青藤碱对阿霉素诱导的局灶节段肾小球硬化大鼠足细胞损伤的干预作用及机制分析

目的探讨青藤碱对阿霉素诱导的局灶节段肾小球硬化大鼠的干预作用及其机制。方法采用单侧肾切除术加两次尾静脉注射阿霉素建立局灶节段肾小球硬化模型。将大鼠随机分为正常组,模型组,青藤碱低、中、高剂量组和FK506组,干预4周。检测24 h尿蛋白、血生化、肾组织病理,免疫组化检测肾组织Podocin和TRPC6,Western blot检测Nephrin、Podocin和TRPC6表达,电镜观察肾小球微观结构。结果与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白量明显升高(P<0.05),血白蛋白明显减少(P<0.05)。经青藤碱低、中、高剂量干预后,24 h尿蛋白量呈剂量依赖性降低,血白蛋白呈剂量依赖性升高,FK506组24 h尿蛋白量亦显著下降,血白蛋白显著升高(P<0.05)。免疫组化和Western blot提示模型组肾组织Podocin、Nephrin表达显著下降,TRPC6表达显著升高,经青藤碱低、中、高剂量干预后,Podocin、Nephrin呈剂量依赖性升高,TRPC6呈剂量依赖性下降,FK506组Podocin、Nephrin表达亦显著升高,TRPC6表达下降(P<0.05)。模型组电镜下肾小球足突广泛融合,经青藤碱或FK506干预后,足细胞融合减轻。结论青藤碱可能通过下调TRPC6表达对足细胞损伤进行修复,进而减轻肾组织病理改变。

常染色体显性局灶节段肾小球硬化一家系INF2基因及临床特征

目的分析1个常染色体显性局灶节段肾小球硬化(AD-FSGS)家系的临床特征及可能的致病基因。方法调查1个中国AD-FSGS家系,收集临床资料,绘制家系图谱,并对家系中所有成员进行尿液筛查,并留取其外周血,对其中尿液筛查异常的2个家庭7名成员进行ACTN4、TRPC6和INF2基因所有外显子,以及WT1基因外显子8和9直接测序。生物信息学初步分析突变位点对蛋白结构和功能的影响。结果该家系共有4代,27名成员,现有成员23名。发病者5例,女性3例,男性2例,平均发病年龄26.9岁。临床资料分析显示,该家系临床特点符合AD-FSGS诊断。7名成员中未发现ACTN4、TRPC6基因所有外显子和WT1基因外显子8、9有致病性突变,其中5例发病者INF2基因外显子8均有纯合缺失突变,缺失的碱基为CCCCACCCCCAC(c.1249delCCCCACCCCCAC,p.T420_P423del),缺失在外显子8第274～285位点,该位点突变既往未见报道。c.1249delCCCCACCCCCAC位于INF2表达分子invertedformin重要的Diaphanous抑制结构域(DID)编码区。结论 INF2基因外显子8上的杂合缺失突变可能是该家系AD-FSGS患者的致病原因,c.1249delCCCCACCCCCAC是引起AD-FSGS的一种新型突变。

槌果藤对局灶节段肾小球硬化鼠模型的治疗作用及作用机制的初步探讨

目的:探讨槌果藤对局灶节段肾小球硬化大鼠模型的治疗作用及作用机制。方法:通过左肾切除并阿霉素尾静脉注射的方法建立FSGS模型。按不同灌胃给药浓度将动物分为75g/L组(A组)、150g/L组(B组)、300g/L组(C组)、600g/L组(D组),另两组分别为安慰剂对照组(E组)和假手术组(F组)。造模后4周给药,疗程4周。各组动物于治疗前后均分别测定24h尿蛋白定量、血常规、肾功能、谷丙转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、胆固醇(TC)水平。治疗后取D、E、F组肾组织抽提总RNA,杂交高密度cDNA芯片并分析结果。结果:各槌果藤煎剂组治疗后24h尿蛋白水平均较治疗前显著下降,其中又以D组下降程度最为显著(P<0.05)。同时各治疗组治疗后血浆白蛋白均较治疗前有显著上升,血胆固醇、肌酐、尿素氮水平均较治疗前有显著降低,而各治疗组治疗前后血红蛋白、白细胞总数、血小板数和谷丙转氨酶水平均无统计学差异(P>0.05)。基因芯片检测结果显示与E组比较,D组有包括转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)受体、足细胞相关蛋白(Podocin)、纤维连接蛋白等与FSGS发生发展密切相关的基因表达具有统计学差异。结论:本实验中不同浓度的槌果藤煎剂对FSGS大鼠模型均有减少尿蛋白的作用,其中以600g/L组为最强。观察期内各组均未发现骨髓抑制、肝损害等副反应。槌果藤可能通过下调TNF-α受体、EGF受体、TGF-β1、PDGF、纤维连接蛋白、肾特异性膜蛋白、足细胞相关蛋白Podocin以及ILK的基因表达,上调锌指蛋白216以及硒蛋白的表达等起到免疫调节、抗氧化、抗纤维化作用,其确切作用机制需要进一步研究。

尿CD80在儿童微小病变肾病与局灶节段肾小球硬化中的研究

目的探析尿CD80检验在儿童微小病变肾病(MCD)与局灶节段肾小球硬化(FSGS)中的临床应用价值。方法选择2014年10月~2016年12月我院所收治的30例MCD患儿为本次研究的MCD组,选同期我院收治的30例FSGS患儿为本次研究的FSGS组,另选同期来我院体检的30例健康儿童为本次研究的对照组。对三组患儿尿CD80检验结果进行对比。结果在尿CD80水平上,观察组显著高于对照组(P<0.05),并且MCD发作期与缓解期患儿在尿CD80上差异有统计学意义(P<0.05),而MCD初治患儿及FSGS患儿比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论尿CD80在微小病变肾病与局灶节段肾小球硬化患儿体内的含量有较大差异,因此可作为两种疾病的鉴别方式。

CD44阳性肾小球壁层上皮细胞在早期预测局灶节段肾小球硬化中的价值

目的 探讨肾小球壁层上皮细胞(parietal epithelial cell,PEC)的活化和定位及在早期预测原发性局灶节段肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)中的意义。方法 收集18例原发性FSGS和54例微小病变肾病(minimal change disease,MCD)患者的临床资料,采用免疫组化EnVision法检测肾小球CD44^(+)PEC在肾小球的表达位置和阳性率。根据组织学形态和临床随访信息,评价CD44^(+)PEC在肾小球基膜(glomerular basement membrane,GBM)上皮侧表达的诊断价值。结果 18例(100%)原发性FSGS均可见CD44^(+)PEC局灶节段定位于GBM上皮侧。54例MCD中有3例(5.56%)可见CD44^(+)PEC局灶节段定位于GBM上皮侧,提示存在可疑的FSGS病变;对3例患者行PAS染色,镜下仍未见明显的FSGS病变;临床表现均为非激素敏感型肾病综合征,可能是由于病程、病理取材的局限性等原因不能除外FSGS。结论 CD44^(+) PEC局灶节段定位于GBM上皮侧,有助于诊断和早期预测FSGS。

Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用研究

目的探讨Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用。方法 8周龄雄性BALB/C小鼠分为正常对照组和模型组,各18只。模型组小鼠注射阿霉素(ADR,浓度2mg/m L,剂量10mg/kg鼠重)造模,正常对照组小鼠给予等量的生理盐水,于第4、8、12周每组各处死6只小鼠,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC),光镜观察肾脏组织病理学改变,免疫组织化学技术检测足细胞数量,RT-q PCR技术检测肾脏组织Kindlin-2、肾病蛋白(Nephrin)及Podocin m RNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组4、8、12周24h尿蛋白定量、血总胆固醇(TC)均增加[24h尿蛋白定量:(5.66±1.06)mg/24h比(1.72±0.62)mg/24h、(4.63±1.16)mg/24h比(1.77±0.63)mg/24h、(4.78±0.87)mg/24h比(1.69±0.49)mg/24h;血TC:(8.84±1.30)mmol/L比(2.01±0.49)mmol/L、(7.45±1.27)mmol/L比(2.06±0.49)mmol/L、(6.79±1.38)mmol/L比(2.10±0.54)mmol/L,P均<0.05];血ALB水平降低[(11.98±1.33)g/L比(22.27±1.41)g/L、(12.78±1.47)g/L比(22.65±1.49)g/L、(12.99±1.38)g/L比(23.31±1.49)g/L,P均<0.05];模型组第4周可见部分肾小球出现局灶、节段硬化,伴有足细胞肿胀;第8周部分肾小球出现球性硬化,伴有明显的足细胞增生和肥大;第12周弥漫性肾小球出现球形硬化。模型组足细胞数量随着时间的进展逐渐减少[(77.40±7.56)个/肾小球比(104.00±10.05)个/肾小球,(63.27±8.51)个/肾小球比(103.80±12.23)个/肾小球,(53.15±8.23)个/肾小球比(98.86±8.89)个/肾小球,P均<0.05]。模型组第4周开始Kindlin-2 m RNA水平明显上调[(1.14±0.06)、(1.13±0.08)、(1.45±0.10)比(0.82±0.07),P均<0.05],Podocin m RNA水平明显下调[(1.79±0.08)、(1.64±0.06)、(1.45±0.07)比(2.05±0.05),P均<0.05],第8周开始Nephrin m RNA水平明显下调[(1.42±0.13)、(1.17±0.11)比(2.06±0.20),P均<0.05]。Kindlin-2 m RNA水平与足细胞数量(r=-0.02,P<0.01)、Nephrin m RNA水平(r=-0.8,P<0.01)、Podocin m RNA水平(r=-0.9,P<0.01)呈显著负相关。结论 Kindlin-2可能通过介导足细胞损伤参与小鼠局灶节段肾小球硬化症的发病过程。

家族性局灶节段肾小球硬化症一家系临床与基因调查

目的:分析一个局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)家系的临床特征,并对已知致病基因进行筛查。方法:调查1个中国汉族人FSGS家系,筛查其中78名成员后对可疑成员进行仔细临床检查。采集家系中67名成员的外周血样抽提基因组DNA,采用PCR扩增先证者NPHS2,ACTN4和TRPC6基因的所有外显子,寻找突变的方法对已知的家族性FSGS致病基因进行筛查。结果:该家系共有4代,103名成员,遗传方式为常染色体显性遗传。78名被调查家系成员中有11例患者和3例疑似患者迟发起病,平均发病年龄35.9岁。两例患者经肾活检证实为FSGS,其余患者均有不同程度蛋白尿,部分伴镜下血尿。家系先证者基因组DNA进行PCR逐个外显子扩增测序,未发现NPHS2、ACTN4、TRPC6三个已知的致病基因存在突变,发现SNP7个。结论:本家系是已报道最大的一个中国汉族人FSGS家系,符合常染色体显性遗传迟发起病型,家系内患者间临床表现存在明显差异。已知基因NPHS2、ACTN4、TRPC6不是该家系的致病基因。

C3a、C5a在局灶节段肾小球硬化症小鼠发病中的作用

目的:探讨C3a、C5a在局灶节段肾小球硬化症发病中的作用。方法:雄性BALB/c小鼠分为正常对照组、野生型组、C3aR敲除组、C5aR敲除组,每组15只。野生型组、C3aR敲除组、C5aR敲除组小鼠一次性注射阿霉素(10 mg/kg)造模,正常对照组给予等体积的生理盐水,注射阿霉素后第0、1、4、8、12周观察小鼠一般状况,检测24 h尿蛋白和血清白蛋白、甘油三酯、胆固醇、肌酐。另取15只小鼠,于第4、8、12周每组处死5只小鼠,观察肾脏组织病理学变化。结果:与正常对照组比较,注射阿霉素4、8、12周后,模型小鼠24 h尿蛋白和血清甘油三酯、胆固醇、肌酐水平增加(P<0.05),而血清白蛋白水平下降(P<0.05);与野生型组比较,C3aR、C5aR敲除组各项指标明显改善(P<0.05)。C3aR、C5aR敲除组比野生型组小鼠肾脏组织病理学改变明显减轻。结论:C3a、C5a参与了局灶节段肾小球硬化症的发病过程。

血必净对局灶节段肾小球硬化大鼠转化生长因子-β_1表达影响

目的:探讨血必净对局灶节段肾小球硬化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,推测血必净缓解慢性肾功能不全(CRF)恶化的作用机理。方法:将60只大鼠随机平分为正常组(Ⅰ组)、模型组(Ⅱ组)、肝素组(Ⅲ组)、血必净高剂量治疗组(Ⅳ组)与血必净低剂量组(Ⅴ组)。采用局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型,模型制备采用小剂量分次阿霉素-间羟胺-高脂饲料法。观察24小时尿蛋白量、血肌酐(Scr)、尿素氮(Ccr)、肌酐清除率,肾血流,肾小球硬化指数(SI)以及免疫组化法观察TGF-β1在肾脏的表达及药物对其影响。结果:Ⅳ组尿蛋白含量、Scr、Bun明显降低,与Ⅱ组相比,差异显著(P<0.01);肾血流变化,Ⅳ组肾血流明显增加,SI明显降低,与Ⅱ组相比,差异显著(P<0.01);TGF-β1主要表达于肾小球内皮细胞、肾小管上皮细胞,Ⅳ组阳性表达率明显减少。结论:血必净可能通过下调TGF-β1的表达而减少肾小球细胞外基质的沉积。

补气活血益肾法治疗局灶节段肾小球硬化43例临床观察

目的：观察补气活血益肾法治疗局灶节段肾小球硬化(FSGS)的临床疗效。方法：对经正规激素治疗无效且经肾穿刺病理确诊的FSGS患者43例,采用补气活血益肾法(由黄芪、当归、川芎、桃仁、红花、赤芍、地龙、女贞子、旱莲草等组成)治疗,疗程为3月。主要观察临床疗效及治疗前后尿蛋白、24小时尿蛋白定量、血清白蛋白及胆固醇等指标的变化。结果：临床控制1例,显效22例,有效12例,无效8例,总有效率为81．40%。治疗后24小时尿蛋白定量、血清白蛋白及血脂均明显改善,与治疗前比较,差异均有非常显著性意义(P＜0．01)。结论：采用补气活血益肾法治疗FSGS疗效显著,并通过对蛋白尿、白蛋白、胆固醇的调节,延缓FSGS病程。

低浓度他克莫司联合激素治疗特发性局灶节段肾小球硬化的回顾性对照研究

目的:研究低浓度他克莫司(tacrolimus,TAC)联合糖皮质激素在特发性局灶节段肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)中的有效性和安全性。方法:回顾筛选特发性FSGS,尿蛋白定量>1 000 mg/24 h的41例患者为研究对象。根据治疗方案分为低浓度TAC组和激素组。将其中尿蛋白定量>2 000 mg/24 h的患者也按上述方法分为两组。收集分析治疗前及治疗第1,3,6,12,18,24个月的临床资料并记录不良反应。结果:在尿蛋白定量>1 000 mg/24 h的患者中,TAC组于治疗第1个月尿蛋白定量显著下降;激素组在治疗第3个月显著下降(P<0.05)。在治疗第18,24个月TAC组尿蛋白定量下降值均高于激素组,差异有统计学意义(P<0.05)。在尿蛋白定量>2 000 mg/24 h患者中,TAC组在治疗各时间点尿蛋白定量均下降,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);激素组在治疗第1,3,6个月尿蛋白定量显著下降(P<0.05),治疗第12至24个月与基线比较差异无统计学意义(P>0.05)。两种分组方法中,TAC组复发率均低于激素组(P<0.05);总缓解率和完全缓解率上差异均无统计学意义(P>0.05)。两组不良反应方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在特发性FSGS的治疗中,低浓度TAC联合激素的治疗方案对比单用激素显示出起效快、更强且持久稳定降尿蛋白的作用,是这类患者的更优选择。

利妥昔单抗治疗特发性局灶节段肾小球硬化的机制和疗效

局灶节段性肾小球硬化(FSGS)是导致终末期肾病的常见肾小球疾病,足细胞损伤是其发病的主要因素。特发性FSGS的足细胞损伤致病机制仍不详,除糖皮质激素、钙调神经蛋白抑制剂外,目前缺乏有效、特异的治疗方法,易复发,部分患者总体预后差。已有多个文献报道利妥昔单抗在特发性FSGS中有效。作为一种B细胞耗竭剂,利妥昔单抗如何在特发性FSGS患者发挥作用,其免疫学药效和细胞保护作用机制仍在研究和观察中。本文将从利妥昔单抗的药物特点出发,复习近年来主要的临床研究和足细胞损伤治疗领域的主要相关研究报道,就利妥昔单抗治疗特发性FSGS的免疫机制和足细胞保护机制作一综述。

局灶节段肾小球硬化研究进展

局灶节段型肾小球硬化(FSGS)是导致终末期肾病(ESRD)的重要病因,FSGS是一种组织学模式,它可能有六种不同潜在病因,但相似的都是足细胞损伤和耗竭。

利妥昔单抗治疗局灶节段性肾小球硬化患者的药学监护

目的报道1例73岁具有潜伏性结核合并乙肝核心抗体阳性患者,因消化道溃疡存在激素使用禁忌,联合环孢素和利妥昔单抗治疗局灶节段性肾小球硬化(FSGS)的治疗过程和药学监护要点,为临床提供参考。方法临床药师参与免疫抑制治疗与感染预防、肾病综合征并发症治疗方案的制定并进行药学监护。结果患者肾病综合征缓解,其中尿蛋白由约8 g降至1 g以下,疾病控制良好。结论利妥昔单抗联合环孢素能使患者肾病综合征部分缓解甚至接近完全缓解。对于合并潜伏性结核、乙肝核心抗体阳性患者,使用单抗类生物制剂等免疫抑制剂应注意预防感染。当肾病综合征患者合并用药多时,使用环孢素应注意药物相互作用和监测血药浓度,治疗期间定期随访患者,警惕肾功能不全、感染等不良反应。临床药师参与临床诊疗过程,对保证疾病治疗效果以及用药安全具有重要意义。

原发性局灶节段性肾小球硬化的中西医诊断与治疗

局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)是肾小球疾病的一种病理类型,其病理特征为局灶性和节段性肾小球硬化改变,其发病机制复杂、临床表现多样,是临床公认的一种难治性肾脏疾病。FSGS在1957年由Rich首先描述,是儿童和成人肾病综合征中较为常见的肾小球疾病,患者的性别男女之比为2∶1,我国原发性FSGS患者占原发性肾小球疾病的10.5%^([1]),约20%的患者最终会进展至终末期肾病(ESRD)。

NPHS1基因突变致儿童局灶性节段性肾小球硬化1例报告并文献复习

目的:通过总结1例局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS)患儿NPHS1基因突变的临床资料,提高对NPHS1突变表型的认识,探讨NPHS1基因突变与FSGS的关系。方法:收集1例FSGS患儿的病史、实验室检查及家族史。应用外显子检测(NGS)对儿童及其父母进行全外显子高通量测序。同时进行生物信息学分析。采用双脱氧链末端合成终止法测序对高通量测序结果进行验证,并进行相关文献复习。结果:患儿,女,7岁,6岁起病,确诊为肾病综合征,应用糖皮质激素尿蛋白一直未转阴,肾脏穿刺病理结果提示FSGS。家族史,患儿父亲患有肾病综合征,病理诊断为膜性肾病。测序结果NPHS1基因有c.803G > A错义突变(由父亲携带),和c.1339G > A、c.1802G > C错义突变(由母亲携带)。Mutationtaster软件预测的c.1339G > A、c.1802G > C为有害突变,c.803G > A突变存在多态性。c.1339G > A和c.1802G > C是NPHS1上由母亲携带的致病性突变,而c.803G > A突变目前未见报道。结论:NPHS1突变可引起儿童FSGS。突变c.803G > A可能是亚洲儿童新发突变,此突变进一步丰富了NPHS1基因谱。

以局灶节段硬化性肾小球肾炎为病理特点的Donnai-Barrow综合征1例并文献复习

目的探讨儿童Donnai-Barrow综合征(Donnai Barrow syndrome,DBS)患者的临床特点及病理类型。方法回顾性分析2022年4月就诊于宁夏医科大学总医院儿科的1例Donnai-Barrow综合征患儿的临床资料,并分别以“Donnai Barrow”、“FOAR”为检索词检索中国知网、万方数据库、PubMed数据库自建库至2022年5月的相关文献。结合本病例及其他已报道的受累者,总结DBS的临床特点、诊疗经过及可能预后。结果患儿,女,13岁11月,因“发现蛋白尿13年余”就诊于宁夏医科大学总医院儿科,完善基因检测后确诊为DBS,结合肾活检病理结果诊断为“慢性肾小球肾炎局灶节段硬化性肾小球肾炎(NOS型)”。总结目前已报道的74例DBS患者中有36.49%的受累者存在蛋白尿,其中3例完善肾脏穿刺后病理结果提示肾小球硬化。结论绝大多数DBS患者主要肾脏异常表现为蛋白尿,尽早完善肾穿刺活检对于明确DBS肾脏损害性质,提早预防肾衰竭、避免相关并发症具有指导意义。

IgA肾病与局灶节段性肾小球硬化的临床特点比较

目的:探讨IgA肾病(IgAN)与局灶节段性肾小球硬化(FSGS)的临床特点。方法:选取2018年6月—2023年7月于北海市第二人民医院及医联体单位治疗的134例肾病患者为研究对象,将其中IgAN 98例作为IgAN组,FSGS36例作为FSGS组。所有患者均行常规检测24h尿蛋白、血清白蛋白、血尿酸、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL)。比较两组患者的各项临床指标,了解两种疾病的临床差异。结果:两组患者的年龄、病程、高血压和肾功能异常的发病率比较,差异无统计学意义(P>0.05);FSGS组患者的男性占比及肾病综合征的发病率均高于IgAN组患者,差异有统计学意义(P<0.01)。FSGS组患者的IgG降低及IgM升高的发生率均高于IgAN组患者,差异有统计学意义(P<0.01);两组病例的IgA、C3补体和C4补体比较,差异无统计学意义(P>0.05)。FSGS组患者的尿蛋白及尿酸均高于IgAN组患者,血白蛋白低于IgAN组,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者的肌酐比较,差异无统计学意义(P>0.05)。FSGS组患者的TC、LDL、TG和HDL均高于IgAN组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。男性IgG降低占比高于女性,尿蛋白、尿酸、TC、LDL均高于女性,差异均有统计学意义(P<0.05);男性与女性患者IgM升高的比率、肾病综合征发病率及血清白蛋白水平、TG水平和HDL水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:FSGS患者的男性占比、肾病综合征的发病率均高于IgAN患者,两组患者高血压和肾功能异常的发病率无显著差异,男性患者的临床症状比女性患者更严重。