目的建立测定人血浆中枸橼酸浓度的HPLC方法,探讨连续性肾脏替代疗法(CRRT)患者行局部枸橼酸钠抗凝(RCA)中滤器前、滤器后和滤过液血浆中枸橼酸浓度相关性。方法血浆样品用甲醇沉淀蛋白,测定枸橼酸的条件:色谱柱为Eclipse Plus C18柱(25...目的建立测定人血浆中枸橼酸浓度的HPLC方法,探讨连续性肾脏替代疗法(CRRT)患者行局部枸橼酸钠抗凝(RCA)中滤器前、滤器后和滤过液血浆中枸橼酸浓度相关性。方法血浆样品用甲醇沉淀蛋白,测定枸橼酸的条件:色谱柱为Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸水溶液-甲醇(98∶2);柱温:35℃;进样体积:20μL;体积流量:0.6 mL·min^(-1);检测波长:215 nm。采用建立的HPLC方法对40例使用RCA的CRRT患者的滤器前、滤器后和滤过液血浆中的枸橼酸浓度进行测定。采用Pearson相关性分析对滤器前、滤器后和滤过液血浆中枸橼酸浓度进行相关性分析,记录每位患者枸橼酸泵速,观察滤器的凝血程度,根据血液净化治疗后透析器和管路的凝血情况进行分级。结果建立的HPLC方法检测血浆中枸橼酸浓度的专属性良好,基质效应为90.25%~101.23%,回收率在89.90%~97.00%,日内精密度RSD在2.60%~8.94%,日间精密度RSD在2.48%~7.31%,样品在室温下放置0、12、24 h及4℃下放置1、2、3、4周,稳定性均良好。滤器前血浆枸橼酸浓度为(2.93±0.97)mmol·L^(-1),滤器后血浆枸橼酸浓度为(2.42±0.77)mmol·L^(-1),滤过液血浆中枸橼酸浓度为(2.89±0.81)mmol·L^(-1);滤过液血浆中枸橼酸浓度与滤器前、滤器后血浆枸橼酸浓度的Pearson相关系数分别为0.672(P=0.00)、0.734(P=0.00)。40例患者滤器凝血情况:0~1级32例,2级7例,3级1例。结论建立的HPLC分析方法符合生物样品含量测定要求,可用于血浆中枸橼酸的浓度检测。在RCA应用于CRRT患者时,滤过液血浆枸橼酸浓度可代替滤器后血浆枸橼酸浓度评价滤器抗凝效果,减少反复检测导致的诊断性失血。展开更多