基于肠肾轴理论探讨耳穴压豆对尿毒症透析患者肠源性尿毒素的影响及相关机制探讨

目的:探讨基于肠肾轴理论耳穴压豆对尿毒症透析患者肠源性尿毒素的影响。方法:通过便利抽样法选取广东省第二中医院2021年01月—2022年01月住院的52例尿毒症透析患者,均给予基于肠肾轴理论耳穴压豆法治疗,比较治疗前后肾功能指标、血清肠源性尿毒症毒素硫酸对甲酚(PCS)、硫酸吲哚酚(IS)、便秘症状积分,使用16S rDNA测序分析观察微生态指标肠道菌群变化。结果:治疗后、随访4周血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清肠源性尿毒症毒素PCS、IS、便秘症状积分均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。尿毒症透析患者治疗后肠道菌群多样性明显增加,尿毒症透析患者治疗后肠道菌群仍旧以变形杆菌、厚壁菌门为主,其中拟杆菌门相对比治疗前丰度增下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:基于肠肾轴理论耳穴压豆可有效减轻尿毒症血液透析患者肾功能受损程度,降低PCS、IS水平,调节大便性状,改变肠道菌群结构。

大黄-丹参药对对慢性肾衰竭模型大鼠肠源性尿毒素含量和肠道屏障功能的影响

目的:研究大黄-丹参药对对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠肠源性尿毒素含量和肠道屏障功能的影响。方法:将55只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(45只),假手术组大鼠分离肾组织但不切除,造模组大鼠采用5/6肾切除法复制CRF模型。造模成功后(剔除死亡和不成模大鼠5只),将模型大鼠分为模型组(水)、尿毒清颗粒组(2.5 g/kg)和大黄-丹参药对高、低剂量组(6、3 g/kg,以生药量计),每组10只。假手术组和模型组大鼠灌胃等体积水,各给药组灌胃相应药物,每天1次,连续12周。末次给药后,采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量和24 h尿液中尿肌酐(Ucr)含量,并计算肌酐清除率(Ccr);采用超高效液相色谱-电喷雾串联三重四极杆质谱法同时测定大鼠血清中尿毒素[氧化三甲胺(TMAO)、硫酸吲哚酚(IS)、硫酸对甲酚(PCS)]的含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法、免疫荧光法分别检测大鼠回肠组织中闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白1(ZO-1)的m RNA和蛋白表达水平;采用苏木素-伊红染色法、Masson染色法观察大鼠肾组织的病理学变化;采用透射电镜法观察大鼠结肠组织的超微结构变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清中Scr、BUN、TMAO、PCS、IS含量均显著升高(P<0.01),尿液中Ucr含量和Ccr及回肠组织中Occludin、ZO-1的mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);肾组织中肾小球硬化、肾小管扩张,肾间质可见炎性细胞浸润和纤维化;结肠上皮屏障结构重度损伤。与模型组比较,各给药组大鼠血清中Scr、BUN、TMAO、PCS、IS含量均显著降低(P<0.05或P<0.01);尿液中Ucr含量和回肠组织中Occludin、ZO-1的mRNA及蛋白表达水平均显著升高(大黄-丹参药对低剂量组的ZO-1 mRNA除外,P<0.05或P<0.01);肾间质炎性细胞浸润、纤维化程度和结肠上皮屏障结构损伤程度均减轻。结论:大黄-丹参药对能有效保护CRF模型大鼠残存的肾功能,其作用机制可能与降低大鼠血清中肠源性尿毒素含量,上调回肠组织中Occludin、ZO-1的mRNA及蛋白表达水平从而改善肠道屏障功能有关。

爱西特对小分子尿毒素的吸附作用及其影响因素

目的 :研究爱西特对小分子尿毒素的吸附能力及影响其吸附的因素。方法 :将尿素、肌酐、尿酸标准品加入蒸馏水配成尿毒素溶液并加入爱西特作用不同时间 ,检测其尿毒素成份。干扰组分别加胆汁、氨基酸、林格氏液、葡萄糖液、HCl和NaOH ,并同时加入爱西特吸附后检测尿毒素浓度变化。结果 :尿素、肌酐、尿酸浓度 5min开始下降 ,尿素 4 0min达最低值 ,5 0min后有反弹 ,肌酐、尿酸 1 0～ 30min达最低值 ,以后趋稳定。胆汁、氨基酸、电解质、葡萄糖液、酸碱等对爱西特吸附尿酸无明显影响 ,但对尿素、肌酐吸附有不同程度减弱作用 ,胆汁、氨基酸对尿素干扰最大 ,葡萄糖液、酸碱次之 ;pH 2 .0液对肌酐吸附干扰最大 ,葡萄糖次之。结论 :爱西特对尿素、肌酐、尿酸有良好的吸附能力 ,但随着吸附时间的延长 ,吸附能力下降。胆汁、含氮物。

爱西特吸附血清中小分子尿毒素的作用观察

目的研究同一剂量不同时间和不同剂量同一时间爱西特(活性炭)对血清中小分子尿毒素的吸附作用。方法分组:慢性肾衰患者血清150μL中加入10mg爱西特,分别作用30、60、120、和240min。慢性肾衰患者血清250μL中分别加入10mg及20mg爱西特作用30min。以上各组离心后,取上清液检测其尿素、肌酐、尿酸浓度。结果血清中尿素、肌酐、尿酸浓度均显著下降,30min时肌酐、尿酸绝大部分被吸收。60min后各组间尿酸、肌酐浓度相比较(P>0.05)差异无显著性,尿素浓度略有上升趋势。结论爱西特在血清中对尿素、肌酐、尿酸有良好的吸附能力。但随着吸附时间的延长,吸附能力下降。单位体积中加大爱西特剂量,对尿素吸附能力上升。

丁酸梭菌对慢性肾衰竭犬肠道菌群及血清小分子尿毒素含量的影响

本试验旨在研究丁酸梭菌对慢性肾衰竭(CRF)犬肠道菌群及血清小分子尿毒素含量的影响。选取20条2岁左右的雄性贵宾犬,随机分成4组:假手术对照组(CL组)、模型组(MD组)、低剂量丁酸梭菌组(LCB组)和高剂量丁酸梭菌组(HCB组),每组5只。CL组只做腹腔打开手术,其余3组肾动脉结扎制作CRF模型。造模成功后,LCB组和HCB组分别按每天0.5、1.0 g/kg BW的剂量灌喂丁酸梭菌,进行为期4周的干预。检测血清和粪便尿素氮(UN)、肌酐(Cr)和硫酸吲哚酚(IS)含量,并对肠道菌群16S rDNA进行高通量测序。结果表明:1)试验结束时(第4周),LCB组和HCB组的血清UN、Cr和IS含量极显著低于MD组(P<0.01),但极显著高于CL组(P<0.01);与LCB组比较,HCB组的血清UN、IS含量显著降低(P<0.05),血清Cr含量极显著降低(P<0.01)。试验结束时,HCB组的粪便UN、Cr含量均显著低于MD组(P<0.05),CL组的粪便UN、Cr含量均显著低于MD组、LCB组和HCB组(P<0.05)。2)饲喂丁酸梭菌均降低CRF犬肠道菌群的α多样性,HCB组的Chao1指数、Shannon指数显著低于MD组(P<0.05)。主坐标分析(PCoA)结果显示4组样本间发生明显聚类。3)在门水平上,MD组的肠道放线菌门(Actinobacteria)和变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度显著高于CL组(P<0.05),LCB组和HCB组的肠道Actinobacteria、Proteobacteria的相对丰度均显著低于MD组(P<0.05);在属水平上,饲喂丁酸梭菌可降低CRF犬肠道变形杆菌属(Proteus)、埃希氏菌属(Esche-richia)、肠杆菌属(Enterobacter)、普氏菌属(Prevotella)、放线菌属(Actinomyces)和涅斯捷连科氏菌属(Nesterenkonia)的相对丰度。LEfSe分析发现,CRF犬肠道菌群有19个具有差异的生物标志物,主要集中于Actinobacteria、Proteobacteria,饲喂丁酸梭菌可减少CRF犬生物标志物的差异。4)Spearman相关性分析显示,血清UN、Cr和IS含量与Enterobacter、Proteus和Escherichia相对丰度存在较强的正相关关系,与乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)相对丰度存在较强的负相关关系。由此可见,CRF犬肠道菌群紊乱与血清小分子尿毒素含量之间存在相关性,丁酸梭菌可通过调节CRF犬肠道菌群结构,促进血清小分子尿毒素的清除,以每天1.0 g/kg BW添加量为宜。

慢性肾衰患者中医证型与血清肠源性尿毒素关系研究

目的:探讨慢性肾功能衰竭(以下简称慢性肾衰)非透析患者中医证型与血清肠源性尿毒素之间的关系。方法:对87例慢性肾衰非透析患者进行中医辨证分型,本虚证分为脾肾气虚、肝肾阴虚、脾肾阳虚、气阴两虚等证型,标实证按其主要表现归为湿浊证、湿热证、水湿证、血瘀证4种证型,并分别于入院后3天内检测血肌酐(C)r、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、硫酸吲哚酚(IS)等尿毒素水平,运用方差分析进行比较。结果:87例患者,有73例属脾肾气虚证,占83.9%;7例属脾肾阳虚证,占8.0%;6例属气阴两虚,占6.9%;仅1例属肝肾阴虚,占1.1%。标实证方面,湿热证39例(44.8%),湿浊证27例(31.0%),水湿证14例(16.1%),血瘀证7例(8.0%)。不同类型的本虚证组别之间的各种尿毒素水平比较,差异无显著性意义(P>0.05)。湿热证组的IS水平与水湿证组、湿浊证组、血瘀证组比较,差异有显著性意义(P<0.05),表现为湿热证组的IS水平显著高于其余证型组;其余各组的IS水平组间比较,差异无显著性意义(P>0.05)。提示IS与中医湿热证之间可能有着密切联系,甚于与湿浊、水湿、血瘀等证型。此外,湿热证组与水湿证组之间、湿热证组与血瘀证组之间的Cr水平均存在明显差异(P<0.05);湿浊证组与血瘀证组之间的Cr水平也存在组间差异(P<0.05),湿热证组和湿浊证组之间的Cr水平则没有明显差异(P>0.05),初步提示Cr与中医之湿热证、湿浊证有一定的关系,其相关性强于其与血瘀证、水湿证。结论:慢性肾衰非透析患者湿热证型与血清Cr、IS水平的相关性强于其他实证证型,提示这些肠源性尿毒素蓄积可能主要表现为湿热证候,为临床辨证论治清除尿毒症肠源性毒素提供一定的指导。

肾衰康2号抗肾纤维化及其尿毒素清除作用的研究

目的观察肾衰康2号对5/6肾切除大鼠所致慢性肾衰肠道清除尿毒素及其延缓肾脏纤维化的作用。方法将5/6肾切除大鼠分为肾衰康治疗组和对照组,并设假手术组为正常对照。普通喂养10周后检测各组的血清及粪便尿素氮、肌酐,并留取肾组织作病理,免疫组化法检测肾组织内纤维连接蛋白(FN)的表达水平。结果肾衰康2号治疗组血清尿素氮、肌酐较对照组下降(P<0.05),粪便尿素氮、肌酐水平较对照组升高(P<0.05),病理切片显示治疗组残余肾小球体积、直径与对照组相比明显减小(P<0.05),肾小球系膜细胞、基质的增生程度亦明显减轻(P<0.05),免疫组化显示,治疗组肾小球内FN的沉积比对照组减少(P<0.05)。结论肾衰康2号有延缓肾纤维化,促进尿毒素排泄的作用。

不同血液净化方式对维持性血透患者尿毒素清除效果的评价

目的:探究不同血液净化方式对维持性血透患者尿毒素清除成效,并对其进行评价。方法:选取2014年2月——2016年3月期间在我院接受维持性血透的患者90例,并将其随机分为三组,分别为研究组血液灌流联合血液透析、对照组1血液透析以及对照组2血液透析滤过。对三组患者的临床效果以及透析前后的尿毒素清除效果进行对比分析。结果:研究组患者透析后的尿毒素清除总有效率100.00%明显优于两组对照组76.67%和70.00%,差异显著具有统计学意义(P<0.05),研究组患者的不良反应发生率6.67%也明显低于两组对照组33.33%和30.00%,差异显著具有统计学意义(P<0.05),对照组1与对照组2透析后的尿毒素清除效果以及患者的不良反应发生率均无明显差别,不具有统计学意义(P>0.05)。结论:以上三种血液净化方式均可对维持性血透患者清除不同成分的尿毒素,但血液灌流联合血液透析对维持性血透患者尿毒素的清除效果更为显著,无论是从患者的角度还是医者的角度都有很大程度的优势,指的临床应用并推广。

尿毒素三肽和氢化可的松协同延长小鼠异位移植心肌的存活时间

目的：研究人工合成的尿毒素三肽（Ｈ－Ｈｉｓ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－ＯＨ和Ｈ－Ｈｉｓ－Ｇｌｙ－Ｇｌｕ－ＯＨ）对异位移植心肌移植排斥的影响。方法：将Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ新生乳鼠的半心移植到Ｂａｌｂ／ｃ成年小鼠耳后皮肤夹囊内，记录移植心肌电位的变化作为判别心肌存活的指标。结果：尿毒素三肽能显著延长异位移植心肌组织的存活时间。氢化可的松和尿毒肽的混合作用比单独给予尿毒素肽或氢化可的松作用强，并存在协同效应。结论：尿毒素三肽具有抑制小鼠异位移植心肌排斥的作用。氢化可的松和尿毒素三肽可协同延长异位移植心肌组织的存活时间。

不同血液净化方式对维持性血液透析患者尿毒素的清除效果

目的探讨不同血液净化方式对维持性血液透析(MHD)患者尿毒素的清除效果。方法 60例MHD患者,随机分为血液透析(HD)组、血液透析滤过(HDF)组、血液灌流(HP)联合血液透析(HP+HD)组,每组20例。收集患者的临床资料,并检测透析前后血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(sCr)、全段甲状旁腺激素(iPTH)、硫酸吲哚酚(IS)、硫酸对甲酚(PCS)、同型半胱氨酸(Hcy)和晚期糖基化终末产物(AGEs)水平。结果 HD组、HDF组和HP+HD组透析后BUN、sCr水平均显著低于同组透析前(P值均<0.05),HDF组和HP+HD组透析后iPTH水平均显著低于同组透析前(P值均<0.05),HD组透析前后iPTH水平的差异无统计学意义(P>0.05);HDF组和HP+HD组iPTH下降率均显著高于HD组(P值均<0.05),3组间BUN、sCr下降率的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。HD组透析前后IS、PCS、Hcy、AGEs水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05),HDF组和HP+HD组透析后IS、PCS、Hcy、AGEs水平均显著低于同组透析前(P值均<0.05);HDF组和HP+HD组IS、PCS、Hcy、AGEs下降率均显著高于HD组(P值均<0.05)。结论 3种血液净化方式均能有效清除小分子毒素,HDF和HP联合HD清除iPTH的效果明显优于HD,HDF与HP联合HD清除蛋白结合毒素的效果相当。

慢性肾衰患者尿毒素对肠道细菌的作用

取慢性肾衰病人和健康人粪便行需氧培养，并分别将其肠道大肠杆菌接种于肾衰病人血清培养基中培养，测定培养前后培养基中尿素氮、肌酐、尿酸量以观察细菌对以上尿毒素的降解作用。结果显示，慢性肾衰患者肠道大肠杆菌能明显降解尿素氮、肌酐、尿酸。

高通量血透对尿毒症患者血尿毒素清除率及血脂代谢的影响

目的 :通过应用高通量透析器进行血液透析 (HPD)与常规血液透析 (CHD)进行比较 ,观察HPD对血尿毒素清除率及血脂代谢的影响。方法 :将 13例常规血透患者随机分成两组 :HPD组 8例 (用F6 0透析器 ) ,CHD组 5例 (用F6透析器 ) ,进行血透 2年 ,观察两组患者血尿毒素清除率及血脂变化情况。结果 :透析前后BUN、Scr、UA下降率HPD组优于CHD组 ;HPD组β2 M下降率明显优于CHD组。HPD组患者血清甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白 (LDL)降低 ,高密度脂蛋白 (HDL)升高 ;CHD组患者TG、LDL升高 ,HDL降低 ;两组胆固醇 (CHOL)变化不明显。结论 :高通量透析可更好地清除血尿毒素 。

思密达吸附小分子尿毒素物质的实验与临床观察

目的：观察思密达对肌酐(Cr)．尿素氮(BUN)．尿酸(UA)，无机磷(Pi)及钾离子(K^+)的吸附能力。方法：以健康人新鲜稀释尿液中Cr、BUN、UA、Pi、K^+作为溶质，以思密达，爱希特，包醛氧淀粉作为吸附剂。结果：思密达的吸附能力优于包醛氧淀粉及爱希特。结论：思密达对小分子尿毒素物质的吸附作用最佳。

尿毒康合剂改善慢性肾病大鼠肠源性尿毒素蓄积的研究

目的 研究尿毒康合剂改善慢性肾病(CKD)大鼠肠道屏障促进肠源性尿毒素代谢作用。方法 用5/6肾切除法复制CKD大鼠模型,假手术组大鼠分离肾组织但不切除。将CKD大鼠分为模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组10只。假手术组和模型组均给予等体积饮用水;对照组按2.5 g·kg^(-1)剂量给予0.25 g·mL^(-1)浓度尿毒清颗粒;低、中、高剂量实验组分别按5.0,10.0和20.0 mL·kg^(-1)剂量给予尿毒康合剂原液。6组大鼠每天给药1次,连续12周。末次给药后取材,用超高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱法同时测定大鼠血清中尿毒症毒素[氧化三甲胺(TMAO)、硫酸吲哚酚(IS)、硫酸对甲酚(PCS)]的含量,用免疫荧光法检测大鼠回肠组织中闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白1(ZO-1)蛋白的表达水平。结果 高剂量实验组、对照组、模型组和假手术组的血清TMAO分别为(0.48±0.04),(0.52±0.56),(2.06±0.34)和(0.22±0.02)μg·mL^(-1),血清IS分别为(2.23±0.23),(2.18±0.26),(10.51±1.52)和(1.48±0.11)μg·mL^(-1),血清PCS分别为(0.46±0.10),(0.24±0.08),(1.06±0.17)和(0.29±0.11)μg·mL^(-1),回肠组织Occludin表达量分别为0.72±0.04,0.70±0.03,0.34±0.02和1.00±0.00,回肠组织ZO-1表达量分别为0.83±0.06,0.76±0.06,0.40±0.05和1.00±0.00。高剂量组和对照组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 尿毒康合剂能够改善慢性肾病大鼠肠源性尿毒素蓄积的作用。

石榴皮鞣质降低尿毒素作用的研究

目的:研究石榴皮鞣质降低尿毒症毒素的作用。方法:用200mg.kg-1腺嘌呤溶液连续灌胃致Wistar大鼠产生类似慢性肾衰的症状。2wk后,分别用石榴皮鞣质(30、20、10mg.kg-1.d-1)灌胃,4wk后处死大鼠,取血、留取肾组织,测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、甲基胍(MG)、胍基琥珀酸(GSA)、钙离子(Ca2+)和磷离子(P3+),进行统计学处理,并进行形态学观察。结果:石榴皮鞣质可降低慢性肾衰竭大鼠的血Scr、BUN、MG、GSA和P3+水平,升高Ca2+水平,疗效显著优于模型组,且石榴皮鞣质可使慢性肾衰竭大鼠肾结构基本恢复正常。结论:石榴皮鞣质有一定的降低尿毒症毒素作用。

肾衰康组成中药对低分子尿毒症毒素的体外吸附作用

目的:观察肾衰康中各单味中药对尿素氮、肌酐、尿酸的体外吸附作用,探索肾衰康冲剂对尿毒素清除的作用机理。方法:用不同中药制成的水煎剂和焙干研末配制成50、100、150mg/ml浓度分别与尿素、肌酐、尿酸混合液作用,分别作用30、60、90、120min后离心,测定各组液体中残余尿毒素浓度。结果:煅牡蛎、枳壳煎剂50mg/ml组尿素、肌酐的浓度较对照组明显下降(P<0.05),100、150mg/ml组中各尿毒素都有明显下降(P<0.01)。焙剂则各组下降均有非常显著差异(P<0.01)。100mg/ml的煎剂及焙剂30min后下降差异即明显持续至90min后趋于恒定,在30、60、90min组中随时间延长,药物对尿毒素的吸附量增加。结论:肾衰康中5味中药对体外配制的尿素氮、肌酐、尿酸有下降作用,可能的机制是直接吸附作用。

三种尿毒素诱导高级氧化蛋白产物的生成

目的探讨尿毒症患者体内长期积蓄的高水平尿毒素是否会通过参与高级氧化蛋白产物（AOPP）的生成而介导蛋白质的氧化损伤。方法以丙二醛（10mmol／L）、马尿酸（20mmol／L）和对甲酚（10mmol／L）为尿毒素代表。人血清白蛋白（HSA）、健康人和尿毒症患者血浆用20mmol／L的PBS（pH7．4）统一调整到质量浓度为50g／L，随后分别加入尿毒素至指定浓度。对照组内不加任何尿毒素。37℃分别温育0．5h和24h后，分别测定各组的AOPPs、蛋白巯基及二酪氨酸浓度。高效液相色谱（HPLC）法用于观察蛋白质的交联聚集情况。结果与对照组相比，尿毒素组的AOPP浓度平均增加了121．5％（P〈0．05）。尿毒素尚可降低蛋白巯基浓度，降低幅度平均达14．7％（P〈0．05）；同时蛋白二酪氨酸水平增至119．2％（P〈0．05）。HPLC结果表明尿毒素可以时间依赖性方式显著诱导高分子量AOPP（HMW—AOPPs）的生成，平均增幅为148．4％～333．3％（P〈0．05）。结论小分子类尿毒素可通过时间依赖性方式诱导HMW．AOPPs的生成而介导蛋白质的氧化损伤。除了髓过氧化物酶（MPO）-H2O2-Cl-通路的激活之外，尿毒素的介导损伤也是较为重要的体内AOPP生成机制之一。

血液透析中尿毒素两室模型实验验证的研究

为了揭示血液透析过程中溶质在体液中的传递规律，我们制做了尿毒症实验动物犬模型进行血液透析实验，采用肌肉活体组织活检测定组织细胞内尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）的浓度，同时取血样测定其血浆水平，发现组织细胞内BUN和Cr的浓度与其血浆浓度随时间变化具有明显的差异。因此，从实验上直接证实了人体体液两室模型理论的假设，提示人体细胞内代谢物质的传递与排他是不均一的，细胞内的物质进入血液需要克服一定的传质阻力。实验结果为合理地评价透析的充分性提供了理论根据。