尿酸盐转运体研究现状及其药物研发

尿酸盐是体内嘌呤代谢的终产物,其合成和排泄决定血尿酸水平。无论血尿酸水平过高或过低都将导致严重并发症。本文主要对尿酸转运体及降尿酸药物进行综述。

肾脏有机阴离子转运体在尿酸转运中的作用研究进展

尿酸是嘌呤核苷酸类和游离碱基转化过程中的最终酶产物,肾脏有机阴离子转运体在维持体内尿酸的重吸收与分泌之间的平衡有显著性意义。尿酸的重吸收和分泌失衡是导致高尿酸血症的主要原因。研究肾脏有机阴离子转运体在尿酸转运中的作用有重要意义。

高尿酸对小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体基因表达的影响

目的:研究高尿酸条件下尿酸盐阴离子转运体1(Urate anion exchanger 1,URAT1)、葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、有机阴离子转运体10(Organic Anion Transporter 10,OAT10)基因表达的动态变化。方法:(1)研究不同剂量尿酸对小鼠血尿酸水平的影响:遵循随机化原则将50只雄性昆明种小鼠分为5组(每组10只):分别为正常组、尿酸每天100、200、300、400mg/kg剂量组。每天2次腹腔注射尿酸磷酸盐溶液,共造模14天,确定最佳剂量。(2)确定最佳剂量后,小鼠腹腔注射最佳剂量尿酸每天300 mg/kg,复制高尿酸血症模型。在给予尿酸1、3、7、14天处死小鼠,用磷钨酸法测定小鼠血清尿酸水平和肝尿酸含量,用RT-PCR检测小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体URAT1、GLUT9、OAT10基因表达水平。结果:(1)腹腔注射尿酸每天300 mg/kg及400mg/kg能有效升高小鼠血尿酸水平(P<0.01),但400 mg/kg组小鼠死亡率高。而尿酸100、200 mg/kg组与正常组相比无统计学差异,300 mg/kg为最佳剂量;(2)与正常组相比,模型组血尿酸水平在造模1、3、7、14天均升高(P<0.05),造模成功;与正常组相比,模型组肝匀浆尿酸含量在造模1天显著升高(P<0.01);而造模3天、7天及14天均无统计学差异;与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏GLUT9基因表达水平在1、3、14天均增加(P<0.05);与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏URAT1和OAT10基因表达水平在各时间点均无显著变化(P>0.05)。结论:在尿酸诱导的高尿酸血症小鼠模型上,模型组GLUT9基因在给予尿酸1、3、14天后表达均上调,但URAT1、OAT10的基因表达均无显著变化。

水蛭素对高尿酸血症大鼠尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9表达的影响

目的探究水蛭素对高尿酸血症大鼠的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、别嘌醇(30mg/kg)组和水蛭素低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g/kg)组。大鼠ig氧嗪酸钾(0.75 g/kg),1次/d,连续5周,建立高尿酸血症模型;同时各给药组分别ig相应剂量的药物,1次/d,连续5周。采用生化法检测大鼠血清和尿液中的尿酸水平;免疫组化法测定肾组织中有机阴离子转运蛋白1(organic anion transporter 1,OAT1)水平;Western blotting法测定肾组织中葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、OAT1、尿酸盐转运体1(urate transporter 1,URAT1)蛋白表达;q RT-PCR检测肾组织中GLUT9、OAT1、URAT1 mRNA表达。结果模型组大鼠血清和尿液中尿酸水平显著升高(P<0.01),GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),OAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,水蛭素可显著降低大鼠血清和尿液中尿酸水平(P<0.01),显著下调GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01),显著上调OAT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。结论水蛭素可通过调控高尿酸血症大鼠肾脏尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9的表达,从而发挥降尿酸作用。

以hURAT1为靶点的排尿酸药物体外细胞筛选模型的建立和应用

人尿酸盐阴离子转运体1(human urate anion transporter 1,hURAT1)是人肾小管重吸收尿酸的主要转运蛋白,以hURAT1为靶点,筛选hURAT1抑制剂是近年来降尿酸药物开发的热点,因此建立hURAT1抑制剂体外细胞筛选模型具有重要的意义与实用价值。本实验首先构建了表达SLC22A1 2(hURAT1编码基因)的慢病毒载体,感染MDCK细胞后,通过G41 8筛选出稳转细胞株(稳转株);随后采用W estern-blot及免疫荧光方法检测目的蛋白的表达,并通过液闪计数仪检测hURAT1稳转株对[^(14)C]尿酸的摄取作用及hURAT1抑制剂苯溴马隆、丙磺舒对[^(14)C]尿酸摄取的抑制效果。实验结果显示,hURAT1稳转株目的蛋白表达量为对照稳转株的两倍,并且吸收尿酸的量明显大于对照细胞(P>0.001)。此外,实验中测得hURAT1稳转株对尿酸吸收的Km值为365.4μmol/L,苯溴马隆及丙磺舒对尿酸吸收的IC_(50)分别为0.1 8μmol/L和66.82μmol/L。以上结果表明,本实验成功构建了稳定表达hURAT1的MDCK细胞株,并建立了一套hURAT1抑制剂体外准确筛选和评价的方法体系。

藏药二十五味儿茶丸降尿酸作用及对尿酸转运蛋白表达水平的影响

目的研究藏药二十五味儿茶丸对氧嗪酸钾联合次黄嘌呤诱导的大鼠高尿酸血症的防治作用。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌醇组(10 mg/kg)和二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(1、0. 5、0. 25 g/kg),除空白组外,其余各组皮下注射氧嗪酸钾(200 mg/kg)联合灌胃次黄嘌呤(300 mg/kg)建立高尿酸血症模型,1 h后灌胃给予相应药物,连续7 d。生化法测定血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,血清及肝组织中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性; HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法测定肾脏有机阴离子转运蛋白1 (OAT1)、有机阴离子转运蛋白3 (OAT3)及尿酸盐阴离子转运体1 (URAT1)的表达。结果与空白组比较,模型组血尿酸水平、血清及肝脏组织XOD水平显著升高,肾脏组织出现病理损伤,肾脏组织OAT1及OAT3表达显著降低,URAT1表达显著升高。与模型组比较,二十五味儿茶丸高剂量组能明显降低血尿酸水平,抑制XOD活性,改善肾脏病理损伤,升高OAT1及OAT3的表达,抑制URAT1的表达。结论二十五味儿茶丸可以有效治疗高尿酸血症并对肾脏有一定的保护作用,其降尿酸机制可能与抑制XOD活性,提高OAT1、OAT3的表达,抑制URAT1的表达有关。

虎杖-桂枝药对配伍对大鼠慢性高尿酸血症和肾、肠尿酸转运体表达的影响

目的:研究虎杖-桂枝药对配伍对大鼠高尿酸血症的防治作用及对尿酸盐阴离子转运体1(URAT1),有机阴离子转运蛋白3(OAT3),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2(ABCG2)表达的影响。方法:84只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,苯溴马隆组(10 mg·kg^(-1)),痛风定组(160 mg·kg^(-1))和虎桂低、中、高剂量组(3.5,7,14 g·kg^(-1))。以皮下注射氧嗪酸钾(200mg·kg^(-1))和ig次黄嘌呤(50 mg·kg^(-1))和乙胺丁醇(250 mg·kg^(-1))的方法,建立高尿酸血症大鼠模型。第4天开始各组大鼠ig给予相应药物,每天1次,连续2周,测定血尿酸(SUA),尿尿酸浓度(UUA),肌酐(Cr),尿素氮(BUN),谷丙转氨酶(GPT)水平;以RT-PCR方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3和小肠ABCG2的mRNA表达水平,以Western blot方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3的蛋白表达水平;以免疫组化方法测定大鼠小肠ABCG2的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血尿酸水平显著升高,尿尿酸排泄减少,肾脏URAT1 mRNA和蛋白高表达,肾OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白低表达,具有明显统计学差异(P<0.01)。与模型组比较,虎桂药对高中剂量组能显著降低血尿酸和尿素氮水平,增加24 h尿酸排泄量;虎桂药对高中剂量组能显著降低肾脏URAT1 mRNA和蛋白表达量水平,升高肾脏OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白的表达量水平,均具有明显统计学差异(P<0.01,P<0.05)。结论:虎桂药对有明显的抗高尿酸血症作用,可能是通过下调大鼠肾脏URAT1的表达,并上调大鼠肾脏OAT3和小肠ABCG2的表达而减少尿酸的重吸收并增加其排泄。

猫须草水提物对痛风性肾病大鼠肾脏URAT1、OAT1及病理的影响

目的探讨猫须草水提物对痛风性肾病大鼠肾脏尿酸盐转运体1(URAT1),有机阴离子转运蛋白1(OAT1)及病理的影响。方法采用酵母粉+腺嘌呤法建立大鼠痛风性肾病模型,测定其血尿酸、血肌酐、血尿素氮、尿尿酸、尿肌酐、24 h尿液排泄量及尿酸分级排泄率,光镜下观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织URAT1、OAT1蛋白表达。结果与模型组比较,猫须草水提物高、中剂量组大鼠血尿酸、血肌酐、血尿素氮水平及URAT1蛋白表达降低,而尿尿酸、尿肌酐水平,尿酸分级排泄率,OAT1蛋白表达升高;高、中、低剂量组大鼠24 h尿液排泄量升高程度无明显变化。结论猫须草水提物可能通过上调OAT1蛋白表达促进尿酸排泄、下调URAT1蛋白表达抑制尿酸重吸收的双重调节功能来促进尿酸在肾脏中的排泄,并减轻尿酸对肾脏的病理损伤。

虎桂药对组分配伍治疗高尿酸血症的作用及机制研究

目的:探究虎杖苷和桂皮醛单体配伍对高尿酸血症大鼠的降尿酸作用及机制。方法:采用氧嗪酸钾(200 mg/kg)皮下注射,次黄嘌呤(50 mg/kg)和乙胺丁醇(250 mg/kg)灌胃建立高尿酸血症大鼠模型。造模5 d后,筛选造模成功的大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、别嘌醇(30 mg/kg)组、苯溴马隆(10 mg/kg)组及虎杖苷-桂皮醛低、中、高剂量(虎杖苷-桂皮醛:0.4 mg/kg+0.45 mg/kg、0.8 mg/kg+0.9 mg/kg、1.6 mg/kg+1.8 mg/kg)组。给药3 w后,分别检测血清中尿酸(SUA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;qPCR测定肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)和肾脏葡萄糖转运子(GLUT9)、尿酸盐转运子(URAT1)的mRNA表达;Western Blot测定肝脏XOD和肾脏GLUT9、URAT1蛋白表达;肾脏组织行HE染色观察各组病理学变化。结果:与模型组比较,虎杖苷-桂皮醛中、高剂量组大鼠SUA水平显著降低,肝脏ADA、XOD和肾脏GLUT9、URAT1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),肾组织病理学明显改善。虎杖苷-桂皮醛中剂量组血清BUN水平显著降低(P<0.05)。结论:虎杖苷和桂皮醛单体配伍具有显著的降尿酸作用,其作用机制可能与抑制大鼠肝脏中ADA、XOD mRNA和XOD蛋白及肾脏中GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达有关。

肝细胞核因子1α通过调控葡萄糖转运蛋白2促进肾小管上皮细胞葡萄糖重吸收

目的:探究肝细胞核因子1α(HNF1α)通过葡萄糖转运蛋白(GLUT)调控肾脏葡萄糖重吸收的机制。方法:构建小鼠HNF1α表达载体,将重组质粒转染人胚肾HEK293T细胞和人肾小管上皮细胞HK2中过表达HNF1α,将HNF1α siRNA和GLUT2 siRNA转染入HEK293T细胞,采用流式细胞仪检测荧光葡萄糖类似物2-NBDG被细胞吸收的情况。采用Western印迹法检测HNF1α基因沉默后对GLUT2表达的影响。通过实时定量PCR检测HNF1α下游靶基因如GLUT2、钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)、胰岛素诱导基因1(INSIG1)等的mRNA水平,通过共聚焦免疫荧光检测GLUT2在肾上皮细胞的定位情况,使用荧光素酶报告基因和Western印迹法检测HNF1α对GLUT2的转录激活能力。通过凝胶迁移实验(EMSA)和染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测HNF1α与GLUT2的结合作用。结果:过表达HNF1α摄取2-NBDG的细胞比例明显高于对照组( P<0.01),HNF1α和GLUT2基因沉默后细胞对2-NBDG吸收作用减弱,HNF1α基因沉默后GLUT2表达减少。与对照组相比,过表达HNF1α使得肾脏包括GLUT2在内的有关糖转运基因表达水平上升( P<0.01)。过表达HNF1α显著增加GLUT2转录活性,干涉HNF1α可下调GLUT2转录活性。此外,HNF1α可与GLUT2的启动子直接结合。 结论:HNF1α通过直接结合GLUT2促进其表达,进而调节肾源细胞对葡萄糖重吸收作用。

C_1化学技术进展(上)

自1973年第一次石油危机以来,一些能源依靠进口的国家如日本、美国等,已逐渐强烈地意识到把自己的化学工业建立在单一的石油原料的基础上,是目光短浅的。一种深刻的危机感,促使他们去寻求新的化学工业的原料来源。在这种背景下,一度被冷落了的、以煤和生物质为起始原料的化学工业,又重新恢复了生机。

中药对痛风性关节炎炎症因子的影响的研究概述

中药通过调节体内白细胞介素、肿瘤坏死因子-α、血管细胞粘附分子-1、尿酸盐阴离子转运体1等痛风性关节炎炎症因子的含量,抑制炎症细胞的表达、合成及释放,或促进血尿酸排泄,降低血尿酸,改善痛风性关节炎,对痛风性疾病的预防和治疗起到积极作用,能弥补西药因不良反应所带来的用药局限性,二者相互配合,相得益彰。

基于URAT1蛋白表达研究小檗碱对高尿酸血症小鼠炎症反应及氧化应激的影响

目的 探索小檗碱对高尿酸血症小鼠炎症因子水平和氧化应激损伤的影响机制。方法 选取雄性SPF级昆明小鼠48只,分为对照组、模型组、苯溴马隆(20 mg/kg)组和小檗碱低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组,每组8只。除对照组ig等量蒸馏水外,其余各组采用ig氧嗪酸钾和次黄嘌呤药物建立高尿酸血症小鼠模型,造模后苯溴马隆组ip给予20mg/kg苯溴马隆,小檗碱低、中、高剂量组分别ig 50、100、200 mg/kg小檗碱,各组均连续给药1周。检测小鼠血清指标尿酸、肌酐(Cr)水平;ELISA法测定C反应蛋白(CRP)水平、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量;苏木素–伊红染色观察小鼠肾脏病理组织变化情况;Western blotting法检测肾脏尿酸转运蛋白URAT1在小鼠体内的表达水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠血清尿酸、Cr、CRP水平、MDA含量和URAT1蛋白表达均显著升高,SOD含量明显减少(P<0.01)。与模型组相比,苯溴马隆组和小檗碱50、100、200 mg/kg组小鼠血清尿酸、Cr、CRP水平、MDA含量和URAT1蛋白表达显著降低,SOD含量明显增加(P<0.05、0.01)。小鼠肾脏HE染色结果提示,与模型组相比,小檗碱50、100、200 mg/kg组肾脏病理性改变的程度均有所缓解。而小檗碱100、200 mg/kg组与苯溴马隆组比较无明显差异。结论小檗碱能降低高尿酸血症小鼠体内炎症水平,提高抗氧化能力。同时减轻高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,其机制与抑制URAT1表达相关。

不同药性成分对OAT4、URAT1抑制作用及对急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响

目的研究不同药性中药成分对尿酸重吸收转运体尿酸转运蛋白1(URAT1)和有机阴离子转运蛋白4(OAT4)的抑制作用及对急性高尿酸血症小鼠尿酸水平的影响。方法应用OAT4、URAT1过表达单克隆细胞株(MDCK-hOAT4、HEK293-hURAT1),检测各药性中药单体对OAT4、URAT1的抑制作用及半数抑制浓度(IC50);运用黄嘌呤联合氧嗪酸钾制备急性高尿酸血症小鼠模型,研究原儿茶酸、甘草素、异甘草素对急性高尿酸血症小鼠血清尿酸的影响。结果苦味药中的川陈皮素,甘味药中的甘草素、异甘草素、甘草查耳酮A对OAT4抑制作用较强,IC50分别是0.556、18.40、6.831、6.825μmol/L。酸味药中的原儿茶酸、甘味药中的甘草素对URAT1具有较强的抑制作用,IC50分别是7.709、14.540μmol/L。甘草素能显著降低急性高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,增加尿酸排泄量,降低血清肌酐、尿素氮的含量。结论川陈皮素、甘草素、异甘草素、甘草查耳酮A对OAT4具有较强的抑制作用,原儿茶酸、甘草素对URAT1具有较强抑制作用。甘草素能显著降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平,其作用机制可能是抑制OAT4、URAT1对尿酸的重吸收,并具有一定的肾脏保护作用。

基于调控尿酸转运蛋白的牛膝茎叶总皂苷治疗高尿酸血症肾病大鼠机制研究

目的:研究牛膝茎叶(SLAB)总皂苷对高尿酸血症(HUA)肾病大鼠尿酸转运蛋白的影响。方法:通过腺嘌呤(100mg/kg)合并乙胺丁醇(250mg/kg)建立大鼠HUA肾病模型。每天造模1h后,除空白组及模型组给等量溶媒,痛风舒组(600mg/kg)、别嘌醇组(42mg/kg)及SLAB低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg)灌胃给予相应药物。第23天给药后1h检测血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、尿素氮(BUN)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,肾匀浆液URAT1、OAT1和GLUT9水平,免疫组化法观察肾脏尿酸盐转运蛋白OAT1和GLUT9蛋白表达,HE染色法观察胸腺、脾脏、肾脏病理变化。结果:与模型组比较,SLAB高剂量组可降低血清UA、Cr、XOD、MCP-1和TNF-α水平(P<0.01,P<0.05),SLAB能降低肾脏URAT1、GLUT9水平,提高肾脏OAT1的表达,改善胸腺、脾脏和肾脏病理变化。结论:SLAB可有效降低大鼠HUA肾病模型的血清尿酸水平,其作用机制可能与抑制URAT1、GLUT9对UA的重吸收,促进OAT1分泌UA入尿有关。

痛风性关节炎急性发作期血尿下降的机制研究

目的目前外泌体与痛风性关节炎的相关性研究鲜有报道。文中旨在探索痛风性关节炎急性发作期血尿酸下降的机制。方法选取并收集2021年1月至2021年6月南京市第一医院风湿免疫科就诊的痛风患者和健康体检人员的临床资料和血清标本,并按照临床特则分为急性发作组、慢性缓解组、健康对照组。提取血清外泌体,利用Western blot、透射电镜、粒经分析对其进行鉴定,比较3组之间的差异。构建尿酸盐阴离子转运体1(URAT1)的表达载体,转染HEK293细胞,使得HEK293细胞稳定表达目的基因URAT1,并检测鉴定。将提取痛风患者的外泌体与过表达URAT1的HEK293细胞共培养,再加入高浓度尿酸共培养,检测尿酸浓度变化。结果①不同时期的血清外泌体浓度(×10^(6)Particles/mL):在痛风性关节炎急性发作期患者中最高(5.02±0.19),慢性缓解期稍高(4.17±0.64),正常人中最低(2.7±1.03),差异有统计学意义(P<0.01)。②稳定表达URAT1的HEK293细胞与外泌体共培养后,急性发作期组URAT1的表达较未加外泌体组明显下降(P<0.01),慢性缓解期略有下降(P<0.05)。③外泌体处理后的HEK293 URAT1^(+)细胞与高浓度尿酸共培养后,未加外泌体组细胞对尿酸的摄取率为(6.03±0.62)×10^(-4),加入慢性缓解组为(5.49±0.79)×10^(-4),加入急性发作组为(2.15±0.43)×10^(-4)。加入急性发作期外泌体的细胞对尿酸的摄取率明显下降(P<0.01)。结论痛风性关节炎患者血清外泌体浓度与疾病活动有关。外泌体可能通过作用于肾小管上皮细胞上的URAT1,抑制其对尿酸的重吸收,进而使肾排泄尿酸增加,最终使急性发作期患者血尿酸浓度下降。

新型降尿酸药物多替诺雷治疗高尿酸血症研究进展

高尿酸血症是一种常见的代谢性疾病,其发病率逐年上升。已上市的降尿酸药物均存在一定程度的安全性风险, 因此创新药物仍存在巨大的临床需求。近年来出现的新型降尿酸药多替诺雷(dotinarud), 是一种高效选择性尿酸盐转运体1(URAT1)抑制剂, 可通过抑制URAT1有效降低血尿酸水平。本文针对新型降尿酸药多替诺雷的作用机制、药理学、临床数据进行综述, 以便读者熟悉其临床应用价值。

猫须草水提物对痛风性肾病大鼠的肾脏保护作用

目的:探讨猫须草水提物对痛风性肾病大鼠的肾脏保护作用。方法:将60只雄性SD大鼠分为6组,即正常对照组、模型组、别嘌醇阳性对照组及猫须草水提物高、中、低剂量组。用腺嘌呤和酵母饲料造模的同时,分别给予相应药物灌胃。30 d后观察肾脏特征,计算肾指数(RI),检测大鼠血清尿酸(UA)水平、血清及肝脏黄嘌呤氧化酶(XO)水平,以Real⁃time PCR法测定大鼠肾脏URAT1、OAT1 mRNA表达,Western blot测定大鼠肾脏NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶⁃1(Caspase⁃1)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达。结果:与模型组比较,猫须草水提物各剂量组和别嘌醇组的肾指数降低,肾损伤均有所减轻。猫须草水提物高、中剂量组及别嘌醇组血清UA显著降低、血清及肝脏XO水平及URAT1 mRNA和NLRP3、ASC、Caspase⁃1、bFGF蛋白表达显著降低,OAT1 mRNA表达显著升高。结论:猫须草水提物的降尿酸作用可能与上调URAT1 mR⁃NA表达及下调OAT1 mRNA表达有关,其对痛风性肾病大鼠具有较好的肾脏保护作用,其机制可能与下调肾组织中NLRP3、ASC、Caspase⁃1,bFGF蛋白表达有关。

痛风康宁片对高尿酸血症的预防作用及机制研究

目的 采用多种实验模型评价痛风康宁片(TKT)对高尿酸血症的预防作用并研究其作用机制。方法 采用ig酵母膏联合ip氧嗪酸钾法制备大鼠高尿酸血症模型,酵母膏(20 g·kg^(-1))连续ig 7 d,且于ig酵母膏第5天开始给药,设置对照组、模型组和TKT低、中、高(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))组和苯溴马隆27 mg·kg^(-1)组,对照及模型组给予等容量0.5%CMC-Na,每天ig给药1次,给药第3天(即ig酵母膏第7天),ip注射氧嗪酸钾200 mg·kg^(-1)造模。检测注射氧嗪酸钾后2、4 h的血清尿酸浓度、尿量、尿液中尿酸排出量及肾脏中尿酸盐转运体1(URAT1)、有机阴离子转运体1(OAT1)、OAT3抗体表达,评价TKT对大鼠高尿酸血症的预防作用;采用次黄嘌呤诱导小鼠高尿酸血症模型,设置对照组、模型组和TKT低、中、高剂量(0.83、1.66、3.33 g·kg^(-1))组及苯溴马隆39 mg·kg^(-1)组,每天ig给药1次,连续给药5 d,对照及模型组给予等容量0.5%CMC-Na,检测血尿酸、尿酸酶及黄嘌呤氧化酶(XOD)含量,评价TKT对小鼠高尿酸血症的预防作用;采用大鼠水负荷模型,设置对照组和TKT低、中、高(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))组及氢氯噻嗪27 mg·kg^(-1)组,每天ig给药1次,连续给药3 d,对照组给予等容量0.5%CMC-Na,通过检测给药后1、2、3、4、5 h的尿量及给药后5 h内总尿量,评价TKT对大鼠的利尿作用。结果 与模型组比较,TKT(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))能明显降低大鼠血清尿酸浓度(P<0.05、0.01),明显增加尿酸排出量(P<0.05、0.01),明显增加肾脏OAT1的表达(P<0.05、0.01),1.15、2.30 g·kg^(-1)能明显减少肾脏URAT1的表达(P<0.05、 0.01);TKT (1.66、 3.33g·kg^(-1))能明显降低小鼠血清尿酸浓度(P<0.05、 0.01),TKT(0.83、1.66、3.33 g·kg^(-1))能明显增加尿酸酶含量(P<0.05、0.01);TKT(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))能明显增加给药后不同时间点的尿量(P<0.05、0.01),明显增加给药后5 h总尿量(P<0.05、0.01)。结论 TKT通过促进尿酸分泌、抑制尿酸重吸收及利尿作用,使血清尿酸浓度明显降低、尿尿酸排出量明显增加,显示对实验性高尿酸血症有明显的预防作用。

五苓散对高尿酸血症小鼠降尿酸及肾保护机制的研究(英文)

目的:研究五苓散对高尿酸血症小鼠降尿酸和肾保护作用并探索其可能的作用机制。方法:在氧嗪酸钾连续7天诱导小鼠产生高尿酸血症模型同时每天灌胃给予不同剂量五苓散(每组10只),并以别嘌呤醇作为阳性药对照。分别测定每组动物血清尿酸、肌酐及尿液尿酸、肌酐等水平并计算其尿酸排泄分数。采用RT-PCR和Westernblot方法分别测定小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体1(mURAT1)、葡萄糖转运体9(mGLUT9)、有机阴离子转运体1(mOAT1)、有机阳离子转运体1和2(mOCT1、mOCT2)及肉毒碱转运体2(mOCTN2)mRNA及蛋白表达水平。结果:与模型组比较,五苓散显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸与肌酐水平,促进尿酸和肌酐排泄,提高尿酸排泄分数,呈现出促进肾脏尿酸排泄与肾保护作用。五苓散显著下调高尿酸血症动物肾脏mURAT1、mGLUT9mRNA及蛋白表达水平,并上调mOAT1、mOCT1、mOCT2以及mOCTN2mRNA及蛋白表达水平。结论:这些结果表明五苓散可介导肾脏有机离子转运体表达以促进高尿酸血症和肾功能异常动物尿酸排泄并发挥其肾保护作用。