尿流式细胞术在快速筛查及鉴别尿路感染病原菌中的应用

目的 探讨尿流式细胞术在尿培养前对于疑似菌尿进行快速筛查的价值,以规范抗菌药物使用和减少不必要的尿培养。方法 收集2022年1-8月在该院就诊或住院的1 221例疑似尿路感染患者的UF-5000尿有形成分分析仪检测相关参数,并与尿培养结果比较。以尿培养为金标准,绘制受者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC)及最佳cut-off值以评估筛查性能,采用Kappa值评估革兰阳性/阴性菌鉴定的一致性。结果 1 221例患者中,尿培养阳性率为31.6%,最常见革兰阴性菌感染占64.5%,真菌感染占12.4%。与大肠埃希菌尿路感染患者比较,肺炎克雷伯菌尿路感染患者的白细胞计数(WBC)和红细胞计数(RBC)升高(P=0.008、0.026),而肠球菌属尿路感染患者的WBC降低(P=0.003)。在明确尿路感染诊断方面,细菌计数(BACT)优于WBC,对于BACT,老年女性优于老年男性,但老年男性最佳cut-off值略高于老年女性。在筛查尿培养阴性方面,老年男性人群中采用BACT<156.4/μL或WBC<15/μL时,灵敏度为88.6%,阴性预测值为93.4%,与尿培养一致率为73.0%,可减少47.1%不必要的尿培养;老年女性人群中,BACT<134.7/μL或WBC<15/μL时,灵敏度为90.8%,阴性预测值为91.3%,与尿培养一致率为71.3%。在革兰阳性/阴性菌鉴定方面,UF-5000尿沉渣分析仪正确识别率为76.1%,与尿培养结果的Cohen′s Kappa值为0.764(P<0.001)。结论 尿流式细胞术是一种快速、简便、有效的疑似尿路感染筛查方法,特别是针对老年人群,有利于建立尿路感染筛查最佳cut-off值,为临床诊疗提供参考依据。

尿流式细胞术检测对移植肾急性排斥反应的诊断

目的:探讨尿流式细胞术检测对移植肾急性排斥反应的诊断价值。方法:对63例肾移植术后患者在住院期间出现血肌酐值升高,均行尿流式细胞术检测,结果与临床诊断作对比分析。结果:急性排斥反应患者的尿液细胞数超过10000以上的占97.6%,CD54阳性细胞的占81.8%,CD103阳性细胞占57.6%,HLA-DR阳性细胞占90.9%;在其他患者中,缺少特异性抗原的表达。结论:尿液中HLA-DR、CD54、CD103阳性细胞可作为急性排斥反应的特异标志。尿流式细胞术能区分急性排斥反应与其他因素引起的移植肾功能损伤。尿流式细胞术可作为评价移植肾功能的检测指标。

尿流式细胞术、MALDI-TOF MS及VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统联合试验对尿培养标本的药敏鉴定结果评价

目的评价尿流式细胞术、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统联合试验对中段尿培养标本直接鉴定结果的可靠性。方法收集2021年1-10月于苏州市第九医院住院的296例泌尿系统感染患者送检的尿培养阳性标本。采用UF-1000i进行尿液标本菌量计数,选择中段尿菌量计数>10^(5)个/毫升的标本,使用MALDI-TOF MS技术进行直接鉴定;再将中段尿菌量计数>10^(5)个/毫升的标本进行稀释,使用VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统进行直接药敏试验,将联合试验结果与常规药敏试验结果进行比较,评价其可靠性。结果MALDI-TOF MS直接法鉴定结果中鉴定到种水平为93.9%,鉴定到属水平为97.6%,MALDI-TOF MS没有提供可靠的鉴定结果占2.3%。次代培养后VITEK 2 XL鉴定结果符合率为100.0%。联合试验鉴定结果与常规药敏试验结果差异无统计学意义(P>0.05)。革兰阴性菌直接药敏最合适的尿液菌量计数在500~1100个/微升。革兰阳性菌直接药敏最合适的尿液菌量计数在500~1500个/微升。结论联合试验进行阳性尿培养标本的直接鉴定与直接药敏试验可快速、准确地得到鉴定及药敏结果。

尿流式细胞术联合MALDI-TOFMS技术鉴定尿标本病原菌的应用

目的探讨尿流式细胞术联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)直接鉴定尿标本病原菌的应用。方法收集2017年1-10月住院及门诊泌尿系统感染患者送检的清洁中段尿阳性标本234份。所有样本均通过尿流式细胞仪(UF-1000i)进行菌量计数;根据主要病原菌不同浓度的菌量,由MALDI-TOF MS判断分值来判定结果的可靠性。MALDI-TOF MS技术直接鉴定中段尿标本中大肠埃希菌(UF-1000i细菌计数>10~5个/ml)与Biotyper数据库中的大肠埃希菌最佳匹配图谱进行比较。MALDI-TOF MS技术鉴定血琼脂平板上与中段尿不同菌量计数的大肠埃希菌的光谱比较。结果 MALDI-TOF MS直接法鉴定大肠埃希菌为可靠鉴定的最低菌量浓度为6×10~4个/ml,铜绿假单胞菌最低菌量浓度为1×10~5个/ml,金黄色葡萄球菌最低菌量浓度为3×10~5个/ml,粪肠球菌最低菌量浓度为5×10~5个/ml。MALDI-TOF MS技术直接鉴定中段尿标本中大肠埃希菌(UF-1000i细菌计数>10~5个/ml),鉴定分值为2.245。利用MALDI-TOF MS直接鉴定与Vitek2-Compact全自动细菌鉴定进行对比,鉴定结果一致率为90.39%(207/229);中段尿培养为2种菌时,MALDI-TOF MS直接鉴定法鉴定结果为不可靠。MALDI-TOF MS直接法鉴定结果中鉴定到种水平207例占90.39%(207/229),鉴定到属水平216例94.32%(216/229),5.68%(13/229)MALDI-TOF MS未提供可靠的鉴定结果。结论尿流式细胞术与MALDITOF MS技术联合直接鉴定尿液中病原菌,是一种可靠细菌鉴定的新方法,其快速准确的鉴定,可为临床治疗提供病原学依据,具有一定的临床价值。

尿流式细胞学在诊断移植肾急性排斥反应中的应用价值

目的 探讨尿流式细胞学在诊断移植肾急性排斥反应中的临床应用价值。方法 对43例肾移植受者的 1 1 6份尿样本进行尿流式细胞学分析 ,并将急性排斥组和肾功能稳定组的分析结果进行比较。结果 急性排斥反应组尿淋巴细胞总数以及HLA DR+ 淋巴细胞数显著增多 ,与肾功能稳定组比较 ,P <0 .0 1 ;CD8+ 细胞亦增多 (P <0 .0 5) ;而CD3+ 、CD4+ 、CD1 9+ 细胞数变化两组差异不显著 (P >0 .0 5)。在诊断移植肾急性排斥反应上 ,HLA DR阳性样本和淋巴细胞数阳性样本的诊断敏感性和特异性分别达 95 .2 %、90 .5 %和 92 .6 %、87.4%。结论 尿流式细胞学分析可反映移植肾内的免疫状态 ,尿淋巴细胞数的显著增多和尿HLA DR+