小鼠尿路斑块2启动子对人细胞特异性及表达调控研究

目的 研究小鼠尿路斑块 2 (UPⅡ )启动子的缺失体在人细胞中启动活性。方法 应用脂质体转染技术 ,将含不同长度的小鼠UPⅡ启动子片段的重组质粒转染入人不同组织细胞系 ,利用共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪和微板检测仪观察报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)和荧光素酶 (Luc)的表达情况。结果 UPⅡ在膀胱癌细胞BIU 87表达GFP较非膀胱癌细胞多 ( 4 .3 4%对 0 )。UPⅡ 1、UPⅡ 2、UPⅡ 3在各组织细胞中表达GFP的数目较UPⅡ小 ,UPⅡ 4在各细胞中均无表达。UPⅡ在BIU 87表达Luc的量是其他组织细胞的 1.8～ 8.2倍。UPⅡ 1、UPⅡ 2、UPⅡ 3在各组织细胞中表达Luc的量均减少 ,UPⅡ 4在各组织细胞中几乎无表达。结论 小鼠UPⅡ启动子在人膀胱移行细胞中具有特异性启动活性 ,启动子上游 1.5× 10 3 区域是增强子序列 ,下游 14 3bp区域是核心启动子序列。