层粘素LN及其受体LN-R在胆管癌淋巴结转移中的作用

目的：探讨人胆管癌细胞中ＬＮ和ＬＮ—Ｒ的表达水平与胆管癌转移的关系。方法：应用 Ｓ—Ｐ免疫组化法 对５２例人胆管癌细胞中ＬＮ和 ＬＮ－Ｒ的表达水平进行研究。结果：ＬＮ及 ＬＮ－Ｒ高表达与胆管癌淋巴结转移至明显 相关， ＬＮ及 ＬＮ—Ｒ阳性肿瘤淋巴结转移率（８３％，５５％）明显高于ＬＮ—Ｒ阴性肿瘤（１５％，２０％，Ｐ＜０．０５），且ＬＮ及 ＬＮ—Ｒ 的表达与胆管癌组织学类型、分化程度亦存在明显相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＬＮ及ＬＮ—Ｒ的表达在胆管癌淋巴结转移中 的关系起联合作用。

层粘素在胆管癌细胞浸润过程中的作用

通过观察外源性层粘素（ＬＮ）对一株新近建立的胆管癌细胞系ＱＢＣ９３９分泌Ⅳ型胶原酶及体外浸润能力的影响，旨在探讨胆管癌细胞浸润过程中的生物学机理，特别是ＬＮ及Ⅳ型胶原酶在浸润中的作用和意义。结果表明，不同剂量的ＬＮ均明显刺激ＱＢＣ９３９细胞分泌Ⅳ型胶原酶，且５μｇ／ｍｌ剂量的ＬＮ即能显著增强ＱＢＣ９３９细胞的体外浸润能力。与ＬＮ同时加入ＬＮ抗体，显示不同剂量的ＬＮ抗体能不同程度地抑制ＬＮ对ＱＢＣ９３９细胞Ⅳ型胶原酶分泌的刺激效应，并抑制ＬＮ增加ＱＢＣ９３９细胞体外浸润能力的作用。研究结果显示，ＬＮ通过刺激癌细胞分泌Ⅳ型胶原酶，增强癌细胞浸润能力，在介导肿瘤细胞的浸润过程中发挥重要作用。Ⅳ型胶原酶在胆管癌浸润过程中起重要作用，其活性高低与癌细胞浸润能力相关，是分解细胞外基质的主要蛋白水解酶之一。研究结果不仅有助于癌浸润和转移机制的研究，同时也提示在未来抗肿瘤治疗中，干扰ＬＮ介导过程或抑制Ⅳ型胶原酶活性，有可能获得显著效果。

外源性层粘素P11片段对胆管癌细胞浸润能力的影响

目的：探讨层粘素 Ｐ１１ 活性片段对胆管癌细胞浸润过程的影响及可行的抗浸润治疗途径。方法：以层粘素 Ｐ１１ 片段处理 Ｑ Ｂ Ｃ９３９ 胆管癌细胞，观察胆管癌细胞分泌Ⅳ型胶原酶、尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活物的变化，并利用人羊膜浸润培养系统观察胆管癌细胞浸润能力的改变。结果：与层粘素整体分子相反，层粘素 Ｐ１１ 片段能够显著抑制胆管癌细胞分泌Ⅳ型胶原酶和体外浸润能力，但对尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活物的分泌无明显影响。结论：层粘素可能通过胆管癌细胞膜细胞表面 Ｌ Ｎ 受体刺激Ⅳ型胶原酶分泌，介导胆管癌细胞浸润和转移过程。而浸润和转移过程中另一重要蛋白酶尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活物的分泌调节，可能通过其它途径实现。研究阻断层粘素与层粘素受体结合的治疗方法，可能在未来临床防治肿瘤浸润和转移治疗中具有光明前景。

层粘素和纤粘素在胃癌中的分布

采用层粘素（ＬＮ）多抗和纤粘素（ＦＮ）多抗检测７６例胃癌。证实癌细胞分化程度越低和局部浸润能力越强，造成的基底膜（ＢＭ）缺损越严重。证明反应性间质增生与癌肿的浸润转移趋势有关。癌细胞穿透基底膜进入间质，引起间质反应性增生，后者可促进癌细胞的浸润和转移。

肝病患者血清甘胆酸、透明质酸、层粘素、β_2-微球蛋白和铁蛋白检测140例分析

目的：对１４０例肝病患者血清进行联合检测。方法：用放免法分组联合检测肝病患者血清甘胆酸（ＣＧ）、透明质酸（ＨＡ）、层粘素（ＬＮ）、β２微球蛋白（β２ＭＧ）和铁蛋白（Ｆｅ）值。结果：ＣＧ和β２ＭＧ在ＬＣ组比其它各组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；ＨＡ和ＬＮ在ＣＡＨ、ＬＣ和ＨＣＣ组比其它各组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；ＨＡ和ＬＮ在ＣＡＨ、ＬＣ和ＨＣＣ组比其它各组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；Ｆｅ在ＨＣＣ组比其它各组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：该方法对肝病的早期诊断。

纤维连接蛋白和层粘素对表皮角质细胞的影响

调查FN、LM对EKC的粘附及迁移功能的影响。结果显示.FN促进EKC的迁移活动.增进EKC的粘附值。EKC在FN的介导下有助于加速创面重上皮化的修复过程:LM有增进EKC的粘附能力.抑制EKC的迁移,还能以浓度依赖方式减少FN介导的EKC迁移活动。在创面愈合中、后期,即基膜重建过程中.使EKC脱离FN等促进细胞功能活化的基质蛋白接触.恢复EKC生物学功能静止状态及EKC对基膜的稳定性有重要意义。

层粘素受体显像

层粘素（亦称层粘连蛋白）在恶性肿瘤的浸润和转移中起着重要的作用，恶性细胞表面有大量的层粘素受体，而且能更多、更快地与层粘素结合。人工合成的层粘素五肽酪氨酰－异亮氨酰－甘氨酰－丝氨酰－精氨酸（ＹＩＧＳＲ）肽能够与肿瘤相关的高亲和性层粘素受体结合放射性核素标记ＹＩＧＳＲ是一种很有发展潜力的、能够估计活体内肿瘤细胞转移潜能的、具有受体特异性的放射性药物。

急慢性肝病患者血清C_3氨基端肽和层粘素水平与肝脏病理学改变的对比研究

目的:探讨急慢性肝病患者肝组织损害与血清C_3氨基端肽(P(?)P)和层粘素(LN)水平的关系。方法:采用放射免疫法测定了110例急、慢性乙型肝炎患者的血清P(?)P和LN水平,并与肝组织病理损害程度进行对比分析。结果:急性组和慢性轻度组与正常对照组比较其血清P(?)P和LN水平无显著性差异(P>0.05),而慢性中度、重度和肝硬变组与正常对照组、急性组和慢性轻度组比较差异显著(P<0.05或0.01);并且,慢性肝病肝纤维化程度越重其血清P(?)P和LN水平也明显升高(P<0.05或0.01)。此外,血清P(?)P、LN与胆红素(TBil)水平呈正相关((P<0.05或0.05).与白蛋白(A)、白/球比值(A/G)和凝血酶原活动度(PTA)呈负相关(P<0.05或0.01),而与血清丙氨酸转移醇(ALT)和γ球蛋白(γ—G)不相关(P>0.05)。结论:测定血清P(?)P和LN水平对判断慢性肝痛肝组织的炎症坏死活动程度和肝纤维化程度有较大的参考价值。

层粘素及其受体与肿瘤浸润

层粘素(laminin,LN)是基底膜中一种高分子量非胶原糖蛋白。层粘素对细胞附着、扩散、轴突旁生和细胞移行都有影响。层粘素受体(laminin receptor,LR)存在于多种正常细胞及肿瘤细胞表面。肿瘤细胞表面暴露的LR 能同基底膜中的LN 结合,使细胞易于附着和移动。但这一作用需依赖于LN 分子结构中长臂和短臂末端球状区域的存在。肿瘤细胞的移动性和侵袭力越明显,胞浆内的LR 抗原表达也越强。LR 向细胞内的进入,可能同肿瘤细胞移行期间需反复进行附着与脱附着的过程有关。

层粘素及其受体在人卵巢癌细胞中的表达和意义

目的探讨层粘素(laminin,LN)及其受体(laminin receptor,LNR)在人卵巢癌细胞黏附和转移中的作用。方法采用细胞黏附实验检测层粘素及其受体在5株卵巢癌细胞黏附中的作用;Boyden小室测定癌细胞侵袭能力;流式细胞技术检测层粘素及其受体在人卵巢癌细胞上的表达情况。结果抗层粘素及其受体抗体,可明显抑制人卵巢癌细胞的黏附作用,且随着稀释度的不同,其抗黏附能力各异。抗层粘素抗体侵袭力测定显示,A-2780最弱,Skov-3最强,两者比较,差异有显著意义(P<0.01)。在5种卵巢癌细胞中,4株癌细胞有层粘素及其受体表达,1株癌细胞无表达。结论层粘素及其受体可通过诱导肿瘤细胞黏附和迁移,从而促进肿瘤细胞浸润和转移。

肝硬化与层粘素过度表达的研究

用CCl_4诱发大鼠肝纤维化,检测不同期大鼠血清和肝组织匀浆中层粘素(Laminin,LN)的含量,用免疫组化法观察LN在肝脏内的沉积。结果表明,血清LN水平在反映肝组织渐进性损伤方面较之肝内LN含量理想;肝内LN含量在肝受损晚期升高,与免疫组化结果平行。检测不同肝病患者血清LN含量,肝硬化LN水平明显高于正常人和非硬化患者;免疫组化观察慢性肝病和肝硬化患者肝内LN分布,结果以后者LN沉积为多。体外培养大鼠肝细胞,研究LN对细胞的增殖和胶原合成的影响,提示生理血清浓度的LN对肝细胞代谢无明显影响,高浓度时抑制其DNA及胶原的合成。提示肝硬化时LN合成明显增加,血清LN水平是判断肝脏活动性损伤和纤维化进程的良好指标,可适于肝硬化的早期诊断。肝内LN大量沉积,预示肝损伤发展至晚期肝硬化,同时大量增多的LN对肝细胞进一步合成胶原有负反馈抑制作用。

IV型胶原酶及外源性层粘素对胆管癌细胞浸润能力的影响

为探讨胆管癌细胞浸润过程的生物学机制及ＩＶ型胶原酶在浸润中的作用和意义，作者观察了一株新近建立的胆管癌细胞系ＱＢＣ９３９分泌ＩＶ型胶原酶和体外浸润能力，以及外源性层粘素（ＬＮ）对浸润能力的影响。该研究提示，ＩＶ型胶原酶是参与胆管癌细胞浸润过程的重要蛋白水解酶之一，而ＬＮ在介导肿瘤细胞的浸润过程中发挥重要作用。

整合素α_6亚基及其配体在胃癌中的协调表达

探讨整合素α６亚基及其配体在胃癌中的表达。方法应用单克隆抗体免疫组织化学方法对４６例手术切除胃癌整合素α６亚基及其配体层粘素进行检测。结果整合素α６亚基在胃癌细胞中呈明显异质性增强的表达（３１／４６，６７％），与其配体层粘素在胃癌腺体基底膜和癌细胞浆中的表达协调一致。α６亚基和层粘素在膨胀型胃癌中的表达明显不同于在浸润型胃癌中的表达，在不同组织学类型胃癌中的表达也明显不同（Ｐ＜０．０１）。结论整合素α６亚基及其配体的协调表达可能与胃癌的浸润及浸润性生长有关。

血清HA、PCⅢ、CⅣ及LN的水平在肝纤维化与早期肝硬化中的意义

目的 通过检测血清透明质酸（ＨＡ） 、Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ） 、Ⅳ型胶原（ＣⅣ） 及层粘素（ＬＮ） 的水平，了解该四项血清指标与肝纤维化及早期肝硬化的关系。方法 ３６ 例慢性乙型肝炎（ 慢乙肝） 患者的血清ＨＡ、ＰＣⅢ及ＬＮ 用放免法检测（ ＲＩＡ） ；ＣⅣ用酶免法检测（ＥＩＡ） ，并与肝穿病理炎症分级（Ｇ） 和纤维化分期（Ｓ） 进行比较。结果 血清中ＨＡ、ＰＣⅢ、ＣⅣ及ＬＮ 水平与肝纤维化及早期肝硬化关系密切（ Ｐ＜ ０－０５ － ０－０１） 。结论 血清中ＨＡ、ＰＣⅢ、ＣⅣ及ＬＮ 均为较好反映肝纤维化及早期肝硬化的指标。其中ＨＡ 价值最大。

肝血瘀阻与肝纤维化关系的临床研究

目的：探讨肝血瘀阻与肝纤维化之间的关系，为合理应用中药抗肝纤维化奠定理论基础。方法：以放射免疫测定法测定肝病血瘀证与非血瘀证各３５例患者血清中人前胶原肽Ⅲ（ｈｕｍａｎＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎＰｅｐｔｉｄｅⅢ，ｈＰＣⅢ）、透明质酸（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ，ＨＡ）、层粘素（ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）并以３０名健康人为对照。对肝血瘀阻程度与血清肝纤维化指标之间作相关性分析。结果：（１）肝病血瘀证患者血清中ｈＰＣⅢ、ＨＡ、ＬＮ均显著高于肝病非血瘀证患者，后者又显著高于健康人对照。（２）肝血瘀阻程度与肝纤维化程度密切相关。（３）血府逐瘀汤不仅可以改善肝血瘀阻的程度而且可以降低血清肝纤维化指标。结论：肝纤维化的中医本质主要是肝血瘀阻。在一定程度上，肝血瘀阻的程度可以反映肝纤维化的程度。血府逐瘀汤降低血清肝纤维化指标有效，但至少需要２个月时间。

非胶原性间质成份对培养肝细胞DNA和胶原蛋白合成的影响

以透明质酸（ＨＡ）和层粘素（ＬＮ）为非胶原性间质成份的代表，观察其对大鼠培养肝实质细胞和人胎肝细胞￣３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（￣３Ｈ－ＴｄＲ）和￣３Ｈ－脯氨酸（￣３Ｈ－Ｐｒｏ）掺入的影响。结果表明，正常血清浓度的ＨＡ和ＬＮ对肝细胞无明显的影响，高浓度则显著抑制￣３Ｈ－ＴｄＲ及￣３Ｈ－Ｐｒｏ的掺入，但抑制程度和剂量递增无显著相关性。

肝血瘀阻与血清肝纤维化指标及甘胆酸的关系

为了探讨肝血瘀阻与血清肝纤维化指标及甘胆酸(CG)之间的关系,我们在2002年2～11月期间对我院92例慢性肝炎患者和20例对照组的血清肝纤维化标志物透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(hPC-Ⅲ),Ⅳ型胶原(Ⅳ-C),层粘素(LN)及CG进行了检测分析,现将结果报道如下.