细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和尿激酶型纤溶酶原激活物在载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块中的表达

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)与尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块中的表达,并探讨两者的相互关系。方法研究对象采用ApoE-/-小鼠,共喂养18周,分别于6周、10周、14周和18周4个时间点处死小鼠行HE染色切片观察动脉粥样硬化斑块形态;并采用RT-PCR及Western blot检测主动脉粥样硬化斑块内EMMPRIN和uPA的表达。结果成功建立动脉粥样硬化模型;在主动脉粥样硬化斑块中检测到EMMPRIN和uPA表达均增高,与普通饮食组比较有统计学意义(P<0.05)。EMMPRIN和uPA表达随喂养时间延长而增高。结论 EMMPRIN和uPA在ApoE-/-小鼠主动脉粥样硬化斑块中随着斑块病变程度的严重性增加表达增高,两者可能共同参与粥样硬化斑块的发生发展过程。

新疆维吾尔族、汉族载脂蛋白E基因及尿激酶型纤溶酶原激活因子基因多态性与Alzhemier病的关系

目的探讨新疆维吾尔族(维族)、汉族载脂蛋白E(ApoE)基因及尿激酶型纤溶酶原激活因子(PLAU)基因多态性与Alzheimer's病(AD)的关系。方法应用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法,检测209例很可能AD患者(AD组,汉族98例,维族111例)及220名正常对照者(NC组,汉族103人,维族117人)的ApoE基因及PLAU基因第6号外显子r2227564s基因型及等位基因频率。结果 AD组中,维族、汉族ApoEε3/4基因型及ε4等位基因频率明显高于NC组;其与PLAU基因C/T基因型组合的频率明显高于NC组(均P<0.05);具有ApoEε3/3基因型的维族T/T基因型频率明显高于NC组(P<0.05)。结论 ApoE基因多态性可能与AD相关;PLAU C/T基因型可能增加具有ApoEε3/4基因型及ε4等位基因者AD的发病风险;PLAU T/T基因型可能增加具有ApoEε3/3基因型、ε3等位基因的维族AD的发病风险。

健脾活血方含药血清对肝癌细胞肝细胞生长因子/c-Met通路、尿激酶型纤溶酶原激活因子分泌及缺氧状态下细胞活性及增殖的影响

目的探讨健脾活血方含药血清对肝癌细胞肝细胞生长因子(HGF)/c-Met通路、尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)分泌及缺氧状态下细胞活性及增殖的影响。方法将20只大鼠随机均分为实验组及对照组,分别给予健脾活血方及生理盐水连续灌胃7d后,取血制备含药血清。取对数生长期肝癌细胞株SMMC-7721分为对照组、实验组,加入相应含药血清,并加入氯化钴模拟缺氧状态,培养72h后检测各组细胞的活力与增殖能力、侵袭能力。另取SMMC-7721细胞分为对照组、实验组分别加入相应含药血清培养72h后,检测细胞培养液上清uPA浓度、HGF及其细胞中mRNA表达水平、c-Met蛋白及mRNA表达水平。结果实验组SMMC-7721细胞的A值、细胞增殖率、迁移到下室的细胞数量均低于或少于对照组(均P<0.05)。实验组细胞培养液上清uPA浓度、HGF以及细胞中HGFmRNA表达水平、c-Met蛋白及其mRNA表达水平均低于对照组(均P<0.05)。结论健脾活血方含药血清可抑制缺氧状态下肝癌细胞的活力及增殖能力,其或通过抑制HGF/c-Met通路及uPA的分泌,阻止肝癌的复发和转移。

尿激酶型纤溶酶原激活因子基因P141L多态性与迟发性阿尔茨海默病的关系

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子基因(PLAU)P141L多态性与中国汉族人群迟发性阿尔茨海默病(Late-onset Alzheimer’sdisease,LOAD)的关系。方法采用DSM-Ⅳ诊断标准和NINCDS-ADRDA诊断标准中"很可能AD"的标准,选择67例LOAD患者,与71例年龄、性别与AD组匹配的健康对照者进行病例对照研究;采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测PLAU基因P141L多态性并进行关联分析。结果LOAD组与对照组基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg定律;两组基因型分布差异无统计学意义(χ2=0.3278,P=0.8488);两组等位基因分布差异无统计学意义(χ2=0.2238,P=0.6361)。结论PLAU基因P141L多态性与中国汉族人群LOAD未发现存在关联。

结膜下注射组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂治疗眼内积血

对前房积血及玻璃体积血,临床上常规应用尿激酶、安妥碘及玻璃酸酶等进行治疗,但疗效均不理想。组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(t-PA)是一种有特异性的新型溶血栓药物,已有报导将之用于促进眼内积血的吸收。笔者等用国产的t-PA(上海医科大学提供)治疗眼内积血,采用1次或多次的结膜下注射,效果满意,现报告如下:

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与尿激酶型纤溶酶原激活物在载脂蛋白E敲除大鼠动脉粥样硬化斑块表达的意义及相关性

目的:探究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)与尿激酶型纤溶酶原激活物(μPA)在载脂蛋白E基因(ApoE)敲除大鼠动脉粥样硬化斑块表达意义及相关性。方法:选择ApoE敲除大鼠,将其分为对照组与高脂饮食组,对照组大鼠实施正常饮食喂养,高脂饮食组实施高脂饮食喂养,并分别于喂养的第6、10、14、18周处死部分大鼠,采用H-E染色观测动脉粥样硬化斑块形态,免疫印迹及RT-PCR检测主动脉粥样硬化斑块内EMMPRIN和μPA的表达及其mRNA表达,并实施组间比较。结果:高脂饮食组大鼠动脉出现明显动脉粥样硬化斑块,且随着时间的推进,逐渐加重,而对照组大鼠并未出现明显的动脉粥样硬化斑块;喂养第6、10、14、18周时高脂饮食组大鼠主动脉内EMMPRIN和μPA的表达及其mRNA表达均明显高于对照组;EMMPRIN与μPA表达呈正相关。结论:EMMPRIN与μPA在动脉粥样斑块中的表达水平呈正相关关系,两者可能参与动脉粥样硬化斑块的形成并发挥促进作用。

胰腺癌组织中血管内皮生长因子和尿激酶型血纤维蛋白溶菌酶原活化剂基因表达与血管生成的关系及临床意义

目的探讨胰腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和尿激酶型血纤维蛋白溶菌酶原活化剂(uPA)表达与血管生成的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测30例胰腺癌组织及6例正常胰腺组织中VEGF和uPA表达情况,分析其与肿瘤组织微血管密度(MVD)的关系。结果胰腺癌组织中VEGF和uPA的阳性表达率分别为53.3%和63.3%。胰腺癌中的MVD明显高于正常组织(P=0.017)。VEGF和uPA表达与MVD有关(P<0.05)。MVD在Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ期胰腺癌组间表达差异有统计学意义(F=4.297,P=0.047),VEGF表达与肿瘤有无淋巴结转移有关(2=4.852,P=0.028)。VEGF在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期胰腺癌肿瘤组织中表达差异有统计学意义(2=6.914,P=0.032)。uPA在肿瘤大小中的表达差异有统计学意义(2=410.435,P=0.001)。MVD与生存期之间存在负相关(r=0.472,P=0.017)。组织分化程度是影响胰腺癌生存期的危险因素。结论血管生成在胰腺癌的发生、发展过程中起重要作用,VEGF和uPA在胰腺癌组织中过度表达可为肿瘤细胞的浸润创造条件。抗血管生成治疗可能有助于提高胰腺癌的治疗效果。

接触性溶栓治疗犬急性中央型下肢深静脉血栓

目的探讨尿激酶给药方式和溶栓导管位置对急性中央型下肢深静脉血栓溶栓效果的影响。方法将30只实验犬的30条静脉随机分为五个实验组,每组6条,每组尿激酶给药方式和溶栓导管位置不完全相同。通过造影观察溶栓效果,记录每组再通时间、尿激酶用量、并发症情况、APTT值等。结果在尿激酶给药方式不同的前提下比较,A、B、C三组中,B组再通时间最短,C组再通时间居中,A组再通时间最长(P<0.01)。在导管位置不同的前提下比较,B组再通时间明显短于D组。结论大剂量尿激酶冲击后,续以小剂量尿激酶持续溶栓,并将溶栓导管首端置于血栓远心端,治疗的方案效果更好、更安全。

全身炎症反应综合征中血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的表达

目的探讨upA，uPAR与D-D，IL-6及TNF-α之间的关系及其在SIRS中的作用。方法采用前瞻性、临床病例对照研究，病例的收集均来源于武汉市中心医院2008年1月至2010年1月年龄〉55岁的就诊患者，标本的采集均为清晨空腹静脉血清，检测全身炎症反应综合征（SIRS）患者血中尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）、D-二聚体（D-D）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF-d）含量。按SIRS诊断标准分为SIRS组：50例来源于重症医学科；非SIRS组35例来源于内科病房；另选30例体检科体检者作为健康对照组，均需排除：（1）孕产妇；（2）恶性肿瘤；（3）转入ICU后7d内死亡；（4）心肺复苏术后；（5）既往有血液系统疾病；（6）人住ICU时即有SIRS的患者。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定血中uPA，uPAR，D-D，IL-6及TNF-α含量。数据均采用SPSS17．0统计学软件进行分析：正态分布的计量资料以均数±标准差（x±s）表示，独立样本t检验进行分析；非正态分布的计量资料以中位数表示，Mann-Whitney秩和检验；相关性分析采用Spearman秩相关检验；以24h血uPA、uPAR、IL-6和TNF-α作受试者工作特征曲线（ROC曲线），比较SIRS患者血uPA，uPAR，IL-6和TNF-α含量诊断MODS的应用价值。结果SIRS组患者血uPA，uPAR，D-D，IL-6及TNF-α含量较非SIRS组和健康对照组均显著升高（均P〈0．01）。uPA与IL-6、TNF-仪不相关，uPAR与IL-6，TNF-α呈正相关（分别为r=0．395，P：0．004；，=0．606，P〈0．01）。以uPA，uPAR，IL-6及TNF-α诊断MODS做ROC曲线，ROC曲线下面积（AUROC）分别为0．59，0．76，0．86，0．83。结论uPA和uPAR参与了SIRS患者凝血功能障碍的过程，但在SIRS中起作用的途径机制并不完全相同。uPAR在SIRS向MODS的发展过程中起着一定作用。

血清FLP1、sTRAIL、suPAR与慢性乙型肝炎病情严重程度的相关性分析及其临床意义

目的分析血清纤维蛋白原样蛋白1(FLP1)、可溶性肿瘤细胞坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)与慢性乙型肝炎(CHB)患者病情严重程度的临床相关性及其临床意义。方法选取2021年4月至2023年4月医院收治的92例CHB患者为观察组,另选取92例健康体检者为对照组。观察组均行肝脏穿刺活检术,进行组织病理学检查,根据炎症程度不同将CHB患者分为G1、G2、G3及G4共4个亚组,根据肝纤维化程度将CHB患者分为S1、S2、S3及S4共4个亚组,比较两组及不同炎症、肝纤维化程度CHB患者血清FLP1、sTRAIL及suPAR水平,分析血清FLP1、sTRAIL、suPAR水平与炎症、肝纤维化程度的相关性,以及血清FLP1、sTRAIL、suPAR单独及联合检测对CHB的诊断效能。结果观察组血清FLP1水平低于对照组,suPAR、sTRAIL水平高于对照组(P<0.05);观察组不同炎症程度患者血清sTRAIL、suPAR水平比较,G1<G2<G3<G4(P<0.05),血清FLP1水平比较,G1>G2>G3>G4(P<0.05);观察组不同肝纤维化患者血清sTRAIL、suPAR水平比较,S1<S2<S3<S4(P<0.05),血清FLP1水平比较,S1>S2>S3>S4(P<0.05);相关性分析显示,血清FLP1与炎症、肝纤维化程度呈负相关,血清sTRAIL、suPAR与炎症、肝纤维化程度呈正相关(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,血清FLP1、sTRAIL、suPAR单独诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.718、0.695、0.731,联合诊断的AUC为0.857,显著高于各指标单独诊断(P<0.05)。结论FLP1、sTRAIL、suPAR与不同炎症、肝纤维化程度密切相关,并可能参与CHB发病过程,联合检测诊断CHB具有较高的诊断效能,对指导临床诊断CHB、评估病情具有积极意义。

组织型纤溶酶原激活因子基因定位转移对兔左房血纤溶活性的影响

机械瓣膜置换术后患者需终生口服抗凝药物，而抗凝相关栓塞和出血并发症占远期并发症的首位，严重地影响了患者的生存和生活质量。我们应用明胶涂层的Dacron涤纶片携带组织型纤溶酶原激活因子（tPA）基因对兔左心房进行局部基因转移，观察其对左房血纤溶活性的影响。

在治疗NIDDM中确定血纤维蛋白溶酶原活化抑制因子1活性及与其基因多态性的关系

据美国《Diabetes》1995年44卷第1期报道非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者体内血纤维蛋白溶酶原活化抑制因子1(PAI-1)活性升高,这可能与其患心血管病的危险性增加有关。英国Panahloo等对146例NIDDM病人进行了检查。

血瘀证与内皮细胞、血清细胞因子关系研究进展与思考

血瘀证是临床最常见的证候类型,多类疾病均可见到血瘀证表现,血瘀证证候实质研究也日益受到重视.本文拟分别探讨血瘀证与循环内皮细胞、降钙素基因相关肽、组织型纤溶酶原激活物及组织型纤溶酶原激活物抑制因子等的关系,内皮素与血瘀证的关系已有另文分析,本文不再赘述.

血糖与脂肪细胞因子的关系研究

目的:探讨脂肪细胞因子中抵抗素(Resistin)、1型血纤维蛋白溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)、瘦素(Leptin)、游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)与血糖的关系。方法:检测26名正常人(NGT)、30例糖调节受损(IGR)者、30例2型糖尿病(T2DM)患者共86例空腹血清Resistin、PAI-1、Leptin、FFA、TNF-α、空腹胰岛素(FINS)浓度。结果:Resistin在T2DM组高于NGT组(P<0.01)及IGR组(P<0.05)。PAI-1在T2DM组高于NGT组和IGR组(P均<0.01),IGR组亦高于NGT组(P<0.05)。Leptin在T2DM组和IGR组均高于NGT组(P均<0.01)。多元线性回归显示,影响空腹血糖(FBG)和餐后血糖(PBG)的因素分别为PAI-1、PAI-1和Resistin。结论:PAI-1、Resistin是影响血糖的重要因素,其中PAI-1对FBG和PBG均存在影响,Resistin可能主要对PBG有影响。

血浆凝血因子Ⅶ和uPA系统对恶性肿瘤影响的临床研究

目的 研究血浆凝血因子 和尿激酶型纤溶酶原激活物 ( u PA)及其特异性受体 ( u PAR)纤溶酶原激活物抑制物 - 1 ( PAI- 1 )在恶性肿瘤中的表达水平和临床意义。方法 F a采用重组可溶性组织因子( r STF)一期法 ,F ∶ C采用经典一期法 ,F ∶ Ag,u PA和 PAI- 1采用 ELISA法测定。结果 1肿瘤组较对照组 F a,F Ag,F a/F Ag,u PA,u PAR和 PAI- 1升高 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。 2组间比较 :合并感染 F ∶ Ag升高 ( P<0 .0 5 ) ;已转移 F a,F Ag,u PA,u PAR和 PAI- 1升高 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ;手术后F a,F ∶ Ag,u PA和 PAI- 1降低 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ;二周内死亡者全部指标升高 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。结论 恶性肿瘤患者凝血和纤溶过度激活 。

缺血性心、脑血管疾病的血栓前状态分子标志物的检测及意义

目的探讨缺血性心、脑血管疾病血浆中12项血栓前状态分子标志物的检测结果在早期诊断血栓前状态中的价值。方法采用ELISA法测定60例患者及20例正常人血浆中血管性血友病因子(vWF)、P-选择素(GMP-140)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)、D-D二聚体(D-dimer)、血栓前体蛋白(TpP)、同型半胱氨酸(t-Hcy)含量,全自动血凝仪检测血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和血浆纤维蛋白原(Fg),分析各项指标在诊断血栓前状态时的特异性及敏感性,并进行比较。结果(1)60例患者血浆中vWF、GMP-140、t-PA、PAI、TAT、TpP、t-Hcy均显著高于正常对照(P<0.05);TpP、t-Hcy异常升高患者通过跟踪随访更易发展成为心肌梗死(AMI)、脑梗死。(2)TpP、t-Hcy与其他指标相比具有很高的敏感性与特异性。(3)PT、APTT在心、脑血栓形成前后无显著变化(P>0.05)。结论vWF、t-PA、PAI、GMP-140、TAT、PAP、D-dimer、Fg、TpP、tHcy均可以作为早期诊断心、脑血管血栓形成前状态的分子标志物,而TpP、tHcy灵敏度,特异性均高于其他项,在早期判断血栓前状态时具有较高临床价值。

转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变

目的 通过对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MsC)转染Smad7基因,观察转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达的改变,以进一步阐明Smad7阻断组织纤维化过程的作用机制。方法 经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及RT-PCR、Western blot法鉴定;又分别采用RT-PCR与Western blot法,检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变。结果 成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆(S-22、S-26),并证实其uPA mRNA及蛋白表达明显增加,而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著下降。结论 Smad7可能通过增强组织内uPA酶的生成和减少PAI-1的合成而减轻组织纤维化进展。

新疆维吾尔族、汉族阿尔茨海默病PLAU基因的多态性分析

目的探讨新疆维、汉两民族尿激酶型纤溶酶原激活因子(plasminogen activator urokinase,PLAU)基因6号外显子rs2227564位点C/T多态性同阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的关联。方法在流行病学调查的基础上,采用美国神经病学会、语言障碍和卒中-老年性痴呆和相关疾病学会制定的标准,选取诊断很可能是AD的患者209例(汉族98例,维吾尔族111例)及正常对照220名(汉族103名,维吾尔族117名),应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析的方法,检测两组PLAU基因6号外显子rs2227564位点C/T多态性。结果 AD组和对照组、维吾尔族、汉族PLAU基因6号外显子rs2227564位点C/T基因型和等位基因频率的分布没有统计学差异(P>0.05)。AD组和对照组维、汉两民族间PLAU基因6号外显子rs2227564位点C/T基因型和等位基因频率的分布没有统计学差异(P>0.05)。不同性别中PLAU基因6号外显子rs2227564位点C/T的基因型和等位基因频率的分布没有统计学差异(P>0.05)。结论未发现新疆维、汉两民族PLAU基因6号外显子rs2227564位点C/T多态性与AD存在相关性。

肝硬化患者的止血平衡改变

肝脏在机体的凝血机制中扮演重要角色。大部分促凝和抗凝因子由肝脏合成,同时肝脏还参与许多止血和纤溶组分的清除过程。在肝硬化背景下,人体的止血功能发生重大变化,原发性止血、凝血和纤溶功能都受影响。由于患者凝血时间延长,过去一直认为肝硬化患者处于“出血前状态”。事实上,肝硬化的凝血机制复杂,患者往往同时存在促凝、抗凝过程交替。初级止血的多种因素导致肝硬化患者血小板减少、血管性血友病因子增加。凝血过程中,凝血因子活性降低,天然抗凝剂减少,循环微粒增加。在纤溶方面,组织型和尿激酶型纤溶酶原激活剂增加,纤溶酶原激活物抑制物-1、凝血酶激活纤溶抑制物和α2-抗纤溶酶水平降低。这些变化导致的最终结果难以预测。总体而言,止血是促凝因子和抗血栓因子之间制约平衡结果,涉及一期止血(血管性血友病因子和血小板功能)、凝血(纤维蛋白凝块形成)和纤溶。