF-MDM2-p53等信号通路诱导细胞凋亡,参与胃癌的演化过程并发挥抑癌基因作用。尾型同源盒基因2(Cdx2)则可通过p53和PTEN/PI3K/Akt等通路影响胃黏膜肠上皮化生,在胃癌中扮演着癌基因或抑癌基因的双重角色,与其在转录或翻译水平的修饰变化、调控的下游通路表达失调有密切关系。两者在胃癌演化过程中所涉及的信号通路存在密切交互并发挥重要作用。SIVA-1和Cdx2可通过PTEN/AKT、Caspase家族以及NF-κB p65等分子和信号通路发生相互作用,并可能循着同一信号通路影响胃癌的发生发展。

shRNA干扰CDX2基因表达对裸鼠结直肠癌肝转移瘤的影响

目的:建立人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型,探讨干扰尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2,CDX2)基因表达对结直肠癌肝转移瘤的影响。方法:通过慢病毒载体将CDX2-shRNA体外转染人结直肠癌细胞SW480、HT29,筛选建立稳定干扰CDX2基因表达细胞株和阴性病毒细胞株;将稳定干扰CDX2基因表达的结直肠癌细胞(SW480-KD、HT29-KD)、空白对照细胞(SW480-CON、HT29-CON)和阴性对照细胞(SW480-NC、HT29-NC)接种到裸鼠脾下极包膜内,建立裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型,每天称量裸鼠体质量并观察其摄食、活动及精神情况;50 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝转移瘤情况。结果:成功构建裸鼠结直肠癌肝转移模型,H-E染色确认为结直肠癌肝转移。各细胞干扰组(SW480-KD、HT29-KD)裸鼠体质量明显低于相应空白对照组和阴性对照组[SW480-KD:(15.02±2.00)vs(18.00±2.48)、(18.03±2.05)g;F=3.761,P<0.05;HT29-KD:(15.39±2.16)vs(17.96±2.48)、(18.30±1.87)g;F=3.721,P<0.05]。SW480-KD组肝转移瘤数目明显多于SW480-CON组和SW480-NC组[(57.83±22.56)vs(29.50±16.90)、(28.20±15.40)个;F=4.197,P<0.05];HT29-KD组肝转移瘤数目明显多于HT29-CON组和HT29-NC组[(56.83±29.16)vs(26.40±12.76)、(21.00±11.50)个;F=4.467,P<0.05)]。结论:脾注射法裸鼠肝转移模型可作为体内研究基因功能的理想模型;干扰CDX2基因表达可促进结直肠癌SW480和HT29细胞在体内的转移。

上调CDX2基因表达对人胃癌SGC-7901细胞miRNA表达谱及生物学功能的影响

目的:筛选上调尾型同源盒基因2(caudal type homeobox gene 2,CDX2)基因表达时人的胃癌细胞SGC-7901中差异表达的miRNA并预测其靶基因,并观察其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:提取瞬时转染48 h后空载体组(转染P E G F P-N1组)和转染组(转染P E G F P-N1-C D X2组)细胞的总R N A,应用m i R N A芯片检测差异表达的miRNA,并通过Miranda、TargetScan、Mirtarget2软件预测其靶基因,通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析了解靶基因功能.CCK8法检测细胞增殖能力,划痕试验、Transwell小室、细胞黏附实验检测各组细胞体外迁移黏附能力.结果:PEGFP-N1-CDX2组较空载体组有59种差异表达的miRNA,其中25种miRNA发生2倍以上表达上调,34种miRNA发生2倍以上表达下调.通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析得到部分miRNA靶基因功能,这些靶基因参与了肿瘤的发生、发展、转移及预后.与对照组相比,PEGFP-N1-CDX2组的胃癌细胞生长、迁移和黏附能力均明显受到抑制(P<0.05).结论:上调CDX2基因表达可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长,抑制其迁移黏附能力,CDX2基因的抗肿瘤作用可能与miRNA有关.

CDX2基因在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的研究尾型同源盒基因2(caudal homeobox gene,CDX2)在急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓和外周静脉血单个核细胞中的表达及与治疗反应、预后的关系。方法通过实时荧光定量PCR方法检测32例ALL患者初发及诱导化疗后骨髓和外周静脉血单个核细胞CDX2基因表达,并检测8名健康人外周静脉血单个核细胞作为对照。结果 32例ALL患者血和骨髓单个核细胞均检测到CDX2基因表达,静脉血中位表达水平794.69(189.05~3480.76),骨髓中位表达水平819.70(221.23~3081.42),血和骨髓CDX2基因表达具有正相关(r=0.506,P=0.001)。以第一个四分位数为界划分低表达组和高表达组,32例ALL患者高表达24例(75.0%)。8名健康人外周静脉血单个核细胞CDX2基因中位表达水平417.49(240.60~519.32),与ALL患者静脉血CDX2基因表达差异有统计学意义(P<0.01)。免疫表型CD34阳性与CD34阴性两组CDX2基因高表达有统计学意义(P=0.002)。CDX2基因高低表达组诱导化疗完全缓解率差异无统计学意义(P>0.05)。23例诱导化疗后患者CDX2基因表达低于化疗前(t=6.320,P<0.01)。9例复发患者CDX2基因表达比首次诱导缓解后水平显著升高(t=-6.343,P<0.01)。结论 CDX2基因表达变化反映患者体内白血病细胞负荷,可能是预后不良指标之一,可能有望作为染色体正常核型组ALL微小残留监测指标。

不同亚型肠上皮化生和胃癌中CDX2蛋白的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨不同亚型肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)中尾型同源异型盒基因2(CDX2)蛋白的表达及其与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的关系。方法应用免疫组化检测42例慢性萎缩性胃炎(CAG),46例CAG伴IM,34例癌旁组织伴IM,50例胃癌中CDX2蛋白的表达,应用HID-AB染色将80例IM分为Ⅰ型27例,Ⅱ型23例,Ⅲ型30例。应用HE染色、快速尿素酶试验和血清H.pylori-IgG抗体联合检测H.pylori感染,将80例IM分为H.pylori感染阳性组46例和H.pylori感染阴性组34例。结果Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IM各组中H.pylori阳性率分别为66.67%,65.22%和43.34%,各组间比较差异无统计学意义(x^2=3.953,P>0.05),CDX2蛋白表达阳性率分别为85.19%,69.57%和36.67%,Ⅲ型IM组显著低于Ⅰ型、Ⅱ型IM组(x^2=13.899,P<0.001和x^2=5.638,P=0.018),Ⅰ型、Ⅱ型IM之间差异无统计学意义(x^2=1.766,P=0.184)。各型IM组与胃癌组比较,Ⅰ型、Ⅱ型IM组CDX2表达阳性率显著高于胃癌组(x^2=14.517,P<0.001和x^2=5.509,P<0.05),而Ⅲ型IM组与胃癌组差异无统计学意义(x^2=0.088,P>0.05)。80例IM中H.pylori阳性组CDX2表达阳性率显著高于H.pylori阴性组(76.09%vs 44.12%,x^2=8.525,P=0.004)。不同亚型IM间比较,在Ⅰ型、Ⅱ型IM中,不同H.pylori感染情况下CDX2表达阳性率差异无统计学意义,但Ⅲ型IM中H.pylori阳性组CDX2表达阳性率显著高于H.pylori阴性组(P=0.023)。胃癌组中不同H.pylori感染情况下CDX2表达阳性率差异无统计学意义。结论 H.pylori感染可能通过影响不同亚型IM中CDX2的表达,进而导致IM的进展及胃癌的发生。

Cdx2蛋白在不同亚型肠上皮化生中的表达及其与H. pylori感染的关系

目的探讨胃黏膜肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)中尾型同源异型盒基因2(caudal type homeobox genes 2,Cdx2)蛋白的表达及其与幽门螺杆菌(helicobacter pylori,H.pylori)感染的关系。方法选取内镜下活检的18例正常胃黏膜和53例IM胃黏膜。采用高铁二铵-爱先蓝-过碘酸雪夫反应(HID-AB-PAS)将胃黏膜IM分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,然后用Cdx2单克隆抗体进行免疫组织化学染色,检测Cdx2在正常胃黏膜及不同亚型IM中的表达。采用一分钟快速尿素酶实验及甲苯胺蓝染色检测H.pylori感染。结果Cdx2蛋白在正常胃黏膜中不表达,IM中Cdx2阳性表达率为83.02%(44/53),其中Ⅰ型IM阳性率为95.45%(21/22),Ⅱ型为83.33%(15/18),Ⅲ型为61.53%(8/13),三者间Cdx2蛋白表达有显著性差异(P=0.036)。IM中H.pylori感染阳性率为47.17%(25/53),其中Ⅰ型IM中H.pylori感染阳性率为27.27%(6/22),Ⅱ型为55.56%(10/18),Ⅲ型为69.23%(9/13),三者间H.pylori感染率亦有显著性差异(P=0.038)。Cdx2蛋白表达主要集中于H.pylori感染阴性者,但H.pylori感染阳性者和阴性者Cdx2表达无统计学差异(P>0.05)。结论Cdx2蛋白异常表达可能参与了胃黏膜IM向胃癌的转变,检测其表达有助于预测胃黏膜IM向胃癌转变的可能性。

人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系

目的:探讨人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系。方法:不同浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞株,甲基化特异性PCR(MSP)检测用药前后CDX2启动子甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和WesternBlot分别检测CDX2和DNMT1 mRNA和蛋白表达。结果:MKN45细胞株CDX2基因启动子区域高甲基化,CDX2 mRNA表达极低,蛋白不表达;经3种浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞72 h后,细胞中CDX2 mRNA和蛋白表达均出现上调,而DNMT1表达出现下调。结论:CDX2基因表达下调与其启动子CpG岛高甲基化有关,DNMT1可能参与该过程的调节。

尾型同源异型盒基因2、肿瘤坏死因子α蛋白表达及幽门螺杆菌感染与慢性胃病伴肠上皮化生关系研究

目的 探讨慢性胃病伴肠上皮化生（IM）与尾型同源异型盒基因2（Cdx2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白表达及幽门螺杆菌（Hp）感染间的关系.方法 行胃镜检查并活检患者130例,依据典型病理分型分为胃炎组（30例）、IM组[100例,包括轻度IM组（30例）、中度IM组（35例）、重度IM组（35例）],检查每组Hp感染情况,免疫组织化学方法检测Cdx2、TNF-α蛋白表达情况.结果 IM组Cdx2、TNF-α蛋白阳性表达率明显高于胃炎组[78.0％（78/100）比6.7％（2/30）、60.0％（60/100）比16.7％（5/30）],差异有统计学意义（P＜0.01）;而且IM组Hp阳性和阴性时Cdx2、TNF-α蛋白阳性表达率均明显高于相应胃炎组[Cdx2蛋白：79.4％（50/63）比1/10、75.7％ （28/37）比5.0％（1/20）,TNF-α：74.6％ （47/63）比4/10、35.1％（13/37）比5.0％（1/20）],差异有统计学意义（P＜0.01）.中度IM组和重度IM组Cdx2蛋白阳性表达率明显高于轻度IM组[80.0％（28/35）和97.1％（34/35）比53.3％（16/30）],重度IM组高于中度IM组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;四组内不同Hp感染情况时Cdx2蛋白阳性表达率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.轻度IM组与中度IM组TNF-α蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义（P＞0.05）,重度IM组TNF-α蛋白阳性表达率明显高于轻度IM组和中度IM组[80.0％（28/35）比40.0％（12/30）和57.1％（20/35）],差异均有统计学意义（P＜0.05）;胃炎组、轻度IM组、中度IM组、重度IM组内Hp阳性患者TNF-α蛋白阳性表达率明显高于Hp阴性患者（4/10比1/20、47/63比13/37、10/18比2/12、15/21比5/14、22/24比6/11）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Cdx2、TNF-α蛋白表达及Hp感染与IM程度关系密切,故监测Cdx2、TNF-α蛋白表达水平有助于判断IM程度,并为如何逆转IM提供了一定依据.

MCM7和CDX2蛋白在Ⅱ期结直肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨微型染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance proteins 7,MCM7)和尾型同源盒基因-2蛋白(caudal-related homeobox gene 2,CDX2)在Ⅱ期结直肠癌组织中的表达水平及其与预后相关的临床意义.方法:采用免疫组织化学法检测220例Ⅱ期结直肠癌患者癌组织与癌旁组织中MCM7和CDX2蛋白的表达水平;分析MCM7和CDX2蛋白的表达与Ⅱ期结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系.结果:MCM7蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为62%,显著高于癌旁正常组织(12%,P<0.001).CDX2蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率76%,显著低于癌旁正常组织(98%,P<0.01).M C M7和C D X2蛋白的表达与Ⅱ期结直肠癌患者的性别、年龄和浸润深度均无关(P>0.05),MCM7的表达仅与肿瘤的分化程度呈正相关(P<0.01),CDX2蛋白的表达仅与肿瘤的分化程度呈负相关(P<0.01).在结直肠癌组织中,MCM7和CDX2蛋白的表达呈负相关(r=-0.773,P<0.05).生存分析的结果显示,220例Ⅱ期结直肠癌患者的中位无病生存时间为51 mo.MCM7阳性/CDX2阴性患者的预后最差,而MCM7阴性/CDX2阳性患者的预后最好.结论:MCM7和CDX2蛋白表达水平的联合检测对预测Ⅱ期结直肠癌患者的预后具有重要的临床意义,但是否可作为判断结直肠癌患者预后的标志物仍需进一步研究.

直肠癌组织CDX2蛋白表达及其临床意义

目的探讨直肠癌患者尾型同源盒基因-2(CDX2)蛋白的表达情况及临床意义。方法采用Western Blot检测50例直肠癌组织及癌旁组织CDX2蛋白的表达,以20例健康人的正常直肠组织作为对照组。结果 CDX2蛋白在癌组织中表达量低于癌旁组织(P<0.05);CDX2蛋白在癌旁组织中表达量低于对照组(P<0.05);CDX2蛋白在直肠癌组织中的表达量与Dukes分期、组织分化、淋巴结转移和3年生存率有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤的部位及病理组织学分类无明显关系(P>0.05)。结论 CDX2蛋白的表达情况可作为评估直肠癌肿瘤恶性程度、临床分期及侵袭转移的参考指标;检测CDX2蛋白表达有助于判断直肠癌患者预后。

CDX2基因与白血病关系的研究进展

尾型同源盒基因（CDX）家族成员CDX2基因是促进胚胎发育和参与造血调控的主控基因.新近研究发现,CDX2在各型白血病中异常表达,是与白血病发生、发展和颅后相关的新的致白血病基因,可望成为白血病微小残留病检测的泛基因标志.CDX2通过调节HOX基因参与白血病转化,进一步探讨CDX2的致白血病机制及其与白血病的关系,对预测白血病复发及个体化、靶向治疗意义重大.

HIF-1α与CDX2在结直肠腺癌组织中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与基因系尾型同源盒基因2(CDX2)蛋白在结直肠腺癌组织中的表达及其与结直肠癌发生、发展的关系,并且研究HIF-1α与CDX2表达之间的相关性。方法收集62例结直肠腺癌及20例正常结直肠组织标本,采用免疫组化SABC法检测标本中HIF-1α、CDX2蛋白的表达,并采用Spearman等级相关分析分析HIF-1α与CDX2表达之间的相关性。结果在20例正常结直肠黏膜组织中HIF-1α及CDX2蛋白表达阳性率分别为5.0%(1/20)及95.0%(19/20),在62例结直肠腺癌组织中HIF-1α及CDX2蛋白表达阳性率分别为62.9%(39/62)及69.4%(43/62),不同组织中蛋白表达的差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠腺癌中,HIF-1α、CDX2蛋白的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及Dukes分期有关(P<0.05);Spearman等级相关分析表明,HIF-1α与CDX2的表达呈负相关(r=-0.293 2,P<0.05)。结论 HIF-1α表达上调、CDX2表达下调可能与结直肠腺癌的发生有关,且这两者间呈负相关。HIF-1α可能参与调控CDX2的表达,进而加速了结直肠癌的恶性进展。