厄贝沙坦对5/6肾切除及腹主动脉缩窄大鼠左心室肥厚及心肌尿素转运蛋白B表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦对5/6肾切除及腹主动脉缩窄大鼠左心室肥厚及心肌尿素转运蛋白B(UT-B)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、5/6肾切除组(肾衰组)、腹主动脉缩窄组(心衰组)、肾衰+心衰组及相应的厄贝沙坦干预组,每组8只。分组处理后,测定各组大鼠血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、B型利钠肽(BNP);取大鼠心脏,测定左心室质量与全心质量的比值(LVW/HW)、全心质量与体质量的比值(HW/BW)、左心室质量与体质量的比值(LVW/BW);RT-PCR和Western blotting检测心肌UT-B表达。结果与假手术组比较,肾衰组、心衰组及肾衰+心衰组大鼠出现心肌肥厚,LVW/HW、HW/BW、LVW/BW增大,血清AngⅡ和BNP水平增高,心肌组织UT-B mRNA和UT-B蛋白表达上调;肾衰组和肾衰+心衰组SCr、BUN水平升高。与肾衰组、心衰组及肾衰+心衰组比较,相应的厄贝沙坦干预组大鼠的心肌肥厚明显减轻,LVW/HW、HW/BW、LVW/BW降低,血清AngⅡ和BNP下降,心肌UT-B mRNA和UT-B蛋白表达下调。与肾衰组和肾衰+心衰组比较,相应的厄贝沙坦干预组大鼠SCr、BUN水平降低。结论 5/6肾切除及腹主动脉缩窄均可引起大鼠心功能明显下降,出现左心室肥厚,同时心肌UT-B表达增加;厄贝沙坦在改善心、肾功能的同时抑制心肌UT-B表达,UT-B可能在肾功能不全合并心力衰竭的发生中具有重要作用。

大鼠尿素转运蛋白B基因克隆及真核表达载体的构建

目的克隆sD大鼠尿素转运蛋白B（ureatransporterB，UT-B）的CDS全长基因并构建其真核表达载体。方法从SD大鼠肾髓质中提取总RNA并经逆转录反应获取总cDNA，以cDNA为模板，PCR扩增UT-B基因的CDS区全长片段，PCR产物加＂A＂尾后克隆至pMD-18T克隆载体，双酶切后获取UT-B片段，T4DNA连接酶将UT-B片段与KpnI和BamHI双酶切后的真核表达载体pcDNA3-1（-）连接，构建大鼠UT-B真核表达载体pcDNA3．1（-）-UT-B。结果成功克隆了sD大鼠UT-B基因，构建的pcDNA3．1（-）-UT-B载体经PCR扩增、KpnI和BamHI双酶切鉴定及测序验证，表达载体包含UT-B基因，且UT-B碱基序列与GeneBank中收录的大鼠UT-B序列-致。结论成功克隆了该基因并构建了其真核表达载体pcDNA3．1（-）-UT-B，为进-步进行UT-B基因转染治疗尿毒症的研究奠定了基础。

ATP结合盒转运蛋白B1与羧酸酯酶1基因多态性对达比加群酯药物谷浓度的影响

目的探讨ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)及羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与服用达比加群酯的患者药物谷浓度的相关性。方法选取2018年3月-2021年11月在福州某医院诊断为非瓣膜性房颤的69例患者作为研究对象。检测患者ABCB1及CES1的单核苷酸多态性位点以及基因型,采用抗Ⅱa因子显色法测定患者服用达比加群酯后药物的谷浓度,分析ABCB1及CES1基因多态性与谷浓度的相关性,进一步研究相关位点对谷浓度达标的影响。结果本研究共发现11个单核苷酸多态性位点,且ABCB1 rs2235013与ABCB1 rs2235033处于连锁不平衡状态(D’=0.96,r2=0.82)。但ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度无显著影响(P>0.05)。CES1 rs2302719突变型(TG,GG)患者的达比加群谷浓度高于野生型(TT)(51.98±8.06 vs 42.44±3.88,57.71±9.06 vs 42.44±3.88),并且CES1 rs2302719突变型(TG,GG)是患者谷浓度达标的保护因素,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度的影响还需进一步探索。CES1 rs2302719次要等位基因(G)可增加达比加群谷浓度,并且不良反应的发生率可能更低。

胆绿素还原酶A rs699512和肝细胞溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1 rs4149015位点基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症易感性相关性研究

目的:分析胆绿素还原酶A(BLVRA)rs699512和肝细胞溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1(SLCO1B1)rs4149015位点基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症(HB)易感性的相关性。方法:选取不明原因HB新生儿90例为HB组,另选取同期健康新生儿90例为对照组。比较两组临床资料以及BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因型分布和等位基因频率。比较不同BLVRA rs699512、BLVRA rs699512基因型患儿血清胆红素水平。分析BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因多态性与HB易感性的关系。结果:HB组患儿总胆红素和结合胆红素水平明显高于对照组(均P<0.05)。两组BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因型分布比较差异有统计学意义(均P<0.05)。HB组患儿BLVRA rs699512位点GG基因型分布高于对照组,AA基因型分布低于对照组,G等位基因频率高于对照组(均P<0.05)。HB组患儿SLCO1B1 rs4149015位点AA基因型分布高于对照组,GG基因型分布低于对照组,A等位基因频率高于对照组(均P<0.05)。BLVRA rs699512中GG基因型总胆红素和结合胆红素水平高于AA基因型(均P<0.05)。SLCO1B1 rs4149015中AA基因型总胆红素和结合胆红素水平均高于GG基因型(均P<0.05)。BLVRA rs699512位点GG基因型与HB发生呈正相关,AA基因型与HB发生呈负相关(r=0.671、-0.608,均P<0.05)。SLCO1B1 rs4149015位点AA基因型与HB发生呈正相关,GG基因型与HB发生呈负相关(r=0.695、-0.633,均P<0.05)。结论:不明原因HB新生儿BLVRA rs699512位点GG基因型与SLCO1B1 rs4149015位点AA基因型会增加易感性,临床可建立早期防治体系以改善患儿预后。

尿素通道蛋白B的转运特性

尿素通道蛋白B(urea transporters B, UT-B)主要表达在红细胞和一些上皮及内皮细胞膜,介导尿素的跨膜转运。近年来研究发现UT-B亦参与其他物质的转运,如水、NH3和尿素类似物等,提示UT-B还可以作为水和气体通道。本文主要阐述UT-B对这些物质的转运特性,并探究其可能的生理学意义。

胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中蛋白激酶B表达及葡萄糖转运蛋白4转位的改变

目的研究高脂饮食喂养的胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌中蛋白激酶B(PKB)表达和葡萄糖转运蛋白4(GluT4)转位的改变及饮食治疗、葛根素、罗格列酮干预的影响。方法将雄性SD大鼠50只随机分为正常饮食(A)组和高脂饮食(B)组,2个月后再将B组大鼠随机分为高脂饮食(C)组、正常饮食干预(D)组、葛根素干预(E)组和罗格列酮干预(F)组。干预1个月后检测骨骼肌中PKB的表达及转位至质膜的GluT4含量。结果C组大鼠产生了明显的IR,骨骼肌中PKB的表达较A组显著降低(P<0.01),转位到质膜上的GluT4含量显著减低(P<0.01);D、E、F组大鼠IR明显改善,骨骼肌中PKB的表达较C组大鼠显著增加(P<0.01),GluT4含量较C组大鼠显著升高(P<0.01)。结论高脂饮食喂养的SD大鼠骨骼肌产生明显的IR,骨骼肌中Ins诱导的PKB表达降低,Ins刺激的GluT4向质膜的转位减少。饮食治疗及葛根素、罗格列酮干预能增加骨骼肌中Ins刺激的PKB表达及GluT4向质膜的转位。

核因子-κB对TNF-α诱导的脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

【目的】观察TNF-α对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA与蛋白表达的作用,并探讨核因子-κB(NF-κB)对上述作用的影响。【方法】成熟的3T3-L1脂肪细胞分成3组:A组正常对照组,B组肿瘤坏死因子α(TNF-α)组,C组吡咯烷二硫基甲酸酯(NF-κB活性抑制剂)+TNF-α组。各组干预48h后检测phospho-NF-κBp65(Ser536)的蛋白水平、GLUT4mRNA及蛋白水平。蛋白检测采用Western法,mRNA检测采用RT-PCR法。【结果】B组phospho-NF-κBp65蛋白水平(71.1±5.9)高于A组(41.3±1.7,P<0.001)和C组(25.4±4.7,P<0.001)。B组GLUT4的mRNA水平(0.86±0.14,P<0.001)与蛋白水平(31.6±7.2,P<0.001)低于A组(2.01±0.65;60.7±8.4),C组mRNA水平(0.46±0.12)与B组比较有下降趋势但无统计学意义(P=0.100),C组蛋白水平(9.5±3.0)低于B组(P=0.001)。【结论】TNF-α下调3T3-L1脂肪细胞的GLUT4表达,抑制NF-κB活性后GLUT4表达进一步下调。这提示了TNF-α可能不是通过激活NF-κB而使GLUT4的表达下调。

北京地区汉族人群溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1与载脂蛋白E基因多态性分布及其意义

目的探讨北京地区汉族人群溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1(SLCO1B1)与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性分布及其临床意义。方法连续入选2019年7月至2020年1月首都医科大学附属北京安贞医院住院和门诊患者以及健康检查志愿者8132例,采用聚合酶链反应荧光探针法检测SLCO1B1(rs2306283:388 A>G,rs4149056:521 T>C)及ApoE(rs429358:388 T>C,rs7412:526 C>T)多态性位点,分析基因多态性分布情况,分别比较不同性别和不同年龄分层人群SLCO1B1与ApoE基因多态性分布、基因型分布及多态性位点突变频率的差异。结果北京地区汉族人群中共检出SLCO1B1基因8种表型,*5/*5未检测到,*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b、*1a/*5、*1a/*15、*1b/*15、*5/*15和*15/*15检出者分别为567例(6.97%)、2619例(32.21%)、3241例(39.85%)、3例(0.04%)、473例(5.82%)、1128例(13.87%)、2例(0.02%)和99例(1.22%)。根据服用他汀类药物后发生横纹肌溶解症或肌病的风险及服用药物的剂量分为正常代谢型、中间代谢型和弱代谢型,占比分别为79.03%(6427/8132)、19.72%(1604/8132)和1.24%(101/8132)。北京地区汉族人群中共检出ApoE基因6种不同表型,ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、ε3/ε4和ε4/ε4检出者分别为45例(0.55%)、956例(11.76%)、107例(1.32%)、5616例(69.06%)、1331例(16.37%)、77例(0.95%)。根据不同基因型发生冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑梗死、阿尔茨海默病等的风险及服用他汀类药物的疗效将其分为三大类,ApoE保护类基因型、ApoE大众类基因型和ApoE风险类基因型,占比分别为12.31%(1001/8132)、70.38%(5723/8132)和17.31%(1408/8132)。同时具有ApoE保护类基因型和SLCO1B1正常代谢型患者796例(9.79%),同时具有ApoE风险类基因型和SLCO1B1弱代谢型患者23例(0.28%)。在男性和女性人群以及年龄≤60岁和>60岁人群中,SLCO1B1均以正常代谢型占比最高,ApoE均以大众类基因型占比最高,不同性别和不同年龄分层人群SLCO1B1和ApoE基因型分布情况差异均无统计学意义(均P>0.05)。SLCO1B1及ApoE基因的上述多态性位点突变频率观察值符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05),具有群体代表性。结论本研究具有群体代表性,北京地区汉族人群SLCO1B1和ApoE基因多态性与性别和年龄分层无关,根据基因型及时调整他汀类药物用药方案,有助于实现个体化用药和安全用药。

小鼠骨骼肌细胞蛋白激酶B底物160在有氧运动促进葡萄糖转运体4转运中的作用

目的:通过研究有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌细胞蛋白激酶B(PKB/Akt)底物蛋白160(AS160)和葡萄糖转运体4(GLUT4)表达的影响,探讨AS160在调节细胞葡萄糖转运过程中的作用及有氧运动影响骨骼肌细胞葡萄糖代谢的生物学机制。方法:20只16周龄、雄性C57BL/6小鼠,随机分为安静组(NC,n=10)和运动组(NE,n=10);运动组进行为期6周、75%VO2max强度的有氧跑台训练。6周训练结束后24h,动物麻醉后取材。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨骼肌组织AS160、GLUT4基因表达;免疫印迹杂交(Western blot)和免疫荧光染色(IF)分别检测骨骼肌细胞AS160、pAS160-Thr642和GLUT4蛋白表达及定位。结果:与NC组相比,NE组小鼠骨骼肌细胞AS160 mRNA和蛋白表达差异无显著性,但pAS160-Thr642表达显著增加;NE组小鼠骨骼肌细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达较NC组显著增加,GLUT4向细胞膜迁移明显增加。结论:有氧运动显著增强骨骼肌细胞pAS160-Thr642的活性,增强GLUT4表达及促进GLUT4向细胞膜转移,促进骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用。

胆固醇酯转运蛋白基因TaqⅠB多态性与蒙古族原发性高血压的相关性

目的分析胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因TaqⅠB多态性与蒙古族人群原发性高血压(EH)的关系。方法从内蒙古自治区通辽市蒙古族健康体检人群随机抽取1 819例进行病例-对照研究,其中高血压组840例,正常血压组979例。用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序方法鉴定CETP基因的TaqⅠB多态性位点基因型。结果 TaqⅠB位点GG、GA、AA基因型和G/A等位基因频率分布在整个人群、男性组和女性组中均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。无论在整体人群还是按性别分组的亚群中,原发性高血压组CETP基因TaqⅠB位点GG、GA、AA基因型和G/A等位基因频率分布和对照组无差异。在男性组中,与携带CETP基因TaqⅠB位点GG基因型的个体相比,AA型个体的高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高,总胆固醇和三酰甘油水平显著降低(P<0.05)。结论 CETP基因TaqⅠB多态性不是原发性高血压的直接危险因素,但可影响血脂水平,可能间接参与原发性高血压的发生。

萆薢分清丸调控尿酸转运蛋白改善高尿酸血症肾损伤的作用机制研究

目的 探讨萆薢分清丸改善高尿酸血症(HUA)肾损伤的作用机制。方法 以灌胃氧嗪酸钾、腺嘌呤联合10%酵母粉饲料喂养诱导HUA大鼠模型,持续2周。以血尿酸(SUA)水平评价模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组,萆薢分清丸低、中、高剂量组,非布司他组,每组8只。给药组给予相应药物灌胃,对照组、模型组灌胃等量0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),持续给药4周后处死取材。采用生化法检测各组大鼠血清中SUA、腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、血尿素氮(BUN)以及血肌酐(SCr)水平;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变;采用Western blot检测肾组织中ABC亚家族G亚型2 (ABCG2)、葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)以及多药耐药相关蛋白4(MRP4)表达水平;采用免疫组化法检测肾组织磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (AKT)及核因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平。结果 HE染色提示模型组肾单位结构不完整,肾间质多处水肿,少量肾小球出现萎缩且球囊壁上皮细胞不完整;模型组血清SUA、ADA、XOD、SCr、BUN水平明显升高(P<0.01),肾组织GLUT9蛋白表达被上调,ABCG2及MRP4蛋白表达减少(P<0.05);免疫组化结果显示模型组肾组织中PI3K、AKT及NF-κB蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,萆薢分清丸能有效改善HUA大鼠肾损伤,降低血清SUA、ADA、XOD、SCr、BUN水平,下调肾组织GLUT9蛋白表达,提高ABCG2、MRP4、PI3K、AKT以及NF-κB蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 萆薢分清丸可能通过调控PI3K/AKT/NF-κB通路以及尿酸转运蛋白的表达来影响尿酸的生成与代谢,进而改善HUA大鼠肾损伤。

尿素通道蛋白B在人膀胱癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测膀胱癌患者肿瘤组织和正常膀胱黏膜组织中尿素通道蛋白B(UT-B)的表达,阐明其在膀胱癌组织中表达的临床意义。方法:收集临床膀胱癌患者术后石蜡包埋标本52例,以正常膀胱黏膜组织15例作为对照,采用免疫组织化学方法检测UT-B蛋白阳性表达率,分析UT-B蛋白阳性表达率在膀胱癌组织和正常膀胱黏膜表达的差异以及其与患者临床病理参数的关联。结果:UT-B蛋白在膀胱癌组织中低表达,阳性表达率为44.2%;在正常膀胱黏膜组织中高表达,阳性表达率为93.3%,2组UT-B蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P=0.001)。膀胱癌组织中UT-B蛋白的阳性表达率随肿瘤组织分级的增高而逐渐降低,不同分级间比较差异有统计学意义(P=0.010)。膀胱癌组织中UT-B蛋白在非肌层浸润期(Ta+T1)的阳性表达率明显高于肌层浸润期(T2+T3),组间比较差异有统计学意义(P=0.014)。结论:UT-B蛋白的表达降低或缺失可能促进了膀胱癌的发生发展和侵袭。

鸡OATP1B3互作蛋白筛选及其相关基因的转录表达分析

【目的】筛选鉴定鸡有机阴离子转运多肽1B3(OATP1B3)的互作蛋白,并探究其对鸡蛋绿壳颜色形成的影响,为提高绿壳蛋鸡群体选育准确性提供参考依据。【方法】以真核表达载体p EGFP-SLCO1B3和空载体pEGFP-C1分别转染绿壳型赤水乌骨母鸡蛋壳腺上皮细胞,通过免疫共沉淀(Co-IP)结合液相色谱与串联质谱联用技术(LC-MS/MS)筛选鸡OATP1B3互作蛋白,经GO功能注释分析、KEGG信号通路富集分析及蛋白相互作用网络分析鉴定出与鸡蛋绿壳性状形成相关的OATP1B3互作蛋白。同时,通过构建SLCO1B3基因沉默及过表达载体分别转染蛋壳腺上皮细胞,检测SLCO1B3基因过表达或沉默时部分OATP1B3互作蛋白基因(FXR1、CTTN、RPL12和RPS17)在蛋壳腺上皮细胞中的表达情况,并根据鸡蛋壳颜色分为白壳、浅绿和深绿3种类型,分析蛋壳颜色△a*值与FXR1、CTTN、RPL12和RPS17基因表达的相关性。【结果】共筛选鉴定出37个与鸡OATP1B3相互作用的蛋白,其中FXR1、CTTN、RPL12和RPS17与鸡蛋的绿壳性状有密切关系。SLCO1B3基因过表达能极显著下调蛋壳腺上皮细胞内FXR1基因的表达(P<0.01,下同),显著上调RPL12基因表达(P<0.05,下同),极显著上调RPS17基因表达;当SLCO1B3基因沉默后,蛋壳腺上皮细胞内FXR1和CTTN基因的表达极显著上调,而RPL12基因的表达显著下调。白壳类型赤水乌骨母鸡下丘脑中的FXR1基因相对表达量极显著高于绿壳类型赤水乌骨母鸡,肝脏中的RPL12和RPS17基因相对表达量极显著或显著高于绿壳类型赤水乌骨母鸡;此外,FXR1基因在下丘脑中的相对表达量与蛋壳颜色△a*值极显著正相关,RPL12基因在蛋壳腺和肝脏中的相对表达量与蛋壳颜色△a*值极显著正相关。【结论】筛选鉴定出的37个鸡OATP1B3互作蛋白主要定位于细胞质和细胞核,具有蛋白结合能力及结构分子活性,主要参与细胞过程、生物调节和能量代谢。在鸡壳腺上皮细胞内SLCO1B3基因与FXR1、CTTN、RPL12和RPS17基因间存在调控关系,其中,FXR1和RPL12基因在鸡蛋绿壳性状的形成过程中发挥着重要作用。

尿素通道蛋白B敲除小鼠海马毛细血管的体视学

目的:研究尿素通道蛋白B(UT-B)敲除小鼠海马组织中尿素对海马毛细血管形态结构的影响,探讨UT-B基因敲除小鼠出现抑郁样行为的病理机制.方法:采用糖水偏好实验观察野生型和UT-B基因敲除小鼠的抑郁样行为,尿素检测试剂盒测定2型小鼠海马尿素水平,免疫组织化学和体视学定量检测2型小鼠海马毛细血管总长度、总体积、总表面积、平均直径等形态学指标.结果:糖水偏好实验中,野生型和UT-B基因敲除小鼠的糖水偏爱指数分别为77.22％±3.93％vs6L 20％±4.42％,差异具有统计学意义.野生型和UT-B基因敲除小鼠海马尿素水平,海马毛细血管的总长度、总体积、总表面积、平均直径差异均有统计学意义.结论:UT-B敲除导致小鼠海马尿素堆积,引发小鼠海马毛细血管的形态改变,毛细血管总体积下降造成海马血灌注量不足而引发小鼠的抑郁样行为.

尿素通道蛋白B基因敲除小鼠心脏电生理特性的改变

目的:研究尿素通道蛋白B(UT-B)基因敲除对小鼠心脏电生理特性的影响。方法:使用常规的心电图、心肌细胞动作电位记录方法和膜片钳实验技术。结果:①UT-B基因敲除小鼠30%发生了不同程度的心律失常,而对照组的野生C57小鼠无一例发生心律失常。②基因敲除小鼠心室肌细胞动作电位幅值(APA)及最大除极速度(Vmax)明显受到抑制(P<0.05),而心室肌细胞动作电位复极50%、90%时程(APD50、APD90)和正常对照组比明显延长(P<0.05)。③基因敲除小鼠心室肌细胞膜上钠离子通道电流幅值和对照组比明显降低(p<0.01)。结论:UT-B基因敲除可以导致小鼠心脏电生理特性发生改变。

尿素通道蛋白B敲除引起小鼠大脑皮质毛细血管形态改变的体视学研究

目的:研究尿素通道蛋白B(Urea transporter B,UT-B)敲除对小鼠大脑皮质毛细血管形态结构的影响及出现抑郁样行为的病理机制。方法采用强迫游泳实验观察野生型和UT-B基因敲除小鼠的抑郁样行为,免疫组化技术和体视学方法定量检测两型小鼠大脑皮质毛细血管总长度、总体积、总表面积、平均直径等形态学指标。结果强迫游泳实验中,野生型和UT-B基因敲除小鼠的不动时间分别为(123±19 s)和(86±13 s),P=0.0012<0.05,差异具有显著性。两型小鼠大脑皮质的体积皱缩率分别为0.53±0.04、0.51±0.07(P>0.05),无显著性差异。野生型小鼠和UT-B基因敲除小鼠大脑皮质毛细血管的总长度为(29.20±1.20)m和(24.00±2.45)m(P=0.093>0.05),总体积为(1.159±0.095)mm3和(0.855±0.060)mm3(P=0.035<0.05),总表面积为(6.143±0.377)cm2和(4.616±0.455)cm2(P=0.042<0.05),平均直径为(6.506±0.161)μm和(5.564±0.118)μm(P=0.016<0.05)。结论:UT-B敲除可能导致小鼠大脑皮质毛细血管总表面积、总体积和平均直径显著下降,造成大脑血灌注量不足而引发小鼠的抑郁样行为。

YTHDC1介导ABCB6上调诱导AD小鼠神经元细胞铁死亡促进认知功能障碍机制的实验研究

目的研究ATP结合盒B亚家族转运蛋白6(ATP-binding cassette subfamily B transporter 6,ABCB6)对阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)小鼠认知功能障碍的影响及其可能的潜在调控分子机制。方法通过注射β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)构建体内AD小鼠模型;采用水迷宫测试和Y迷宫测试评估大鼠学习与记忆能力、空间探索能力。通过神经元HT22细胞和Aβ构建体外AD细胞模型;采用RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)分析YTH结构域包含蛋白1(YTH domain containing proteins 1,YTHDC1)与ABCB6的结合关系;实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测过表达和敲低转染效率;Western blot检测YTHDC1和ABCB6蛋白,以及铁死亡相关蛋白[溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)]表达水平;CCK-8检测细胞活力;检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及Fe^(2+)含量。结果AD小鼠海马组织及Aβ诱导的HT22细胞中ABCB6 mRNA(3.51±0.17 vs 1.02±0.01,3.45±0.21 vs 1.02±0.01)和蛋白(3.25±0.14 vs 1.01±0.01,3.14±0.16vs 1.01±0.01)水平均显著上调,差异具有统计学意义(t=-46.238,-20.349;-50.468,-23.013,均P<0.001)。敲低ABCB6显著降低AD小鼠抵达平台的时间、到达平台距离,增加小鼠自发交替率和进入新异臂次数的比值(t=27.007,11.264,24.414,19.901,均P<0.001)。敲低ABCB6促进HT22细胞增殖,抑制Aβ诱导的MDA,Fe^(2+)水平上调和GSH水平下调,减少ROS生成,促进SLC7A11和GPX4蛋白表达(t=2.883~26.122,均P<0.05)。YTHDC1蛋白通过与ABCB6 mRNA结合促进其稳定性,上调ABCB6蛋白表达。敲低YTHDC1显著降低ABCB6蛋白水平(t=18.504,P<0.001),促进HT22细胞增殖,升高GSH含量及SLC7A11和GPX4蛋白水平,降低MDA和Fe^(2+)含量,抑制ROS生成(t=4.404~14.486,均P<0.05)。敲低YTHDC1可以改善AD小鼠学习与记忆能力和空间探索能力。过表达ABCB6可逆转敲低YTHDC1对HT22细胞铁死亡和AD小鼠认知功能障碍的影响。结论YTHDC1可能通过介导ABCB6上调,诱导神经元细胞铁死亡,进而促进AD小鼠的认知功能障碍发生。

SLCO1B1和ApoE基因多态性与冠心病关系的研究

目的探讨溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1(SLCO1B1)和载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的关系。方法选取2020年1月至2022年6月于甘肃省武威肿瘤医院心血管内科收治的80例冠心病患者作为观察组,同一时间选取本院体检的80例健康者作为对照组,抽取外周血检测SLCO1B1和ApoE基因多态性,全自动生化分析仪检测血脂指标,Logistic分析冠心病的危险因素。结果对照组与观察组SLCO1B1基因型15/15、1a/15、1a/1a、1a/1b、1a/5、1b/15及1b/1b、等位基因15、1a、1b及5比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组ApoE等位基因ε2及ε3的占比显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,观察组患者SLCO1B1基因在1b/15型上总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及载脂蛋白B(ApoB)水平升高,1a/15型TG水平升高,1a/1b型上高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及载脂蛋白A1(ApoA1)降低,1b/1b型上TG升高,HDL-C及ApoA1降低(P<0.05)。与对照组相比,观察组ApoE基因在E2/E3型HDL-C降低,E3/E3型TG升高,HDL-C及ApoA1水平降低,E3/E4型HDL-C及ApoA1水平降低(P<0.05)。以冠心病为因变量,以上述结果中P<0.05的因素(高血压、糖尿病、TG、LDL-C、ApoA1、ApoB、ε3及ε4)作为自变量,运用Logistic回归分析结果发现,高血压、糖尿病、TG、LDL-C、ApoA1、ApoB及ApoE基因ε4型是诱发冠心病的危险因素(P<0.05)。结论SLCO1B1和ApoE基因多态性与血脂水平异常相关,ApoE基因ε4型可提高冠心病的发生。

ATP结合盒B亚家族1转运蛋白基因多态性与癫痫耐药相关性研究进展

ATP结合盒B亚家族1转运蛋白基因(ABCB1)编码产物是P-糖蛋白(P-gp)。目前的诸多研究表明ABCB1基因单核苷酸多态性(SNPs)及其表达产物P-gp与癫痫耐药有关。但也有研究认为,ABCB1_SNPs及P-gp与癫痫耐药之间没有关联。可能是由于ABCB1_SNPs的种族差异性,造成了各项研究结果不相一致。亦有研究认为ABCB1_3435C>T、1236C>T及2677G>T\A\A的多态性或许与癫痫耐药无关,但是其单体型与癫痫耐药有一定关联。因此,应在不同种族中进行ABCB1_SNPs及其单体型的进一步研究,将有助于发现真正的癫痫耐药机制。

台儿庄地区心脑血管疾病患者ApoE和SLCO1B1基因多态性分析

目的:分析台儿庄地区心脑血管疾病患者他汀类药物代谢相关基因ApoE和SLCO1B1的基因多态性分布情况,评估患者对服用他汀类药物的疗效和风险,指导临床进行个体化精准用药。方法:以2022年3月-2023年1月与台儿庄人民医院神经内科及心内科就诊的268例心脑血管病患者为研究对象,应用DNA连接酶测序法对患者外周血基因组中ApoE和SLCO1B1基因进行检测,分析基因多态性分布情况,并比较不同性别,不同年龄段,不同地域间的基因型分布差异。结果:观察268例台儿庄地区心脑血管病患者的ApoE及SLCO1B1基因位点多态性突变频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。ApoE基因型共检出5种,其中E3/E3型占比最大,为76.9%,其他基因型E2/E2型,E2/E3型,E3/E4型,E4/E4型占比依次为0.37%,10.4%,11.9%,0.37%,未检出E2/E4型。疗效正常基因型E3型(E2/E4+E3/E3)占比最高,为76.87%,疗效较好基因型E2型(E2/E2+E2/E3)与疗效较差基因型E4型(E3/E4+E4/E4)占比分别为10.82%,12.31%。不同性别,不同年龄患者间ApoE不同疗效基因型分布差异无统计学意义(P>0.05),但不同地区间比较,ApoE不同疗效基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)。SLCO1B1基因共检出6种基因型,其中*1b/*1b,*1b/*15,*1a/*1b占比较高,分别为28.73%,20.15%,41.79%,其他基因型*1a/*1a,*1a/*15or*1b/*5,*15/*15频率分别为5.6%,3.36%,0.37%,未检测到*1a/*5、*5/*5和*5/*15基因型。基因型组合中,肌病低风险基因型(*1a/*1a+*1a/*1b+*1b/*1b)占比最高为76.12%,肌病中风险基因型(*1a/*5+*1a/*15or*1b/*5+*1b/*15)和肌病高风险基因型(*5/*5+*5/*15+*15/*15)占比分别为23.51%,0.37%。不同性别,不同年龄,不同地区间患者比较,SLCO1B1不同肌病风险基因型频率分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:台儿庄地区心脑血管病患者ApoE基因以疗效正常型E3型为主,SLCO1B1基因以肌病低风险基因型为主,且两种基因型各组合与年龄,性别无关,ApoE基因存在地区差异。通过基因检测可筛选出12.31%疗效较差的患者以及23.88%的肌病中高风险患者,可辅助临床制定合理的用药方案。