苛求芽孢杆菌尿囊酸酰胺水解酶性质的研究

研究了苛求芽孢杆菌尿囊酸酰胺水解酶的基本性质、稳定性及调节。粗酶作用于尿囊酸的Ｋｍ为７．１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为５０μｍｏｌ／Ｌ·ｍｉｎ－１·ｍｇ－１蛋白质。Ｃｏ２＋、Ｎｉ２＋、Ｃｄ２＋可部分代替Ｍｎ２＋作为金属辅因子，活力分别为对照的１７％，１４％和１１％。Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋分别抑制酶活力（％）：１６、４０和１００。Ｃｏ２＋、Ｎｉ２＋、Ｃｄ２＋存在时，酶活力被抑制（％）：５８、２８和５９。酶贮于－２０℃６个月未失活。研究了酶的热稳定性和ｐＨ稳定性。该酶对乙醇相当敏感。测试了近６０种化合物对酶反应的效应，其中乙二酰脲、羟基脲、草酸、延胡索酸、柠檬酸、苹果酸、草酰乙酸、丙酮酸、乙酰氧肟酸（全为１０ｍｍｏｌ／Ｌ）、３－磷酸甘油酸、氨基氧乙酸（全为５ｍｍｏｌ／Ｌ）分别抑制酶活力（％）：１０、７０、１０、１０、１０、２０、５０、４０、９５、２３和４４。

四季豆幼苗中尿囊酸酰胺水解酶的一些特性(英文)

酰脲代谢在许多固氮豆科植物氮素代谢中起重要作用;尿囊酸的酰胺水解酶(EC3.5.3.9)分解尿囊酸成为脲基乙醇酸和 CO2、NH3,脲基乙醇酸的酰胺水解酶进一步分解脲基乙醇酸产生乙醛酸和 CO2、NH3。该文首次报告测定四季豆尿囊酸降解酶(分解尿囊酸的酶)的方法, 酶反应基质需要盐酸苯肼存在。在四季豆干种子、幼苗根、茎和叶, 均可测出尿囊酸降解酶活力。从四季豆幼苗分离出两个尿囊酸降解酶。一个分子量大于200 kD,另一个分子量为 13.5 kD;小分子量的尿囊酸降解酶(没有脲基乙醇酸酰胺水解酶或脲酶活力)用于性质研究。酶反应产物分析表明,该酶是尿囊酸的酰胺水解酶。该酶反应的最适pH为8.5。Mn2+ 是该酶的金属辅助因子。Km 为 76 μmol/L,Vmax 为 16.7 nKat/mg (=1 002 nmol min-1 mg-1)。乙醛酸和乙醇酸抑制该酶活力。赖氨酸残基和色氨酸残基是酶活力的必需基团;巯基和酪氨酸残基不是酶活力的必需基团。

四季豆幼苗尿囊酸酰胺水解酶的纯化和性质研究(简报)

从四季豆幼苗提取、部分纯化尿囊酸酰胺水解酶，分离出两个同功酶：一为大分子量同功酶（尿囊酸酰胺水解酶Ⅰ），另一为小分子量同功酶（尿囊酸酰胺水解酶Ⅱ），并对后者的性质进行研究。