重组组织型纤维蛋白溶酶原激活剂静脉溶栓后不同时间加用替罗非班对急性缺血性脑卒中患者神经血管功能的影响

目的探讨重组组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓后不同时间加用替罗非班对急性缺血性脑卒中(AIS)患者神经血管功能的影响。方法选择2020年3月至2023年3月北京老年医院神经内科收治的120例AIS患者为研究对象,患者均经rt-PA静脉溶栓治疗。根据静脉溶栓治疗后加用替罗非班的时间将患者分为早期组(溶栓后6 h内,n=52)、中期组(溶栓后6~12 h,n=38)和晚期组(溶栓后12~24 h,n=30)。比较治疗前、治疗后3组患者神经功能[美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分、改良Rankin量表(mRS)评分]、血管功能[血管性假血友病因子(vWF)、血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)、血栓调节蛋白(TM)]、炎症因子[高敏C反应蛋白(hs-CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)、白细胞介素-1β(IL-1β)]水平,记录治疗期间不良事件发生率。结果治疗前,3组患者NIHSS、mRS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);3组患者治疗后NIHSS、mRS评分显著低于治疗前(P<0.05);治疗后,早期组患者NIHSS、mRS评分显著低于中期组、晚期组,中期组患者NIHSS、mRS评分显著低于晚期组(P<0.05)。治疗前,3组患者vWF、VE-cadherin、TM水平比较差异无统计学意义(P>0.05);3组患者治疗后vWF、VE-cadherin、TM水平显著低于治疗前(P<0.05);治疗后,早期组患者vWF、VE-cadherin、TM水平显著低于中期组、晚期组(P<0.05);治疗后,晚期组患者vWF水平显著高于中期组(P<0.05),中期组与晚期组患者VE-cadherin、TM水平差比较异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,3组患者hs-CRP、Hcy、IL-1β水平比较差异无统计学意义(P>0.05),3组患者治疗后hs-CRP、Hcy、IL-1β水平显著低于治疗前(P<0.05);治疗后,早期组患者hs-CRP、Hcy、IL-1β水平显著低于中期组和晚期组,中期组患者hs-CRP、Hcy、IL-1β水平显著低于晚期组(P<0.05)。治疗期间,3组患者症状性脑出血发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);早期组患者再闭塞、心肺并发症发生率显著低于中期组、晚期组(P<0.05);中期组与晚期组患者再闭塞、心肺并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论rt-PA静脉溶栓后不同时间加用替罗非班后均可促进AIS患者神经功能、血管功能恢复,同时可抑制炎症反应,其中早期加用替罗非班效果最佳。

纤维蛋白对尿激酶原激活纤溶酶原反应动力学的影响

反应体系中存在的纤维蛋白 (fibrin)对尿激酶 (UK)、scu PA以及组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)激活纤溶酶原 (plasminogen)的反应有不同的作用 :UK、t PA激活 plasminogen的反应可被反应体系中存在的fibrin所加强 ;fibrin对scu PA激活 plasminogen反应的动力学常数无明显影响 ;但对小分子质量scu PA与单链抗体的嵌合分子激活 plasminogen的反应起明显的抑制作用 .为确定反应体系中存在的fibrin对scu PA的K区插入突变体 InB激活plasminogen反应的影响 ,测定了在反应体系中存在fibrin的情况下的InB激活 plasminogen反应的Kfibrinm 以及kfibrincat .Kfibrinm =4 2 μmol·L-1,远远大于无fibrin时的Km=0 379μmol·L-1,说明有fibrin存在时突变体InB与天然底物 plasminogen的亲和性降低了 .kfibrincat =0 10 7s-1,也远远大于无fibrin时kcat=0 0 16 5s-1,说明有fibrin存在时突变体InB对plasminogen的反应活性增强了 .原因可能是 :与fibrin结合的 plasminogen的构象发生了有利于被纤溶酶原激活剂水解的变化 .

对氨基苯甲酰纤维蛋白溶酶原-链激酶激活剂复合物的新制法

合成了化学修饰剂 (对氨基苯甲酸对脒基苯酯盐酸盐 ) ,并通过透析法得到了 L ys-纤维蛋白溶酶原。提出了利用 L- L ysine Sepharose4 B柱以人纤维蛋白溶酶原、链激酶及化学修饰剂制备对氨基苯甲酰纤维蛋白溶酶原 -链激酶激活剂复合物 (APSAC)的新方法 ,本法的优点是 APSAC的收率及纯度均较高。

利用可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体及纤维蛋白原表达水平评估慢性阻塞性肺疾病病情程度的临床意义

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)及纤维蛋白原(Fg)表达水平及其评估病情程度的临床意义。方法我院就诊的147例COPD患者,根据症状体征和辅助检查结果分为稳定期COPD组(sCOPD)109例和急性加重期COPD组(AECOPD)38例,选取同期体检健康人群104例为对照组,三组均于入组第1 d完成肺功能、影像学及实验室检查,分析血清suPAR和Fg表达水平与功能指标的相关性及其对COPD病情严重程度的鉴别诊断价值。结果AECOPD组和sCOPD组第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均较对照组降低,且AECOPD组各项指标低于sCOPD组(P<0.05);血清suPAR、Fg水平均较对照组升高,且AECOPD组血清suPAR和Fg水平高于sCOPD组(P<0.05);COPD患者血清suPAR和Fg水平与FEV_(1)%和FEV_(1)/FVC均呈负相关(P<0.05);血清suPAR、Fg及两者联合诊断COPD病情严重程度的AUC分别为0.862、0.810和0.930,敏感度分别为84.21%、73.68%和94.74%,特异度分别为76.15%、81.65%和76.15%。结论COPD患者血清suPAR和Fg水平明显升高,且与肺功能存在相关性,两者联合用于AECOPD和sCOPD鉴别诊断具有良好参考价值。

脂多糖诱导的急性肺损伤中尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体表达的转录后调节

尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体（UPAR）在感染后中性粒细胞的募集中是必需的。在肺上皮细胞中，UPA能通过与其细胞表面受体UPAR的相互作用诱导其自身表达。然而，在感染性急性肺损伤（ALI）中，调节UPAR的表达对UPA介导的信号通路是如何调控的目前还不清楚。美国Bhandary YP等学者对此进行了深入研究。

尿激酶与重组组织型纤溶酶原激活剂联合用于静脉溶栓治疗急性脑梗塞对患者死亡蛋白激酶1、血管内皮功能影响

目的分析尿激酶与重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)联合用于静脉溶栓治疗急性脑梗塞对患者血清死亡蛋白激酶1(DAPK1)、血管内皮功能影响。方法选取2016年4月至2018年1月我院收治的急性脑梗塞患者98例,采用随机数字法分为对照组和观察组。对照组患者采用常规对症治疗+rt-PA溶栓,观察组患者常规对症治疗+尿激酶联合rt-PA溶栓,分析两组患者治疗后的临床效果。结果治疗前,两组患者凝血纤溶变化(TEG)指标、血管内皮功能指标、氧化应激指标、DAPK1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组患者一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平高于对照组,内皮素(ET)、8-羟化脱氧鸟苷(8-oHdG)、DAPK1水平低于对照组,但TEG指标与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组患者美国国立卫生院神经功能缺损量表(NIHSS)评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组患者NIHSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者脑出血发生率高于对照组,但再发脑梗死和死亡发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论尿激酶联合rt-PA静脉溶栓治疗急性脑梗塞可减轻患者血管内皮损伤,改善氧化应激指标,降低DAPK1水平,减少脑出血的发生。

不同治则中药复方对胆汁淤积性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活剂的影响

目的观察补益肝肾、活血化瘀方二至丸、失笑散及其合方对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)的影响。方法采用胆管结扎复制胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型。造模大鼠于术后1周随机分为模型组、优思弗组、二至丸组、失笑散组及合方组;各药物干预组分别给予相应药物灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,至4周末处死全部动物取材。观察各组大鼠一般情况、肝功能(ALT、AST、ALP、TBil)、肝组织病理、uPA蛋白表达(Westernblot法)。结果与假手术组比较,模型组大鼠ALT、AST、ALP、TBil、纤维化程度均显著升高。与模型组比较,3个复方均能降低大鼠血清ALP、ALT、AST水平(P<0.01),失笑散及合方能降低TBil(P<0.01),合方改善ALP、ALT优于两个单方。3个复方均能不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度(P<0.01),合方优于两个单方。优思弗能降低ALT、AST水平,但对肝脏纤维化无明显改善作用。与模型组比较,3个复方组uPA蛋白表达显著增加(P<0.01),其中合方组最高,失笑散组次之,再次为二至丸组,三者之间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论二至丸、失笑散及其合方均可不同程度地干预胆汁淤积性肝纤维化形成,其机制可能与调控uPA蛋白表达有关。

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳纤维蛋白自显影法检测不同分子量的纤溶酶原激活剂

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）纤维蛋白显影方法是经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ将不同分子量的纤溶酶原激活剂（ＰＡ）分开，然后再转溶纤维蛋白板使之产生溶带而检测ＰＡ物质活性及分子大小的方法。此法与Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法比具有检测更简便、灵敏、快速的特点，且是活性检测，但其分子量分析精度不如Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法。本研究用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影方法对本室表达的重组组织型－ｐＡ（ｒｔ－ＰＡ）及突变体Ｎｌｌ７Ｑ／Ｎｌ８４Ｑ／△（Ｋ２９６——Ｇ３０２）及标准尿激酶（ＵＫ）和ｒｔ－ＰＡ进行了分析鉴定。

重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂联合人尿激肽原酶治疗急性缺血性脑卒中的疗效观察

目的观察重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓联合人尿激肽原酶治疗急性缺血性脑卒中临床有效性和安全性。方法发病在4.5 h内接受rt-PA静脉溶栓治疗的急性脑梗死患者426例,随机分为重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂静脉溶栓联合人尿激肽原酶治疗组(A组,207例)和仅接受重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂静脉溶栓治疗对照组(B组,219例)。采用美国国立卫生研究院率中量表(NIHSS评分量表)在患者最初就诊时及治疗后对患者神经功能缺损情况进行评估。应用改良Rankin评分量表(mRS)评价患者出院3个月时远期预后情况。溶栓后24 h、7 d行多模式核磁检查(包括颅脑MRI、MRA、MR灌注,不能行颅脑MR检查患者行颅脑CT、CTA、CT灌注检查)并分析临床并发症的发生率。记录2组患者治疗前后血清中血管内皮生长因子(VEGF)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)含量水平。结果治疗后2组NHISS评分较治疗前下降,但是A组结果显著优于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。3个月随访时,A组神经功能预后良好129例(62.5%),B组患者为126例(57.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。A组患者治疗后7 d发生颅内出血的有1例,B组有3例,均为非症状性颅内出血,2组差异无统计学意义(P=0.087)。A组患者接受治疗后VEGF水平显著升高,hs-CR水平降低,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂静脉溶栓联合人尿激肽原酶治疗可以显著改善患者预后,且不会增加不良事件发生率。提示重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂静脉溶栓联合人尿激肽原酶治疗急性缺血性脑卒中安全有效。

尿激酶型纤溶酶原激活剂在大鼠胆汁淤积性肝纤维化形成过程中的动态变化及其意义

目的:研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)在胆汁淤积性肝纤维化形成过程中的变化及其作用。方法:应用胆管结扎法复制胆汁淤积性肝纤维化动物模型,分为假手术组,模型1周组、2周组、3周组、4周组,观察模型大鼠肝组织病理、纤维化程度、Western印迹法检测肝组织中uPA蛋白含量的动态变化。结果:随胆管阻塞时间延长,胆管阻塞性大鼠肝纤维化程度逐渐增加,uPA蛋白含量逐渐显著升高(1周121.39±8.35,2周199.83±13.45,3周361.56±21.28,4周198.49±8.04 vs 32.38±5.35,P<0.01),3周时达到峰值,随后显著下降。结论:uPA在胆汁淤积性肝纤维化形成过程中存在动态变化和差异表达,与胆汁淤积性肝纤维化形成有关。

重组组织型纤溶酶原激活剂与尿激酶静脉溶栓治疗急性脑梗死的临床效果比较

目的比较重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)与尿激酶(UK)静脉溶栓治疗急性脑梗死患者的临床效果。方法选择2019年1月—2021年1月北京市昌平区医院收治的急性脑梗死患者140例,采用随机数字表法分为试验组与对照组,每组70例。试验组患者予以rt-PA治疗,对照组患者予以UK治疗。比较2组患者神经功能评分、神经损伤转归指标、血管内皮指标、氧化应激指标及并发症。结果治疗24 h、7 d、14 d时,试验组美国国立卫生院神经功能缺损量表(NIHSS)评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗后,2组患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)及髓鞘碱性蛋白(MBP)水平均低于治疗前,且试验组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);2组患者血管内皮素(ET)、晚期蛋白氧化产物(AOPPs)水平低于治疗前,一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T-AOC)水平高于治疗前,且试验组变化幅度均大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。试验组患者并发症总发生率为8.57%,与对照组患者的14.29%相比差异无统计学意义(χ^(2)=1.129,P=0.288)。结论rt-PA与UK静脉溶栓治疗急性脑梗死患者均有良好效果,但rt-PA能更加有效地改善神经功能,促进疾病转归的同时减轻患者血管内皮损伤,抑制患者氧化应激反应,具有推广价值。

重组组织型纤维蛋白溶酶原激活剂静脉溶栓治疗超早期脑梗死患者临床分析

目的:探讨rt-PA(重组组织型纤维蛋白溶酶原激活剂)治疗超早期脑梗死(<6h)的有效性和安全性。方法:对55例发病6小时以内的急性脑梗死患者进行分析,其中16例接受rt-PA静脉溶栓治疗。结果:两组治疗后NIHSS评分、Barthel指数、mRS评分比较差异有统计学意义。两组脑出血发生率差别无统计学意义。结论:符合溶栓治疗条件的超早期脑梗死患者,采用rt-PA治疗是安全有效的,能够改善神经功能,恢复生活能力。

灯盏细辛对犬急性心肌缺血时组织纤维蛋白溶酶原激活剂和纤溶酶原激活物抑制剂的影响

本实验观察灯盏细辛对犬急性心肌缺血早期组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)的影响。结果表明:灯盏细辛能够明显抑制缺血后 PAI 浓度增高。与对照组和潘生丁比较,在缺血30min、60min、6h 时有显著性差异。随着时间延长,差异越来越显著,在缺血后6h 最明显(P<0.01)。另一方面,灯盏细辛还能够使 tPA 浓度维持相对恒定。在缺血后6h 时与对照组或潘生丁比较,有显著性差异。灯盏细辛对急性心肌缺血时 tPA、PAI 的影响可能是灯盏细辛抗心肌缺血的作用原理。

肾母细胞瘤组织中组织蛋白酶D、尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体的表达

目的:探讨肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。方法:用免疫组化SABC法检测30例肾母细胞瘤及15例非肿瘤肾组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。结果:肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的阳性表达率分别为50％,53.3％和56.7％。而在非肿瘤肾组织中不表达,差异有统计学意义(P<0.05),3者的阳性表达率与组织学类型密切相关,FH型均低于UH型(P<0.05)..结论:Cath D、uPA、uPAR在肿瘤的浸润和转移中起重要作用,可作为预后的指标。

重组人组织纤维蛋白溶酶原激活剂及突变体的分析

目的:为制订质量标准建立相应的检测方法。方法:应用肽图分析、高效液相色谱、电泳和酶活性测定等方法对tPA及突变体进行鉴别、纯度检查和活性测定。结果:反相高效液相色谱和肽图分析方法能区分相差3个氨基酸的2种tPA突变体;反相高效液相色谱、分子排阻高效液相色谱和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法能有效分离降解产物;不同结构的tPA表现的活性不同。结论:本文方法专属性强,且可操作。

尿激酶型纤溶酶原激活剂mRNA与PD-L1在乳腺癌及腋窝淋巴结中的表达及意义

探究在在乳腺癌及腋窝淋巴结中患者中,分析尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA与PD-L1的表达及意义。方法 从2020年1月~2022年12月80例作为研究重点人群,分为对照组/观察组,各40例,检测血中uPAmRNA与PD-L1水平,分析其与病情关系。结果 观察组血中uPAmRNA、PD-L1高表达及中表达均比对照组更高,存在显著差异(P<0.05),观察组有腋窝淋巴结转移与无腋窝淋巴结转移患者的uPAmRNA、PD-L1存在较为突出的差异(P<0.05)。结论 uPAmRNA和PD-L1的高表达可作为乳腺癌转移和预后的生物标志物,值得推广。

新生鼠缺氧缺血性脑损伤内源性纤维蛋白溶酶原激活剂变化及其意义

目的新生儿缺氧缺血性脑损伤发病机制尚不十分清楚,目前缺乏有效的治疗手段。近年来,越来越多的研究显示组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)在神经系统中起到很重要的作用。该研究欲探讨纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)在新生鼠缺氧缺血脑损伤中的作用。方法选用Wistar大鼠7日龄的新生鼠,运用Rice-Vannucci动物模型造成新生鼠脑缺血缺氧,缺血缺氧后不同时间取新生鼠大脑检测。异硫氰酸荧光素-右旋糖酐左心室灌注分析脑缺血缺氧后新生鼠脑的再灌注障碍。用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR),酶谱法检测损伤后不同时间tPA的表达与活性;并采用双重免疫荧光,TUNEL和DAPI染色法检测血小板聚集指标(Integrin GPIIb)与纤维蛋白(fibrin)在缺血缺氧后不同时间的表达及神经细胞凋亡。结果新生鼠脑缺氧缺血后1h,异硫氰酸荧光素-右旋糖酐心室灌注提示新生鼠大脑有明显的缺血梗塞区,而Integrin GPIIb与fibrin的表达也较对照侧明显增加。但4h后缺血梗塞区面积明显缩小,伴有Integrin GPIIb与fibrin的表达减少。tPA的表达与活性在缺血缺氧后明显增加。随着缺氧缺血后恢复的时间延长,大脑凋亡细胞增加。结论tPA表达的增加在脑缺氧缺血的急性期可有助于血栓溶解,但在脑缺氧缺血的亚急性期却会导致神经细胞凋亡而加重脑损伤。