尿斑蛋白Ⅲ在SD大鼠前列腺各叶的表达及意义

目的探索老年雄性SD大鼠前列腺导管内皮尿斑蛋白Ⅲ(UPⅢ)的表达情况。方法随机取5只SD大鼠,予水合氯醛麻醉后取膀胱、前列腺部尿道及前列腺组织行病理连续切片完成HE染色和免疫组织化学染色(免疫组化),检测其中尿路上皮和UPⅢ的表达。另10只SD大鼠同法取膀胱、前列腺腹侧叶和侧叶3个部位组织,随机均分2组,分别采用蛋白质免疫印迹(WB)和实时定量荧光酶联聚合反应(RT-PCR)检测3个部位中UPⅢ的表达。结果 HE结果显示:膀胱和前列腺部尿道内可见尿路上皮细胞,呈极性排列;前列腺导管尿道开口处也可见尿路上皮细胞,未呈极性排列,其尿路上皮细胞随着前列腺导管向腺泡腔底部延伸,数量逐渐减少,细胞排列由极性转变为非极性,直至转化为单层极性排列的腺上皮细胞。免疫组化显示UPⅢ在膀胱、前列腺部尿道和前列腺导管内皮均有阳性表达,前列腺导管内皮的阳性表达随着导管向腺泡腔底部延伸而逐渐转为阴性。WB结果显示膀胱、前列腺腹侧叶和侧叶UPⅢ的表达量分别为2 277.20±95.90、1 665.00±78.36和27.40±10.29(P<0.05);RT-PCR结果显示UPⅢ在3个部位的表达量分别为26.60(26.48～26.88)、31.87(31.23～32.24)和0.00(0.00～17.00)(P<0.05)。结论老年雄性SD大鼠前列腺导管内皮表达一定量的UPⅢ,说明前列腺导管内存在尿路上皮,将为研究前列腺切除术后创面修复机制奠定基础。

尿路上皮细胞在老年SD大鼠前列腺导管内的表达情况

目的:探索老年雄性SD大鼠前列腺导管内是否存在尿路上皮细胞及其形态特点。方法:取5只老年雄性SD大鼠,水合氯醛麻醉后取尿道、前列腺及膀胱组织,完成病理切片和HE染色,观察前列腺导管内尿路上皮细胞的表达情况。免疫组化检测SD大鼠3种组织内CK7、CK20和尿斑蛋白Ⅲ(UroplakinⅢ,UPⅢ)的表达情况。另取10只老年雄性SD大鼠,同法将膀胱、前列腺腹侧叶和前列腺侧叶组织取出碎冰保存,随机分为实验组和空白对照组,每组5只大鼠,以UPⅢ阳性设门检测不同部位前列腺组织中是否存在UPⅢ阳性的细胞及其表达情况。结果:HE染色可观察到SD大鼠前列腺导管开口处存在形态与膀胱和尿道尿路上皮细胞相似的尿路上皮细胞,但该细胞未呈现典型的伞状细胞结构;其免疫组化CK7和UPⅢ阳性、CK20阴性。随着前列腺导管延伸至管腔底部,CK7和UPⅢ的表达逐渐减低,直至消失。流式细胞学检测结果表明前列腺腹侧叶及侧叶组织内有UPⅢ阳性的细胞,该细胞分别占各组织内细胞总数的(55.96±3.85)%和(50.76±3.99)%。结论:老年雄性SD大鼠前列腺导管内存在与膀胱尿路上皮相似的尿路上皮细胞,但该细胞未呈现典型的伞状细胞形态结构;该细胞免疫组化CK7和UPⅢ表达阳性。

尿路上皮屏障相关蛋白在前列腺导管内的表达及意义

目的:探索老年雄性SD大鼠前列腺导管内尿路上皮屏障的表达情况。方法:随机选取10只SD大鼠,予水合氯醛麻醉后取膀胱、前列腺部尿道及前列腺组织行病理连续切片,完成苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色,检测各组织尿斑蛋白Ⅲ(UPⅢ)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)及闭锁蛋白(Occludin)的表达。另取20只SD大鼠同法取膀胱、前列腺腹侧叶和侧叶组织,随机均分两组,分别采用蛋白质免疫印迹(Western blot)和实时定量荧光酶联聚合反应(RT-PCR)检测各组织中UPⅢ、ZO-1和Occludin的表达。结果:HE染色结果显示膀胱和尿道内见极性排列尿路上皮细胞;前列腺导管尿道开口处见未呈极性排列的尿路上皮细胞,随着前列腺导管向腺泡腔底部延伸,前列腺导管开口处的尿路上皮细胞数量逐渐减少,最终转化为单层极性排列的腺上皮细胞。免疫组织化学染色示UPⅢ、ZO-1和Occludin在膀胱、尿道和前列腺导管开口处均呈阳性表达,其中UPⅢ在前列腺导管开口处的阳性表达随着导管向腺泡腔底部延伸而逐渐转为阴性,而ZO-1和Occludin在前列腺导管中均呈阳性。Western blot结果示膀胱、前列腺腹侧叶和侧叶3个部位UPⅢ的蛋白表达量分别为2 273.20±95.91、1 656.40±81.30和28.00±8.86;ZO-1蛋白表达量分别为1 811.20±87.10、845.20±110.14和30.00±16.17,Occludin蛋白表达量分别为1 911.20±71.56、916.80±104.22和32.80±6.72。RT-PCR检测结果示3种相关蛋白均在膀胱内表达,其中UPⅢ和Occludin也在前列腺中表达,腹侧叶表达高于侧叶,ZO-1在前列腺中表达极低。结论:老年雄性SD大鼠前列腺导管内存在一定量的尿路上皮屏障,这将为研究前列腺切除术后创面屏障的修复机制奠定基础。

老年SD大鼠前列腺导管内尿路上皮屏障的病理学特点

目的观察老年雄性SD大鼠前列腺导管内尿路上皮屏障的病理学特点。方法取10只老年雄性SD大鼠,予水合氯醛麻醉后取膀胱、前列腺部尿道及前列腺组织行病理连续切片,完成HE染色镜检和免疫组织化学染色法分别检测组织内细胞角蛋白7(CK7)、细胞角蛋白20(CK20)、尿斑蛋白Ⅲ(UPⅢ)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)及闭锁蛋白(Occludin)的表达情况;各抗体免疫组化结果行平均吸光度(IA)值分析。结果HE染色观察到在膀胱、前列腺部尿道和前列腺导管近端存在尿路上皮伞状细胞。免疫组织化学染色示膀胱、前列腺部尿道及前列腺导管中CK7、UPⅢ、ZO-1及Occludin均呈阳性,CK20呈阴性;CK7和UPⅢ在前列腺导管近端呈阳性,导管腺泡腔底部呈阴性;ZO-1和Occludin在前列腺导管中呈阳性。IOD/Area显示CK7和UPⅢ在膀胱、前列腺部尿道、前列腺导管近端、中段和腺泡腔底部的表达分别为0.16、0.13、0.06、0.05、0.00和0.17、0.16、0.08、0.05、0.00(P<0.05);ZO-1和Occludin在膀胱(0.14和0.13)表达高于其他部位(0.11~0.12和0.09~0.10,P<0.05);ZO-1和Occludin从前列腺导管近端到中段和腺泡腔底部表达无明显差异(0.12~0.11和0.09~0.09,P>0.05);CK20的IA值极低(0.00~0.01,P>0.05)。结论老年雄性SD大鼠前列腺导管内存在部分尿路上皮屏障,随着前列腺导管逐渐延伸至腺泡腔,尿路上皮屏障逐渐消失。该结果为进一步研究前列腺切除术后尿路上皮屏障的修复奠定基础。