复合层析柱净化-气相色谱-负化学源质谱法测定海洋沉积物中多溴联苯醚

采用去活硅胶-酸化硅胶-去活硅胶-弗罗里硅土-无水硫酸钠填装的复合层析柱,结合气相色谱-负化学源质谱法(GC-NCI/MS)对海洋沉积物样品中的13种多溴联苯醚(PBDEs)进行分析检测。样品用正己烷-二氯甲烷(3∶1,v/v)混合溶剂进行超声提取,提取液经复合层析柱净化及正己烷-二氯甲烷(3∶1,v/v)混合溶剂洗脱后,利用GC-NCI/MS的选择离子监测(SIM)模式分析测定13种PBDEs。对比分析了复合层析柱中不同填料、不同洗脱剂以及不同洗脱体积对PBDEs净化效果的影响,并对GC-NCI/MS分析条件进行优化处理。最终13种PBDEs在0.1~20μg/L内线性关系良好,相关系数(r^(2))>0.995(BED-209,r^(2)>0.99),定量限(S/N=10)为0.002~0.126μg/kg。以海洋沉积物样品为基质,13种PBDEs在0.2、1.0、4.0μg/kg 3个加标水平下的平均回收率分别为85.3%~101.3%、84.8%~113.6%、86.3%~94.7%,相对标准偏差分别为4.4%~14.0%、0.4%~4.9%、1.9%~6.6%。结果表明,该方法的灵敏度和准确度高,精密度良好。应用本方法对所采集的海洋沉积物样品进行分析检测,结果显示13种PBDEs均有不同程度的检出,其中BDE-209含量较高,最高达60.49μg/kg。实际样品检测结果表明本方法适用于海洋沉积物样品中PBDEs的准确定性定量分析。

硅胶-氧化铝层析柱-气相色谱法测定沉积物中邻苯二甲酸酯类有机物

建立了硅胶-氧化铝层析柱净化分离,GC-MS、GC-FID定性定量分析沉积物样品邻苯二甲酸酯类有机污染物Phthalate esters(PAEs)的方法.比较了Florisil、硅胶、氧化铝和硅胶-氧化铝层析柱对PAEs分离特征;优化了硅胶-氧化铝层析柱净化分离PAEs的条件.方法线性范围0.05～500 μg/g,回收率75.3%～113.6%,相对标准偏差2.74%～12.2%,检出限0.29～1.2 ng/g.内标法定量,应用于珠江口沉积物样品中PAEs测定,获得满意的结果.

紫杉醇在常压反相层析柱上的纯化

在C18-硅胶柱上常压反相层析法对从云南红豆杉浸膏中初分离的紫杉醇进行了纯化精制。对C18-硅胶层析纯化紫杉醇的操作条件进行了优化，并对层析进料量及紫杉醇回收率的有效提高进行了研究。采用本工艺分离精制紫杉醇粗品，可使紫杉醇含量从25%左右提高到98%以上，回收率大于85%。

用Percoll试剂和DEAE-纤维素层析柱分离纯化鳝锥虫

用51%的Percoll分离液和DEAE-纤维素层析柱,从自然感染的黄鳝(Monopterus albusZuiew)中分离鳝锥虫(Trypanosoma monopteriChen et Hsieh,1964)。对含虫血液样品分别以2.1×103r/min、2.5×103r/min、2.9×103r/min、3.3×103r/min、3.6×103r/min离心5、10、15、20min,观察红细胞的去除和鳝锥虫存留百分数,结果表明:2.9×103r/min离心15min分离效果最佳。离心分离的混悬液含有锥虫、白细胞、血栓细胞和极少的红细胞,悬混液再经DEAE-纤维素过柱,得到纯净的鳝锥虫。过柱后光学显微镜观察,锥虫形态正常,运动活泼,无血细胞。本方法具有耗时短、回收率高的特点,是把梯度分离和离子交换结合在一起的一种快速有效方法,为鳝锥虫的进一步研究奠定了基础。另外,此方法还可以作为快速、准确检测自然状态下黄鳝是否感染锥虫的手段,为鳝锥虫的流行病学研究提供可靠的数据。

麦芽凝聚素层析柱纯化的肺癌相关抗原

目的纯化并分析肺癌相关抗原的有关特性。方法采用商品化麦芽凝聚素 Wheatgerm L ectin- Sepharose- 6 MB层析柱和自制抗人肺癌单克隆抗体 N- 35 - Sepharose- 4B层析柱纯化肿瘤相关抗原 ,比较纯化结果 ;用免疫印技术测定肺癌相关抗原在肺癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌细胞及正常人心脏及肺组织的存在及分布情况 ;用差速离心技术分析肺癌相关抗原在亚细胞结构的布状况 ;用免疫荧光技术探测肺癌相关抗原在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位。结果经麦芽凝聚素纯化的肺癌相关抗原 N35以不同分子量形式存在于肺癌、肝癌、宫颈癌及乳腺癌细胞的蛋白组分中 ,在正常人心脏及肺组织中无表达 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ,并定位于肿瘤细胞有丝分裂中期 (methaphase)的中心粒 (centriole)结构上。结论肺癌相关抗原 N35是一种重要的肿瘤相关抗原 ,其功能很可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关。麦芽凝集素亲和层析法是纯化肺癌相关蛋白 N35简便有效的途径。

用葡聚糖凝胶G-75层析柱制备高纯度细胞色素C

选择２ｍｏｌ／Ｌ硫酸在ｐＨ为４．０、温度为２５℃的条件下进行抽提，提取液经人造沸石吸附，２５％硫酸铵洗脱，然后加入固体硫酸铵盐析除去杂蛋白，最后加入２０％三氯乙酸沉淀，获得粗品，再采用２２６型弱酸性阳离子树脂和葡聚糖凝胶Ｇ－７５层析柱组合的新方法，制得了Ａ５５０ｒｅｄ／Ａ２８０为１．２８的高纯度细胞色素Ｃ。

硅胶层析柱分离红桔油中的萜烯与含氧化合物

以冷榨红桔油为研究对象,采用硅胶柱层析法对红桔油中的挥发性组分进行分离,分离所得组分采用气相色谱-质谱联用仪进行分析鉴定。结果表明,正戊烷洗脱液中的主要挥发性成分(相对质量分数)为d-苧烯(90.56%)、月桂烯(3.50%)、α-蒎烯(1.64%)、邻-伞花烃(1.49%)、β-水芹烯(1.13%)等,均为萜烯类化合物;乙醚洗脱液中的主要成分为芳樟醇(9.34%)、顺式-氧化柠檬烯(6.92%)、8-对-薄荷烯-1,2-二醇(6.34%)、反式-氧化柠檬烯(5.59%)、癸醛(4.78%)、N-邻氨基苯甲酸甲酯(4.10%)、辛醛(3.82%)等,均为含氧化合物。红桔油中的萜烯与含氧化合物组分得到了有效分离。

快速溶剂萃取-层析柱净化-气相色谱质谱法测定土壤中对苯二甲酸二(2-乙基己基)酯含量

以快速溶剂萃取-层析柱净化-气相色谱质谱法测定土壤中对苯二甲酸二(2-乙基己基)酯的含量。风干土壤样品经ASE-350快速溶剂萃取仪萃取,萃取液用层析柱净化,旋转蒸发仪蒸干,氮吹仪浓缩后,用全扫描(SCAN)采集气相色谱-质谱法分析测定土壤中的对苯二甲酸二(2-乙基己基)酯含量。该方法检出限为0.03 mg/kg,加标回收率为75.0%~116.0%,相对标准偏差为0.55%~6.55%(n=6)。该方法具有萃取效果好、灵敏度高、重现性好、前处理操作简便及净化效果好等优点,可用于测定土壤中对苯二甲酸二(2-乙基己基)酯的含量。

微型层析柱净化毛细管气相色谱法同时测定水果蔬菜中11种拟除虫菊酯残留量

微型层析柱净化毛细管气相色谱法同时测定水果蔬菜中１１种拟除虫菊酯残留量庞国芳，范春林，曹彦忠，赵铁生（秦皇岛商检局）（秦皇岛卫生检疫局）合成拟除虫菊酯与天然除虫菊酯相比较，它具有更大的广谱性和更强的杀虫作用，同时保留了低毒性的特点。近年来，世界各国对...

硅藻土层析柱净化效果的探讨

在色谱分析中,样品提取液的净化处理非常重要,含有大量有机物质的食品的色谱分析更是如此.净化处理搞不好,不但杂峰多,“良莠”难分,而且还会污染柱子及检测器.因此,色谱分析工作者常常为寻找一种净化效果好、耗时短、操作简单、成本低的柱净化系统而努力.目前尚未见到单纯用硅藻土作为净化层析柱填料的报道.1996年,我们对硅藻土层析柱的净化效果进行探讨,获得令人满意的结果.

用于复杂基质中多农药残留分析的层析柱及其应用方法

公开号：CN104614472A 公开日：2015．05．

混装层析柱净化效果的探讨

混装层析柱净化效果的探讨于国胜青岛市卫生防疫站（青岛２６６００３）国内外传统的净化层析柱大都分段“层装”。本文作者采用“混装”，经过实验，发现后者的净化效果要优于前者，得到了令人满意的结果。其回收率分别达到８９．７％～９５．７％。１实验与方法１．１原...

糖化血红蛋白分析仪层析柱反向安装的应用价值

目的探讨糖化血红蛋白分析仪层析柱反向安装的应用价值。方法反向安装层析柱后,采用低值和高值的校准品进行精密度和准确度试验,并进行相关的统计学分析。结果反向安装层析柱后,仪器故障警报消除;精密度、准确度高。结论超期使用层析柱导致仪器故障,可通过反向安装层析柱,延长层析柱的使用寿命。

不同直径层析柱纯化人凝血因子Ⅷ效果的比较

目的通过比较RJ300型和GE450型层析柱对人凝血因子Ⅷ(human coagulation factorⅧ,FⅧ)的纯化效果,探究GE450型层析柱纯化FⅧ的适用性。方法分别采用2种层析柱各制备3批FⅧ制品,按照中国药典2020年版三部的要求对制品进行检测,比较2种层析柱制备的FⅧ原液的回收率、比活性、洗脱峰的峰形差异、杂蛋白去除效果以及成品的检定结果,并进行产品稳定性考察。结果RJ300型和GE450型层析柱纯化后的FⅧ原液回收率分别为(63.8±4.8)%和(61.0±4.3)%,相对标准偏差分别为7.5%和7.0%,原液比活性分别为(100.7±5.8)和(114.0±12.2)国际单位(international unit,IU)/mg,2种层析柱洗脱峰的峰形差异无统计学意义(F=0.42,P>0.05),2种层析柱均能有效去除杂蛋白,成品检定结果均合格,成品比活性分别为(38.6±5.5)IU/mg和(39.4±6.2)IU/mg。2种层析柱制备的FⅧ的稳定性研究结果均符合中国药典规定。结论GE450型层析柱能实现较好的FⅧ纯化效果,成品安全有效、稳定性良好,适合商业规模化生产。

电导法测定Sepharose 4FF凝胶层析柱柱效方法的验证

目的以氯化钠溶液为样品和洗脱液,对电导法测定Sepharose 4FF凝胶层析柱柱效方法进行验证,确定该方法测定柱效的最优条件。方法设计四因素三水平正交实验对电导法测定Sepharose 4FF凝胶层析柱柱效方法进行验证,考察不同样品体积、流速、样品浓度和洗脱液浓度对Sepharose 4FF凝胶层析柱柱效和对称性的影响。依据正交实验结果确定电导法测定柱效的最优条件并进行验证。结果9次实验测得柱效均>2800 N/m、对称性为1.020~1.160。通过单因素方差分析,样品体积对柱效的影响无统计学意义(P=0.123,P>0.05),对对称性的影响无统计学意义(P=0.735,P>0.05);流速对柱效的影响无统计学意义(P=0.600,P>0.05),对对称性的影响有统计学意义(P=0.032,P<0.05);样品浓度对柱效的影响无统计学意义(P=0.319,P>0.05),对对称性的影响无统计学意义(P=0.824,P>0.05);洗脱液浓度对柱效的影响无统计学意义(P=0.930,P>0.05),对对称性的影响无统计学意义(P=0.596,P>0.05)。通过极差分析,确定测定柱效的最优条件为:样品体积为600 mL、样品浓度为1.0 mol/L、洗脱液浓度为0.2 mol/L、流速为20 cm/h;重复性和耐用性考察中柱效RSD均<5%,对称性RSD均<5%。将丙酮对照实验结果和重复性实验结果进行t检验,柱效和对称性结果均无统计学意义(P均>0.05)。结论电导法可用于测定Sepharose 4FF凝胶层析柱柱效,确定的最优条件重复性、耐用性良好,可准确、真实地评估Sepharose 4FF凝胶层析柱的性能。

蛋白质层析柱复性及工艺评价

蛋白质复性工艺的研究一直是重组蛋白药物研发领域的热点。稀释复性法和透析复性法的蛋白损失较大、复性得率不理想,而层析柱可以完成复性同时纯化,并能在高蛋白浓度条件下得到较高的复性率,有利于规模放大,是近年来最受关注的复性工艺。就层析柱复性工艺进行了归纳,包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析、疏水相互作用层析的复性,并对其复性原理及各自的优缺点进行了比较分析,最后从复性工艺的有效性、优越性以及对于规模化生产的适用性三个角度论述复性工艺的评价方法。

活性白土柱层析法分离提纯姜黄素

分别用乙醇、乙酸乙酯、丙酮提取姜黄粉中的姜黄素,通过正交实验确定最佳提取溶剂为丙酮.采取逆向思维,将活性白土用于姜黄色素脱油脂进行提纯,并建立了高效液相色谱外标法用于分析姜黄素的含量.实验表明:用丙酮提取的,提取率最高,可达94.57%.丙酮提取液流经活性白土层析柱后,测得活性白土对姜黄素的吸附容量为7.34%,分别采用碱性水、碱性乙醇、碱性丙酮洗脱被吸附的姜黄素.通过单因素实验确定最佳吸附和洗脱条件.最终可得到高纯度、不吸潮的精制姜黄素产品.实验结果显示,色素的产率为2.36%,产品纯度为94.29%,色素总收率达80.71%.

精甲霜灵柱层析净化淋洗液的改进研究(英文)

精甲霜灵为外消旋物甲霜灵的R型对映体,其在农产品中的残留分析方法中多采用活性等级Ⅴ的酸性氧化铝填充柱并用正己烷与乙醚的混合淋洗液淋洗净化。但由于乙醚有较强刺激性,对实验人员危害较大。经试验,改用正已烷:二氯甲烷(1∶1)的混合淋洗液淋洗,其添加回收率可达95.39%,标准分离值为4.10,变异系数为4.30%,经SA S系统方差分析两者间无差异。精甲霜灵与其荔枝果肉添加样品中的杂质峰最小分离度R为1.668,与相邻组分能完全分离。

离子交换层析分离纯化人α1-抗胰蛋白酶

目的建立一种新的用离子交换层析从Cohn组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)制剂的工艺。方法以Cohn组分Ⅳ为原料,用12倍体积20mmol/L Tris-HCl缓冲液溶解后,加入2.5%气相二氧化硅搅拌吸附脂蛋白等杂质。抽提液经离心收集上清,再用0.45μm滤膜过滤。将滤液上样于CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析柱,收集未吸附的流穿蛋白液。再将收集的流穿液上样于Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱,上样及平衡液清洗后,用含60mmol NaCl的缓冲液洗涤杂蛋白,再用含100mmol/L NaCl的缓冲液洗脱,收集洗脱液。

柱层析净化-气相色谱/电子捕获检测器测定网布中的溴氰菊酯

建立了柱层析净化-气相色谱／电子捕获检测器测定网布中溴氰菊酯含量的方法。样品用丙酮萃取，再经过中性氧化铝层析柱净化后用气相色谱／电子捕获检测器测定。溴氰菊酯在0．1-20mg／L范围内线性良好，相关系数为0．9999，样品添加量为48．5-55．4mg／m^2时回收率为93．5％-103．6％，相对标准偏差小于3％，检出限为0．032mg／m^2。