实时定量PCR技术与短时培养法检测尿样本HCMV的比较

目的建立实时定量PCR系统定量检测尿样本中HCMV并与短时培养快速诊断半定量法比较。方法根据HCMVul123基因保守区设计特异性引物和taqman探针,以GAPDH为内参照校准所检测样本的细胞数,建立实时定量PCR检测系统,定量检测132份尿标本中HCMV拷贝数与短时培养结果比较,并同时分析19例接受更昔洛韦治疗前后尿排毒量的变化。结果132份尿标本实时定量PCR结果:短时培养(-)组HCMVDNA为(83±155)拷贝/5×105细胞(n=16例),(+)组为(571±231)拷贝/5×105细胞(n=26例),(++)组为(792±303)拷贝/5×105细胞(n=35例),(+++)组为(1126±416)拷贝/5×105细胞(n=16例),(++++)组为(2201±1043)拷贝/5×105细胞(n=9例);19例38份更昔洛韦治疗前后尿样本中3例治疗前后短时培养结果无改变,而实时定量结果明显改变。结论实时定量PCR法比短时培养法更适于评价抗病毒疗效,而短时培养法判断HCMV是否为活动感染优于实时定量PCR法。

疑似尿路感染患者中段尿样本培养的病原菌种类和耐药性分析

目的分析疑似尿路感染患者中段尿样本培养的病原菌种类和耐药性。方法选取2020年1月至2020年8月我院收治的125例疑似尿路感染患者中段尿样本,对中段尿样本进行病原菌培养与药敏检测,分析病原菌种类,观察病原菌的耐药性。结果革兰氏阴性菌是尿路感染的主要病原菌,其中大肠埃希菌(49.60%)、肺炎克雷伯菌(10.40%)以及粪肠球菌(8.80%)位居前三位。大肠埃希菌对氨苄西林的耐药性高;肺炎克雷伯菌除对氨苄西林存在天然耐药情况对头孢呋辛的耐药性高;粪肠球菌对四环素以及红霉素的耐药性高;屎肠球菌对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、青霉素以及红霉素的耐药性极高,达到100%。结论革兰阴性菌是尿路感染的主要致病菌,对抗菌药物的耐药性比较高,临床在对尿路感染患者进行治疗时,需要结合病原菌的耐药性选择合适的抗菌药物,改善患者的预后,促使患者尽早康复。

品管圈在提高肾内科尿样本留取率中的护理应用

通过对肾内科尿标本留取进行品管圈管理,有效提高尿标本留取合格率。方法对2012年8月~2013年7月在我科所有住院病人的尿标本留取情况进行分析,针对影响合格留取的因素,2013年8月成立尿标本留取管理小组,制订护理质量持续改进措施,对改进后的尿标本留取情况进行再评估。结果2013年9月~2014年8月尿标本合格率为99.08%,高于2012年8月~2013年7月的合格率(86.05%);医生对护士工作的满意度由83.67%提高到96%;住院患者的平均住院日由15.42天缩短至9.53天,人均住院费用由7100元减少至6071.5元。结论实施品管圈管理,能有效提高尿标本留取合格率,从而缩短住院天数,减少住院开支,提高护理工作质量。

硫胺素(维生素B_1)选择电极的制备与尿样本的测定

我们最近研制的传感器是应用特异性选择电极来测定样本中的硫胺素（维生素B1）含量,测定效果满意。该电极的线性范围在10-2～10-7mol/L,下限可达5×10-8mol/L。现报告如下:

超高效液相色谱-串联质谱联用快速测定尿样中14种镇静催眠类药物

建立了尿样中14种镇静催眠类药物的超高效液相色谱-串联质谱快速定量分析的方法。将尿样离心,取上清液用流动相稀释后过膜,经Waters BEH C18色谱柱分离,在多反应监测(MRM)模式下,以外标法定量测定14种镇静催眠类药物含量。结果表明,14种目标化合物在5.86~300μg/L或7.74~500μg/L范围内线性关系良好,相关系数r>0.999,方法的检出限为0.18~2.32μg/L,定量限为0.59~7.74μg/L。尿样加标回收率为86.84%~118.6%,批内和批间精密度(RSD)分别为0.56%~3.85%和1.54%~7.93%。该方法简单、快速,准确度和精密度满足定量检测需求,可实现尿样中14种镇静催眠类药物的测定。

HPLC同时检测血清和尿样中肌酐、假尿苷、尿酸

用反相高效液相色谱法同时测定了３９例糖尿病患者的血清和尿样中的假尿嘧啶核苷、肌酐和尿酸，并与２４ｈ尿白蛋白排泄量进行了比较分析。发现血清假尿嘧啶核苷是糖尿病肾病早期诊断的一种新颖而敏感的指标，有助于连续监测肾脏的功能状态以了解病程的转归。

应用表面增强拉曼光谱技术快速检测尿样中的β-兴奋剂

应用表面增强拉曼光谱技术与化学计量法相结合分析克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺3种β-兴奋剂的标准溶液。在取自10头猪的尿样中,分别添加5个不同浓度的莱克多巴胺(1～20mg/L),采用快速的液液萃取法对样品进行前处理,再进行表面增强拉曼测试。结果表明,克伦特罗和沙丁胺醇标准溶液的最低检测浓度为2μg/L,莱克多巴胺标准溶液的最低检测浓度为0.1mg/L;通过偏最小二乘法建立模型进行定量分析,3种药物的实际值与预测值的相关系数(R2)为0.9134～0.9368;本方法可检测尿样中1mg/L莱克多巴胺,经外部验证后模型的实际值与预测值的相关系数(R2)为0.881,相对分析误差(RPD)为2.83;分析尿液中的莱克多巴胺含量所需时间小于30min,为快速检测莱克多巴胺提供新途径。

电喷雾解吸电离质谱法用于临床尿样的直接分析

将电喷雾解吸电离质谱(DESI-MS)用于临床尿样的分析,优化了电喷雾溶剂流速、电喷雾电压和喷雾锥距离等重要参数.采用普通滤纸作为样品载体,在不需要样品预处理的前提下同时快速测定了临床尿样中的钾、钠、尿素、尿酸、丙酮酸和肌苷等多种成分,并对各种成分的主要离子进行了串联质谱鉴定.DESI-MS在进行多组分同时测定时不需要进行样品预处理,缩短了测定时间,单个样品的分析时间不到1 m in.同时,采用内标法对所测定组分进行了半定量分析.

同步-导数荧光光谱法测定尿样中的痕量氧氟沙星

尿样中内源激素等物质发射强的荧光 ,严重干扰氧氟沙星的测定。经过同步和一阶导数处理 ,很好地分辨了尿样背景和氧氟沙星的荧光信号。据此提出了尿样中痕量氧氟沙星含量测定的同步 导数荧光光谱法。测定样品的线性范围为 :0 36～ 3 6 μg·mL-1,检测限 0 30 μg·mL-1,回收率 10 1%～ 10 3% ,相对标准偏差小于 2 5 %。

丹磺酰氯柱前衍生-超高效液相色谱-串联质谱法测定人体尿样中的环己胺

建立丹磺酰氯柱前衍生-超高效液相色谱-串联质谱法测定人体尿样中环己胺的方法。冷冻样品经解冻、离心后,用丹磺酰氯衍生,固相萃取小柱净化。目标化合物采用Waters ACQUITY CSH^(TM)C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以甲醇和0.002 mol/L乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源电离、正离子多反应监测模式质谱检测。环己胺在2.5~200μg/L浓度范围内有较好的线性关系,相关系数大于0.999,回收率为98.7%~102.3%,精密度为3.1%~5.2%,检出限和定量限分别为1.0和3.0μg/L。结果表明,本方法操作简单、准确可靠,可适用于人体尿液中环己胺的定量分析。应用本方法测定200份学生尿液样品,环己胺检出率为34.5%。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿样中4种痕量的乌头类生物碱

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)结合中空纤维微萃取(HF-LPME)同时检测尿样中痕量的乌头碱、次乌头碱、新乌头碱和滇乌头碱等4种生物碱的方法。采用HF-LPME对尿样进行提取、纯化和富集,富集倍数达102～301。同时采用电喷雾电离(ESI)、多反应监测(MRM)进行含量测定,显著提高了尿液中乌头类生物碱的检测灵敏度,4种乌头类生物碱的定量限达到0.01～0.1 ng/L,可大大延长中毒患者尿样中乌头类生物碱的检测时间窗。方法验证结果表明,尿液中乌头碱、新乌头碱和滇乌头碱在0.01～10 ng/L、次乌头碱在0.1～100 ng/L范围内线性关系良好,提取回收率为80.2%～109%,相对标准偏差小于4.6%。该方法适用于乌头类生物碱中毒案件的检测,为痕量乌头类生物碱分析提供了灵敏的分析方法。

气相色谱-质谱法同时测定动物尿样中莱克多巴胺和克伦特罗

建立了固相萃取-气相色谱-质谱法（SPE-GC／MS）同时测定动物尿样中的莱克多巴胺和克伦特罗的方法。试样中的药物经乙酸乙酯提取后，经SLH固相萃取柱净化，氮吹至干，衍生化后进行气相色谱一质谱测定。两种药物的检出限均为0．3μg／L，定量限均为1．0μg／L，线性范围为0．02～1．0μg／L。加标浓度在4．0～20．0μg／L范围内．莱克多巴胺加标回收率为78．6％～101．2％，批内相对标准偏差≤7．0％；克伦特罗加标回收率为92．3％～112．2％．批内相对标准偏差≤6．9％。

导数-同步荧光光谱法直接测定尿样中的洛美沙星

研究了洛美沙星在不同 pH值介质中的荧光特性 ,发现在 pH =3 3时 ,洛美沙星荧光波长有 4 0nm红移 ,据此建立了一种导数 同步荧光光谱法直接测定尿样中洛美沙星的新方法。经样品测定 ,其检测限为0 35mg·L- 1 ,平均回收率为 97%～ 10 4 % ,相对标准偏差为 0 83%～ 1 6 2 %。

人体食源性盐酸克伦特罗尿样兴奋剂阳性可能性研究

目的:研究由食源性盐酸克伦特罗造成人体尿样兴奋剂检测阳性的可能性。方法:首先测定采用盐酸克伦特罗定量饲养的猪六个部位的肌肉组织中的盐酸克伦特罗含量,再使两名受试者进食烹饪熟的已知盐酸克伦特罗含量的猪肉及猪肝,最后检测受试者尿样是否呈克伦特罗阳性。检测猪肉及猪肝中克伦特罗采用液质联用法,检测受试者尿样中的克伦特罗采用兴奋剂常规方法——气质联用法。结果表明,单次食用猪肉制品中盐酸克伦特罗总量不超过1μg,则不会产生兴奋剂检测阳性。但服用克伦特罗一定残留量的动物组织会导致尿液克伦特罗阳性。

高效液相色谱化学发光检测人体血清及尿样中的盐酸肾上腺素

研究发现,盐酸肾上腺素在碱性条件下能显著增强铁氰化钾-鲁米诺化学发光强度.基于此建立了新的测定肾上腺素的方法.本方法以C18 反相键合相为色谱柱,用 0.01 mol/L邻苯二甲酸氢钾-甲醇(92∶ 8 , V/V)为流动相,实现了对人体血清及尿样中盐酸肾上腺素的分离与测定.在最适宜条件下,方法的线性范围为 10～5000 μg/L;检出限为 4.0×10-6g/L;相对标准偏差为 3.0%(n=11).

液相色谱-电喷雾离子阱质谱法分析大鼠尿样中的黄芩苷及其异构体

采用液相色谱 -电喷雾离子阱串联质谱 ( LC/ MSn)技术分析了大鼠分别灌胃和静脉注射给予黄芩苷后尿样中原形药及其异构体的化学结构以及其排泄情况。根据代谢物的多级质谱和紫外吸收光谱数据推测 ,两种给药途径均检测到原形药黄芩苷及其异构体黄芩素 6-O-葡萄糖苷酸。收集大鼠灌胃 ( 1 0 0 mg/ kg)和静脉注射 ( 1 5 mg/ kg)给予黄芩苷后 0～ 48h尿样 ,以槲皮素作为内标 ,经乙酸乙酯提取后 ,以甲醇 -水 -甲酸 ( V(甲醇 )∶ V(水 )∶ V(甲酸 ) =60∶ 40∶ 1 )混合液为流动相 ,用 Diamonsil C18柱进行分离 ,采用电喷雾离子阱质谱 ,以选择反应监测 ( SRM)方式检测尿中黄芩素的两种葡萄糖醛酸结合物。黄芩素 6-O-葡萄糖苷酸的形成 ,说明黄芩苷在胃肠道可水解成苷元形式重新与葡萄糖醛酸结合 ,然后被排出体外。大鼠灌胃给予黄芩苷后 ,黄芩苷和黄芩素 6-O-葡萄糖苷酸的尿样累积排泄量分别为 1 .49%和 0 .77% ;大鼠静脉注射给予黄芩苷后黄芩苷和黄芩素 6-O-葡萄糖苷酸的尿样累积排泄量分别为 3 0 .80 %和 0 .2 8% ;以药物原形和尿药浓度评价黄芩苷在大鼠体内的绝对生物利用度为 4.84%。

气相色谱法分析尿样中六种有机磷农药代谢产物

[目的 ]本文采用气相色谱法进行人尿样中 6种二烷基磷酸酯类代谢物 (DMP、DEP、DMTP、DETP、DMDTP、DEDTP)定量分析。 [方法 ]将尿样与乙腈混溶、蒸发 ,以二丁基磷酸酯 (DBP)作为内标 ,用五氟溴苄苯 (PFB)作为衍生试剂 ,5 0℃下衍生反应 16h ,用气相色谱法 /火焰光度检测器进行分析。 [结果 ]代谢物浓度在 10 0 μg/L时 ,6种化合物的回收率均大于 66% ,最低检出限范围为 2 μg/L～ 15 μg/L。 [结论 ]结果表明 ,该方法可用于监测职业人群对有机磷农药的接触水平。

气相色谱-质谱联用快速筛查尿样中麻醉剂类药物

为了快速检测尿样中的麻醉剂类药物(可待因,双氢可待因,四氢大麻酚酸,苯甲酰爱康宁,6-乙酰吗啡,吗啡,羟考酮),建立了气相色谱-质谱联用检测方法。尿样经葡萄糖醛酸甙酶酶解后,采取HLB Oasis反相固相萃取柱纯化,氮气吹干后衍生化,采用HP-5MS柱(25m×0.2mm×0.33μm)色谱分离,程序升温,质谱检测,SIM方式采集。该方法的检测限为5mg/L,在添加高、中、低3种浓度的相对回收率分布在75%～123%,满足常规检测要求,样品前处理简单、快速、结果可靠。

液相微萃取-高效液相色谱法测定尿样中的利多卡因

应用液相微萃取与高效液相色谱联用技术快速分析尿样中的利多卡因。考察了萃取溶剂、体积、萃取时间及料液 pH值对液相微萃取的影响 ,建立了液相微萃取与高效液相色谱联用技术分析尿样中利多卡因的方法。优化的实验条件为 :料液 pH值 12 .0 ,萃取溶剂为 5 μL邻苯二甲酸二丁酯 ,萃取时间 4 0min ,搅拌速度 80r/min。方法的线性范围为 0 .2～ 5mg/L ;检出限为 0 .1mg/L ;相对标准偏差小于 6 .3%。通过液相微萃取后 ,能有效地去除检测尿样中利多卡因的干扰物质 ,获得了较高的选择性。该方法简便、快速、灵敏、消耗有机溶剂少 ,是尿样中利多卡因检测的一种有效方法。