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题名荚膜红细菌尿卟啉原Ⅲ转甲基酶的纯化及其酶学性质
被引量:1
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作者
康洁
房欢
董会娜
宋文军
张大伟
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机构
天津商业大学生物技术与食品科学学院
中国科学院天津工业生物技术研究所
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出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期55-67,共13页
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基金
国家自然科学基金(Nos.21506244
31370089)
+2 种基金
天津市自然科学基金(Nos.14ZCZDSY00065
15JCQNJC09500
16JCYBJC23500)资助~~
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文摘
S-腺苷-_L-甲硫氨酸依赖型尿卟啉原Ⅲ转甲基酶(S-adenosy-_L-methionine uroprophyrinogenⅢmethyltransferase,SUMT)催化尿卟啉原Ⅲ(UroprophyrinogenⅢ,urogenⅢ)的中心碳原子C-2和C-7位上甲基化生成前咕啉-2,是维生素B12生物合成途径中的一步关键酶,但大部分SUMT受其底物urogenⅢ和副产物S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosy-_L-homocysteine,SAH)的抑制作用。为了挖掘能耐受高浓度urogenⅢ的转甲基酶,文中从荚膜红细菌Rhodobacter capsulatus SB1003中克隆2个SUMT基因(RCcobA1,RCcobA2),经表达与纯化后,检测发现RCcobA1和RCcobA2的酶活分别为27.3 U/mg和68.9 U/mg,后者比VB_(12)工业生产菌株脱氮假单胞菌Pseudomonas denitrificans中内源的SUMT(PDcob A,27.9 U/mg)高2.4倍,并且当urogenⅢ浓度高达70μmol/L时都几乎不受抑制作用。因此,RCcobA2的发现可以为解除VB_(12)合成途径的瓶颈以及提高VB_(12)产量提供理论支持和方向指导。
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关键词
维生素B12
尿卟啉原ⅲ转甲基酶
尿卟啉原ⅲ
酶偶联法
荚膜红细菌
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Keywords
vitamin B12
uroporphyrinogen ⅲ methyltransferase
uroporphyrinogen ⅲ
tandem-enzyme reaction
Rhodobacter capsulatus
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
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