线粒体ATP敏感性钾通道在尿皮质素后处理对大鼠心肌细胞保护效应中的作用

目的评价线粒体ATP敏感性钾(mtio-KATP)通道在尿皮质素后处理对大鼠心肌细胞保护效应中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠,16~20周龄,体重200~250 g,分离培养心肌细胞,采用随机数字表法将心肌细胞分成4组(n=28):对照组(C组)、缺氧复氧组(HR组)、尿皮质素后处理组(U组)和mito-KATP通道阻滞剂5-羟葵酸(5-HD)+尿皮质素后处理组(HU组)。C组:在37℃95%O2-5%CO2培养箱中持续培养150 min;HR组:在37℃95%N2-5%CO2培养箱中缺氧40 min后,复氧110 min;U组:缺氧40 min后先复氧10 min,然后在含10-8 mmol/L尿皮质素的培养基中孵育30 min,再复氧70 min;HU组:采用含10-4 mmol/L 5-HD的培养基孵育10 min,随后处理同U组。于复氧结束时,采用荧光法检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放程度以及线粒体膜电位(MMP)。采用Western blot法检测Bax和Bcl-2表达,采用CCK-8法检测细胞活力。结果与C组比较,其余3组心肌细胞活力和MMP降低,mPTP开放程度升高,Bcl-2表达下调,Bax表达上调(P<0.05);与HR组比较,U组心肌细胞活力和MMP升高,mPTP开放程度降低,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,HU组mPTP开放程度降低(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P>0.05);与U组比较,HU组心肌细胞活力和MMP降低,mPTP开放程度升高,Bcl-2表达下调,Bax表达上调(P<0.05)。结论尿皮质素后处理对大鼠心肌细胞保护效应的全部机制与促进mito-KATP通道开放有关。