尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激活物及其受体在支气管哮喘中的表达和意义

目的测定支气管哮喘（哮喘）患者血浆和诱导痰中尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激活物及其受体（u-PA、u-PAR）的水平，以探讨其在哮喘发病中的作用。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测29例哮喘急性发作者（发作组）、26例缓解者（缓解组）和15例正常健康者（对照组）血浆和诱导痰中u-PA、u-PAR的水平，并分别进行外周血和诱导痰细胞计数和分类，同期测量肺功能（第一秒用力呼气肺活量占预计值％，FEV．％pred），分析u-PA、u-PAR与嗜酸性粒细胞（EOS％）、FEV1％pred的相关性。结果发作组和缓解组血浆u-PAR水平[（650±154）ng／L，（677±189）ng／L]，较对照组[（478±165）ng／L]明显升高（P〈0．01）；三组血浆u-PA水平[（98±20）ng／L，（90±20）ng／L，（88±23）ng／L]比较差异无统计学意义（P〉0．05）。发作组和缓解组诱导痰u-PAR水平[（766±272）ng／L，（700±271）ng]较对照组（516±197）ng／L明显升高（P〈0．05）；三组诱导痰u-PA水平[（287±235）ng／L，（251±276）ng／L，（239±322）ng／L]比较差异无统计学意义（P〉0．05）。发作组与缓解组u—PA、11-PAR水平与FEV。％pred无明显相关关系（P〉0．05）。发作组与缓解组诱导痰u-PAR水平与诱导痰EOS正相关（r分别为0．796，0．770，P〈0．05）。结论u—PAR参与了哮喘气道慢性炎症的病理生理过程，其作用与嗜酸性粒细胞有关。

胆管癌细胞层粘连蛋白受体表达下调对蛋白水解酶尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激酶mRNA表达的影响

目的 研究层粘连蛋白受体 (LNR)反义寡核苷酸硫代修饰片段 (AS OD)对人胆管癌QBC939细胞尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激酶 (u PA)基因表达的调节。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)分析浓度 12 μmol/L的LNRAS OD在作用 4 8h后对QBC939细胞u PAmRNA表达水平的影响。结果 LNRAS OD能明显抑制人胆管癌细胞表达u PA ,与正常对照相比 ,其u PAmRNA水平下降了 30 0 % (P <0 0 5 )。结论 胆管癌细胞u PA基因表达水平与层粘连蛋白受体的表达水平明显相关 ,抑制层粘连蛋白受体的表达能够使胆管癌细胞u PA基因表达下降 。

结膜下注射组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂治疗眼内积血

对前房积血及玻璃体积血,临床上常规应用尿激酶、安妥碘及玻璃酸酶等进行治疗,但疗效均不理想。组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(t-PA)是一种有特异性的新型溶血栓药物,已有报导将之用于促进眼内积血的吸收。笔者等用国产的t-PA(上海医科大学提供)治疗眼内积血,采用1次或多次的结膜下注射,效果满意,现报告如下:

肺血栓栓塞症大鼠血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的动态变化及其意义

目的观察大鼠肺血栓栓塞症(PTE)后不同时间血浆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)的动态变化,并探讨两者与血栓自溶率的相关性。方法经颈外静脉注入加热125I-标记纤维蛋白原自体血栓,复制大鼠PTE模型,随机分组如下:1)正常对照组;2)PTE组:又分为PTE 4 h组(PTE 4 h)、PTE 24 h组(PTE 24 h)、PTE 3 d组(PTE 3d)、PTE 5 d组(PTE 5 d),即分别在造模成功后观察4 h2、4 h3、d、5 d后处死小鼠,留取血浆标本测定uPA、uPAR的水平;留取左肺观察肺组织病理改变;留取心脏、肺脏、全血以计算血栓自溶率。结果血浆uPA、uPAR水平在PTE后4 h略有上升(P>0.05),PTE后24 h明显增加(P<0.05),3 d时最高(P<0.01),5 d时开始下降,但仍明显高于正常对照组(uPAP<0.05,uPARP<0.01);PTE后4 h组、24 h组、3 d组血浆uPA质量浓度与血栓自溶率正相关(4 hr=0.758,P<0.05;24 hr=0.764,P<0.05;3 dr=0.778,P<0.05),血浆uPAR质量浓度与血栓自溶率正相关(4 hr=0.701,P<0.05;24 hr=0.764,P<0.05;3 dr=0.777,P<0.05)。肺组织病理改变:PTE后4 h有少量继发血栓形成,血栓及血管壁内可见白细胞浸润;PTE后3 d、5 d见注入的血凝块明显溶解,代之以新形成的血栓。结论PTE后血浆uPA、uPAR水平增加,促进内源性纤维蛋白溶解。

重组尿激酶型纤溶酶原激活物治疗大鼠实验性肺血栓栓塞症的探讨

目的观察在不同时间窗重组尿激酶型纤溶酶原激活物(ru-PA)的溶栓效果,并与重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)的溶栓效果比较。方法通过颈外静脉注入125I标记人纤维蛋白原的大鼠加热血凝块,建立不同时间大鼠的肺血栓栓塞症(PTE)模型。按随机原则将60只大鼠分成三组:①对照组:再分为PTE2h对照组和PTE3d对照组;②PTE2h溶栓组:再分为ru-PA2h组和rt-PA2h组;③PTE3d溶栓组:再分为ru-PA3d组和rt-PA3d组。PTE2h对照组及溶栓组于处理后2h处死大鼠,PTE3d对照组及溶栓组于处理后48h处死大鼠,留取血标本检测血浆纤维蛋白原(FIB)及α2-抗纤溶酶(α2-AP)水平。取血、肺脏及心脏,测量每分钟γ放射性(cpm)。结果(1)rt-PA2h组的溶栓率明显高于ru-PA2h组,ru-PA2h组又明显高于PTE2h对照组(P均=0.000);其血浆FIB、α2-AP水平明显低于ru-PA2h组(P=0.002,P=0.001)及PTE2h对照组(P=0.003,P=0.002),后两组比较差异无统计学意义(P=0.811及0.700)。(2)ru-PA3d组的溶栓率明显高于rt-PA3d组,rt-PA3d组又明显高于PTE3d对照组(P均=0.000);三组间血浆FIB及α2-AP水平比较,差异无统计学意义(P=0.655,P=0.751)。结论(1)ru-PA1mg/kg溶栓对全身纤溶系统无明显影响,而rt-PA1mg/kg溶栓早期影响全身纤溶系统;(2)体内血栓存在的时间影响ru-PA的溶栓效果,ru-PA对新鲜血栓栓塞的即刻溶栓作用不及rt-PA,但对较陈旧血栓栓塞的溶栓效果强于rt-PA。

尿激酶型纤溶酶原激活剂与静脉血栓栓塞

尿激酶型纤溶酶原激活剂对促进生理和病理状况下血栓溶解有重要作用。本文就其结构、功能、活性调节、信号通路和溶栓应用作一综述。

纤维蛋白溶解的细胞调节

在纤溶酶原系统的调节中,细胞表面的组织型纤溶酶原激酶（t-PA）与尿型纤溶酶原激酶（u-PA）受体所起的关键性作用已得到较详细证实。近年来研究显示,t-PA和纤溶酶原与纤维蛋白结合,并在其表面形成含纤溶酶的复合物,开始纤溶过程;此外,纤维蛋白表面还具有阻止已结合的纤溶酶被a2-抗纤溶酶灭活的作用。这均提示纤维蛋白表面在纤维蛋白溶解的调节中也起着一定作用。下面就细胞表面纤溶酶原系统和纤溶酶原与细胞表面的相互作用作一概述。一、细胞表面纤溶酶原系统在过去5～6年里的研究发现。

重组人尿激酶原联合依诺肝素治疗急性ST段抬高型心肌梗死的有效性和安全性研究

目的探讨重组人尿激酶原(pro-UK)联合依诺肝素治疗急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)的有效性和安全性。方法选取发病12 h内的STEMI患者118例作为研究组,给予pro-UK 20 mg静脉注射+30 mg静脉点滴,溶栓前30 min内静脉注射依诺肝素30 mg,15 min后皮下注射依诺肝素1 mg/kg,继以每12 h皮下注射1次至出院,最长8 d。以2012至2015年参加pro-UKⅣ期临床试验STEMI患者1851例作为对照组。观察2组间接再通率、直接再通率、出血发生率及住院期间主要心血管和死亡事件。结果研究组间接再通率85.6%,直接再通率67.6%;与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组轻微出血发生率6.78%,无严重出血发生;与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组梗死后心绞痛发生率1.69%,无再梗死、再闭塞发生;与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组病死率为4.24%,与对照组4.48%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论pro-UK联合依诺肝素治疗STEMI具有安全、简便的特点。

鼠肾纤维蛋白溶酶原激活酶的纯化和部分鉴定

采用肝素—Sepharose亲和层析和凝胶过滤自鼠肾提取纤维蛋白溶酶原激活酶,产率5.1×10^(-5)％。在还原和非还原状态下SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳及电泳酶谱分析均呈单一区带,证实产物仍保持单链状态。测得其分子量为70000。纤维平板试验和无纤维蛋白溶酶原纤维平板试验证实其活性依赖于纤维蛋白溶酶原。

人血清白蛋白修饰的尿激酶与天然尿激酶的家兔体内过程比较

家兔静注人血清白蛋白修饰的尿激酶(MUK)和天然尿激酶(NUK)40000IU后,MUK 的体内过程符合零级速率过程,NUK 则符合一级速率过程,血纤溶活性 MUK 持续100min,而 NUK 仅20~25min。在“功能性”去除肝肾的家兔,NUK 血浓度半衰期延长3~4倍,而 MUK 血浓度下降与正常家兔相似。MUK 及 NUK 在去除纤溶抑制物的优球蛋白成份中纤溶活性相似,但在血浆中 NUK 仅存24~35%的纤溶活性,MUK 则保留了64~85%的纤溶活性。提示肝肾的摄取、代谢和消除能力降低及对血浆纤溶抑制物抵抗力增强,是 MUK 血纤溶活性长时间维持高水平的主要原因。

小剂量尿激酶和大剂量巴曲酶在治疗椎基底动脉系统进展型卒中的疗效比较

应用尿激酶首次10万U加生理盐水250ml静滴,之后每日给予5万U加生理盐水250ml静滴,共5次,治疗椎基底动脉系统进展型卒中42例;应用巴曲酶10Bu加生理盐水250ml静滴,之后每日给予10Bu加生理盐水250ml静滴,共5次,治疗椎基底动脉系统进展型卒中36例;结果两者疗效显著,纤维蛋白原显著降低,血小板数量也有所下降,不良反应小。两种方法疗效差别不大,P>0.05。

脑室外引流联合尿激酶灌注或阿替普酶灌注治疗脑室出血的效果比较

目的比较脑室外引流（EvD）联合尿激酶（uK）或阿替普酶（nPA）灌注治疗脑室出血（IVH）的效果。方法选取2011年1月。2015年3月火箭军总医院收治的脑室出血患者51例，依据脑室内用药的不同将其分为对照组（26例）和观察组（25例）。两组患者入院24h内均给予EVD，术后复查头cT明确导管尖端位置无误，对照组注入rtPA．观察组注入UK。观察指标为两组血肿清除速度、短期结局以及长期神经功能，血肿清除速度通过5d改良的Graeb脑室内出血评分（mGS）实现．短期结局通过30d格拉斯哥预后评分（GOS）实现，长期神经功能恢复通过180d改良Rankin量表（mRS）实现，次要观察指标为并发症的发生情况、EVD留置时间、ICU入住时间以及药物花费。结果两组血肿清除速度比较差异无统计学意义（P〉0．05），两组5draGS评分比较差异无统计学意义（P〉0．05），两组短期结局及长期神经功能比较差异元统计学意义（P〉0．05），两组30dGOS评分及180dmRS评分比较差异无统计学意义（P〉0．05）。30d内对照组有1例（3．8％）死亡，观察组有2例（8．0％）死亡，两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。两组EVD留置时间以及ICU入住时间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。对照组溶栓药物花费明显多于观察组，差异有统计学意义（P〈0．05）。30d内并发症发生情况：对照组发生颅内感染2例、癫痫1例，观察组发生颅内感染2例、再出血1例、交通性脑积水1例，两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论EVD联合脑室内纤维蛋白溶解治疗IVH可以快速清除脑室积血（尤其是第三、四脑室），rtPA和UK均可以作为脑室注射药物的选择，使用UK费用明显少于rtPA。

尿激酶原活性测定方法研究

以双链尿激酶国际标准品 (IS)为对照 ,用显色底物法和凝块溶解法测定糖基化和非糖基化的尿激酶原的酶活性 ,结果表明与凝块法相比 ,显色底物法测定两种形式的尿激酶原的酶活力相近 ,测量误差小 ,重复性好 。

溶栓新药尿激酶原治疗急性心肌梗死的研究进展和探讨

尿激酶原（Pro-UK）是新一代特异性溶栓药,它是尿激酶（UK）的前体,由411个氨基酸组成,它本身的催化活性很低,只有当它被运送至血栓局部,经纤维蛋白溶解酶等酶的激活,使它的肽链在Lys158-Ile159位点之间被打开形成尿激酶后,才能发挥其溶栓作用。同时，当局部出现纤维蛋白的E片段时，可使它原先的催化活性增大500倍，

重组尿激酶原对人肺动脉内皮细胞u-PA系统的影响

目的 探讨重组尿激酶原对体外培养的正常人肺动脉内皮细胞(HPAECs)尿激酶型纤溶酶原激活物系统表达的影响.方法 将重组尿激酶原0或150 IU/mL与人肺动脉内皮细胞共同孵育8 h,收集培养上清并应用ELISA方法检测其中尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的含量;将重组尿激酶原(0～150 IU/mL)分别与HPAECs共同孵育(0～24 h),提取细胞总RNA并应用RT-PCR技术检测尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)mRNA表达的变化.结果 细胞培养上清ELISA实验表明,与对照组相比,重组尿激酶原150 IU/mL组细胞培养液中u-PAR的含量显著增加[(0.51±0.04)μg/L vs (0.58±0.05) μg/L,P=0.005];PAI-1的含量显著下降[(66.75±7.92) μg/L vs (53.38±12.18) μg/L,P=0.009].RT-PCR结果表明,HPAECs与重组尿激酶原150 IU/mL共同培养后0 h、4 h、8 h、12 h和24 h 5个时间点u-PA条带与GAPDH条带平均光密度之比分别为(0.34±0.11)、(0.51±0.12)、(0.58±0.12)、(0.50±0.18)和(0.35±0.10).其中8 h组与对照组相比差异有统计学意义,8 h组与24 h相比P=0.053.结论 重组尿激酶原能够明显促进HPAECs释放u-PAR并显著抑制PAI-1的表达和释放.重组尿激酶原能够呈时间依赖性提高u-PA mRNA在HPAECs的表达.重组尿激酶原直接影响人肺动脉内皮细胞u-PA系统的表达,该作用可能是增强药物本身溶栓疗效的一种重要途径.

球结膜下注射尿激酶治疗挫伤性前房出血(摘要)

外伤性前房出血是眼部外伤特别是挫伤时常见的一种并发症,以往对全身给药效果较差的病例均采用手术治疗,近年来我们试用尿激酶结膜下注射20 00~u,每日1次。