卵巢成人型粒层细胞瘤确诊15年后肺转移1例

患者女性,59岁,2003年、2011年相继发现右侧、左侧卵巢成人型粒层细胞瘤,给予手术切除并化疗。2017-09-15,患者主因“发现左下腹包块5天余”于本院就诊住院。胸部及全腹增强CT(2017-09-18)示:左下腹软组织肿块,大小7.5 cm×6.5 cm×4 cm,考虑为间质瘤。

卵巢粒层细胞瘤与纤维卵泡膜细胞瘤蛋白质组学研究

目的:卵巢粒层细胞瘤(ovary granulosa cell tumor,OGCT)与纤维卵泡膜细胞瘤(ovarian fibrothecoma,OF)是卵巢性索间质肿瘤较为常见的类型。由于二者均含有卵泡膜细胞且OGCT呈弥漫性生长模式时与富于细胞的OF和黄素化的OF组织学形态具有相似性,造成二者在病理诊断过程中鉴别困难。本文旨在通过探究OGCT与OF蛋白质组学差异、筛选二者间差异表达蛋白质(differentially expressed proteins,DEPs),发现鉴别诊断二者的生物学标志物。方法:选取5例OGCT和5例OF患者的新鲜肿瘤样本组织,采用蛋白质消化、肽段纯化技术及液相色谱-质谱/质谱分析进行蛋白质定量。运用软件对OGCT和OF的蛋白质进行DEPs分析;对DEPs进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,并在生物过程(bioprocess,BP)、分子功能(molecular function,MF)和细胞组分(cell component,CC)方面对蛋白质/基因进行功能注释,探讨DEPs显著富集的信号通路;通过检索基因/蛋白质相互作用(search tool for the retrieval of interacting genes/proteins,STRING)数据库获得筛选出的DEPs相互作用信息,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。选取26例OGCT和28例OF石蜡包埋组织,通过组织芯片技术和免疫组织化学染色法验证筛选出的DEPs在OGCT和OF中的表达情况。结果:共筛选出24个OGCT与OF显著DEPs,其中13个蛋白质在OGCT中表达量显著上调,11个蛋白质在OF中表达量显著上调。GO富集分析结果显示:富集到BP上的通路包括细胞外基质(extracellular matrix,ECM)处理过程,细胞外结构组织,有机酸、羧酸、脂肪酸和单羧酸分解代谢过程;富集到CC上的通路包括含胶原蛋白的ECM、内质网腔和线粒体基质;富集到MF上的通路包括硫化物结合、ECM结构成分、酰胺结合、胶原结合、转移酶活性和转移酰基。KEGG富集分析结果显示:上调的DEPs主要富集于缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸降解途径;下调的DEPs主要富集于先天性谷胱甘肽代谢缺陷症、朊病毒疾病、花生四烯酸代谢途径、补体系统、细胞色素P450对异种生物的代谢作用和药物代谢-细胞色素P450。PPI结果显示24个DEPs与多种蛋白质存在相互作用关系。组织芯片免疫组织化学染色显示:PLOD3在OGCT中高表达,在OF中低表达,与富集分析结果一致。结论:通过蛋白质组学技术和生物信息学分析方法共筛选出24个DEPs,经免疫组织化学验证,PLOD3在OGCT与OF鉴别诊断中具有一定的临床应用价值,有望成为OGCT与OF鉴别诊断的生物学标志物。

卵巢粒层细胞瘤的诊断和治疗研究进展

卵巢粒层细胞瘤(GCT)是一种卵巢生殖细胞肿瘤,发病率低,疾病进展缓慢,但有复发风险。卵巢GCT有明显的激素相关性临床症状,如闭经、不规则阴道出血、月经紊乱等,有助于诊断。FOXL2基因突变检测有助于诊断成人型粒层细胞瘤(AGCT),准确率较高。此外,影像学检查如超声、CT和MRI等也是重要的诊断手段,能帮助医生确定肿瘤的位置、大小和侵犯范围。血液标志物,如抗苗勒管激素、抑制素可用于AGCT患者的早期诊断和术后随访。卵巢GCT的最终诊断仍需依靠病理诊断,通过组织活检可以明确肿瘤的组织学类型和恶性程度,为患者制定合理的治疗方案提供重要依据。卵巢GCT的治疗以手术为主,必要时辅以化疗及放射治疗。手术方式包括卵巢切除术和子宫全切术。化学治疗方案主要包括铂类药物、紫杉醇类药物等,这些药物可以单独使用,也可以联合使用以提高治疗效果。除了传统的治疗方法外,一些新的治疗策略包括激素治疗、靶向治疗也取得了进展,如醋酸亮丙瑞林在二线治疗及复发性AGCT治疗方面安全有效。

成人型睾丸粒层细胞瘤临床病理学分析

目的 探讨成人型睾丸粒层细胞瘤(adult testicular granulosa cell tumour, ATGCT)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法 收集2例ATGCT患者的临床资料,采用HE、免疫组化染色、Sanger测序法进行检测,回顾性分析其临床病理学特征并复习相关文献。结果 2例患者年龄分别为38和13岁,临床均因发现左侧睾丸肿块而入院。镜下肿瘤组织结节状膨胀性生长,结节内瘤细胞均弥漫性分布,以梭形细胞假肉瘤样形态为主,部分呈实性片状、滤泡状和不规则岛屿状排列。肿瘤细胞呈梭形或卵圆形,胞质稀少,可见明显核沟,偶见核分裂象。肿瘤内可见囊腔区域,肿瘤细胞围绕嗜酸性蛋白样物质呈栅栏状排列,形成Call-Exner小体。免疫表型:α-inhibin、Calretinin、CD56、WT1、SF-1、CD99和vimentin均阳性,SMA部分阳性,例1 FOXL2阳性、例2 FOXL2弱阳性,其余抗体均阴性。Sanger测序检测2例肿瘤均未检出FOXL2基因突变。结论 ATGCT是一种罕见的睾丸肿瘤,临床和病理医师需加强对该疾病的认识水平及诊断的准确性,防止误、漏诊。

基于饲养层细胞培养鸡小肠上皮细胞及紫锥菊提取物对其增殖的影响研究

该研究为了探究鸡肠道成纤维细胞作为饲养层细胞培养鸡肠道上皮细胞(IEC)的可能性及紫锥菊提取物对IEC的增殖影响。试验首先通过IV型胶原酶消化法得到鸡肠道成纤维细胞,并采用丝裂霉素C将其制备成饲养层细胞与分离的鸡肠道上皮细胞共培养。通过细胞免疫荧光鉴定鸡IEC角蛋白的表达、细胞计数试剂(CCK-8)法检测其细胞增殖能力及紫锥菊提取物对其增殖的影响。结果表明:分离的鸡肠道上皮细胞表达角蛋白,与饲养层细胞共培养增殖能力良好,体外存活达14 d;此外31.25-2000μg/mL的紫锥菊提取物能有效促进受损的鸡肠道上皮细胞增殖,其中浓度为500μg/mL效果最为显著(P<0.01)。因此,鸡肠道成纤维细胞可以作为饲养层细胞培养鸡肠道上皮细胞,且紫锥菊提取物对其增殖有促进作用。

卵巢粒层细胞瘤的研究进展

卵巢粒层细胞瘤（OGCT）是一种卵巢性索-间质性肿瘤，占所有卵巢恶性肿瘤的5％～8％，而OGCT只占所有性索一间质性肿瘤的。40％，故OGCT只占卵巢肿瘤的2％以下。国外有研究报道，

人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞构建人口腔黏膜上皮细胞片层的研究

目的:探讨人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞代替鼠源饲养层细胞在体外培养人口腔黏膜上皮细胞的可行性。方法:通过酶消化法从人眼睑组织中分离成纤维细胞传代培养,取P5代成纤维细胞通过丝裂霉素C方法制备饲养层细胞,将其制备成的饲养层细胞用来培养商品化人口腔黏膜上皮细胞。通过罗丹明染色观察其细胞克隆形成率;HE染色观察细胞片层的结构;免疫荧光检测特征蛋白P63、β1-integrin的表达。结果:人眼睑组织来源的成纤维细胞在体外具有较强的增殖能力,高表达成纤维细胞特异性标志性蛋白CD90,培养的人口腔黏膜上皮细胞呈克隆样生长,细胞克隆形成率约为2.2%,并将其构建成3~4层口腔黏膜细胞片层,且高表达上皮细胞标志物P63及β1-integrin。结论:人眼睑组织来源的成纤维细胞可以作为饲养层细胞构建人口腔黏膜上皮细胞片层,为临床应用提供一种新的人源化饲养层工具细胞。

卵巢成年型粒层细胞瘤的临床病理特点分析

目的探讨卵巢成年型粒层细胞瘤的临床病理特点。方法收集无锡市妇幼保健院的19例卵巢成年型粒层细胞瘤的病例资料,分析卵巢成年型粒层细胞瘤的临床病理特点。结果肿瘤发病年龄29~77岁,直径2~17 cm;主诉阴道出血或月经紊乱10例,腹胀1例,9例无明显临床症状;FIGO分期均为Ⅰ期,形态结构多样;EMA、CgA、Syn均为阴性,Calretinin阳性率为94.7%,a-抑制素阳性率为89.5%;子宫内膜病变率为54.5%,均无复发转移。结论卵巢成年型粒层细胞瘤较为罕见,易伴发子宫内膜病变,组织形态多样,需与多种疾病鉴别诊断。

卵巢粒层细胞瘤临床病理特点及相关因素分析

目的探讨成人型和幼年型粒层细胞瘤的发病率及其不同临床病理特征,对卵巢粒层细胞瘤的诊治提供一定参考意见。方法回顾性分析2001年4月至2009年9月我院收治的42例粒层细胞瘤病例,分析成人型及幼年型粒层细胞瘤患者的临床病理特征、治疗方法及随访结果。结果 42例中4例为2001年以前初发,2001年后复发的患者。38例初诊患者(成人型29例,幼年型9例)占我院同期卵巢恶性肿瘤患者的3.13%。成人型中位发病年龄为53岁,幼年型25岁,差异有统计学意义(z=-2.990,P=0.003)。临床最常见的症状和体征分别为腹痛腹胀(44.7%)、阴道不规则流血或月经紊乱(42.1%)及盆腹腔包块(76.3%);最常见的合并症是宫内膜单纯性或复杂性增生(52.6%);其次为子宫肌瘤(21.1%)。38例初诊患者Ⅰ期占73.7%,Ⅱ期23.7%,Ⅲ期2.6%。根据患者年龄、分期、病情等行单侧附件切除或肿瘤剥除者10例,子宫加双附件切除者20例,肿瘤细胞减灭术者8例。42例患者随访7～175月,失访14例,随访中无患者死亡。免疫组化检测结果示抑制素、钙视网膜蛋白、波形蛋白阳性有助于诊断该病。结论卵巢粒层细胞瘤为低度恶性肿瘤的功能性肿瘤,发病率低,多为单侧发病。与上皮性卵巢癌相比,粒层细胞瘤腹水征较少,但也可出现急腹症。粒层细胞瘤较易早期发现,预后较好,但易远期复发,应坚持长期随访监测。

髁突增殖层细胞在颞下颌关节适应性改建中的作用

目的 探讨颞下颌关节盘前移位后髁突软骨增殖层细胞在关节适应性改建中的作用。方法 32只日本大白兔 ,在全麻下建立关节盘前移位动物模型 ,术后 1周、2周、4周、6周、8周处死 ,HE染色、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体mRNA原位杂交染色观察。结果 正常髁突的增殖层浅层有蛋白多糖聚合体mRNA的少许表达 ,但无Ⅱ型胶原表达。增殖层深层Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体mRNA均有大量表达。术后 1周 ,受力区软骨组织变薄 ,尤以增殖层明显。蛋白多糖聚合体mRNA表达开始下调。 2周后Ⅱ型胶原mRNA表达也开始下降。 4周后蛋白多糖聚合体mRNA表达开始回升 ,增殖层浅层也可见表达 ,但Ⅱ型胶原mRNA表达继续下降。术后 8周两基因表达水平恢复至正常。结论 增殖层细胞具有向软骨细胞分化的潜能 ,成年兔髁突软骨增殖层具有再生能力 ,但损伤过度 ,可导致骨关节病样改变。

梅花鹿鹿茸间充质层与前成软骨层细胞的培养及SB-431542对其增殖的影响

分离培养梅花鹿鹿茸间充质层细胞和前成软骨层细胞,通过研究TGF-β的特异性小分子拮抗剂SB-431542对这两种细胞增殖的影响,探讨TGF-β在鹿茸间充质层细胞和前成软骨层细胞增殖与分化中的调节机制。从生长30天的梅花鹿鹿茸中分离间充质层细胞和前成软骨层细胞,进行体外培养,将传代培养第2代的间充质层细胞和前成软骨层细胞分别在含不同浓度TGF-βⅠ型受体特异性抑制剂SB-431542(0、1、3、5、8、10μmol/L)的培养液中培养,48h后用MTT法测定这两种细胞增殖活性的变化,用SPSS软件对其增殖的差异性进行分析。结果显示,体外培养的鹿茸间充质层细胞呈成纤维细胞样,前成软骨层细胞呈纺锤形或梭形,台盼兰染色显示细胞活性均在90%以上。经SB-431542处理的间充质层细胞的增殖活性低于对照组(P<0.05),而前成软骨层细胞增殖活性高于对照组(P<0.05),且3μmol/L和5μmol/L的SB-431542处理的前成软骨层细胞增殖活性明显高于对照组(P<0.01)。试验表明,TGF-β可能在维持鹿茸间充质层细胞的快速增殖和诱导间充质细胞向软骨细胞分化等过程中起重要的作用。

卵巢幼年型粒层细胞瘤临床病理观察

目的探讨卵巢幼年型粒层细胞瘤(juvenile granulosa cell tumor,JGCT)的临床病理特征、早期诊断与预后的关系。方法报道2例少见的幼年型卵巢粒层细胞瘤,并结合国内外文献进行讨论。结果 2例均为青年女性,分别为21岁和27岁。例1为肩胛骨软骨肉瘤术后3年出现腹胀,术后诊断为JGCT,FIGOⅢ期,随访26个月死亡。例2表现为月经失调,临床诊断为FIGOⅠA期,术后随访29个月未见复发。镜下全部为弥漫生长和不典型滤泡样结构,未见Call-Exner小体。肿瘤细胞核小、较圆、深染,极少见核沟,例1细胞重度异型,核分裂象>10/10 HPF;例2细胞轻度异型,核分裂象<5/10 HPF。免疫组化2例vimentin均强阳性,CD99散在弱阳性;例1滤泡内物质黏液卡红染色阳性,例2α抑制素(α-inhibin)小灶阳性;CK18阳性,其余一抗细胞角蛋白(cytokeratin pan,CKpan)、S-100蛋白、蛋白基因产物(protein gene product,PGP)9.5、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)、上皮膜抗原(epithelial membrane anti-gen,EMA)、肌源性标记物结蛋白(desmin)、肌细胞生成素(myogenin)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)、胎盘碱性磷酸酶(placental alkaline phosphatase,PLAP)、人体绒毛膜促性腺激素(human chori-onic gonagotropin,HCG)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、CD45、Calretinin均阴性。结论 JGCT属于交界性或低度恶性肿瘤,但少数病例恶性程度较高,早期诊断是预后的重要因素,需要与卵巢成年型粒层细胞瘤、高血钙型小细胞癌、恶性黑色素瘤等进行鉴别。

细粒棘球蚴生发层细胞的体外培养

将分散的绵羊源细粒棘球蚴生发层细胞在５％ＣＯ２、３７℃恒温箱中进行连续传代培养，细胞培养液为ＲＰＭＩ１６４０完全培养基，细胞支持物在１～１４代时交替为２４孔细胞培养板和用胶原蛋白包被的２４孔细胞培养板，１４代后仅为２４孔细胞培养板。细胞经４０～４５ｄ传代培养（８代）后增殖缓慢。１２代开始至２５代止，各孔细胞又逐步转变成快速增殖细胞，第２６代细胞在对数增长期内的倍增时间约为２４ｈ。这一细胞增殖速率持续至３４代后约有减缓。传代增殖细胞呈小点形、圆形和椭圆形，大部分行悬浮生长。行贴壁生长的细胞经长期培养后融合成合胞体。

卵巢幼年性粒层细胞瘤伴Maffucci综合征

目的 探讨幼年性粒层细胞瘤和Maffucci综合征的临床病理特征及两者伴发的原因。方法 对 1例伴Maffucci综合征的幼年性粒层细胞瘤进行HE、组织化学及免疫组织化学染色观察 ,并复习文献。结果 幼年性粒层细胞瘤多发生于 2 0岁以下患者 ,儿童患者常表现为青春期前假性性早熟 ,生育期妇女常表现为月经紊乱。组织学上具特征性滤泡结构 ,丰富的嗜酸性或空泡化胞质 ,无核沟及Call Exner小体 ,核分裂象多见。Inhibin免疫组化染色有助于诊断和鉴别诊断。Maffucci综合征为先天性软骨发育异常 ,易合并恶性肿瘤。 14例卵巢幼年性粒层细胞瘤伴Maffucci综合征或Ollier病中卵巢肿瘤和骨病变有同侧分布倾向。

卵巢幼年型粒层细胞瘤8例临床病理分析

目的探讨卵巢幼年型粒层细胞瘤(juvenile granulosa cell tumor,JGCT)的临床病理特点、诊断及鉴别诊断。方法回顾本院诊治的8例JGCT的临床、病理特征及免疫表型特点,并进行随访获知其预后情况。结果8例JGCT患者发病年龄6～21岁,平均15.1岁。临床主要表现为腹部包块、腹水及女性假性性早熟。巨检表现为囊实性肿块。光镜下肿瘤细胞呈实性巢状,片状弥漫性排列,部分可排列成多个圆形或椭圆形大小不等的滤泡,少数可形成巨滤泡结构,有的滤泡腔内还可见均质红染物质。瘤细胞呈圆形、多边形,中等大小或较大,胞质丰富,空淡或微嗜酸性,核圆形,染色质均质状,无明显核沟,有一定异型性,可见核分裂象。免疫表型:瘤细胞均表达inhibin-α、CD99、vimentin,部分病例Melan-A、calretinin、S-100阳性,瘤细胞不表达CKpan、EMA、PLAP、Syn和CgA。结论JGCT非常少见,属于低度恶性肿瘤,预后较好。确诊依赖于临床特点、组织形态学及免疫组化标记。病理诊断时要与卵巢的成人型粒层细胞瘤、高钙血症型小细胞癌、类癌、无性细胞瘤等肿瘤相鉴别。

人脐带间充质干细胞作为维持人胚胎干细胞生长饲养层细胞的研究

目的寻找可以维持人胚胎干细胞未分化生长的人源性细胞作为饲养层细胞,从而解决使用鼠源性细胞作为饲养层带来的安全问题。方法尝试以人脐带间充质干细胞作为饲养层细胞来培养人胚胎干细胞,检验其是否可以维持人胚胎干细胞的未分化生长状态。用胶原酶消化法分离人脐带间充质干细胞,光镜下观察细胞形态;流式细胞仪检测其表面标志;诱导人脐带间充质干细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行分化。将人胚胎干细胞系H1接种于丝裂霉素C灭活后的人脐带间充质干细胞上,每隔5d进行一次传代。培养20代后,对人胚胎干细胞特性进行相关检测,包括细胞形态、碱性磷酸酶染色、相关多能性基因的表达、分化能力。结果从人脐带中分离出的间充质干细胞为梭形,呈平行排列生长或漩涡状生长;细胞高表达CD44、CD29、CD73、CD105、CD90、CD86、CD147、CD117,不表达CD14、CD38、CD133、CD34、CD45、HLA-DR;具有分化成脂肪细胞和成骨细胞的潜能。人胚胎干细胞在人脐带间充质干细胞饲养层上培养20代后,继续保持人胚胎干细胞的典型形态,碱性磷酸酶染色为阳性,免疫荧光染色显示OCT4、Nanog、SSEA4、TRA-1-81、TRA-1-60的表达为阳性,SSEA1表达为阴性,体外悬浮培养可以形成拟胚体。结论人脐带间充质干细胞可以作为人胚胎干细胞的饲养层细胞,支持其生长,并维持其未分化生长状态。

IGF1对不同培养代数梅花鹿鹿茸间充质层细胞增殖的影响

通过细胞培养技术,探讨胰岛素样生长因子1(IGF1)对体外培养不同代数的梅花鹿鹿茸间充质层细胞增殖的影响。分离、培养生长90天的梅花鹿鹿茸间充质层细胞,将传代培养第2代、5代、8代细胞经含有不同浓度的IGF1(0,1,3,和10nM)作用,培养24h后用3H-胸腺嘧啶核苷掺入测定法检测蛋白合成放射性含量。不同浓度IGF1处理组的蛋白合成放射性含量的平均值和最高值都是离体培养2代的细胞最高(分别为32146和35973DPM/mg);培养5代的细胞(分别为2781、3206DPM/mg)已明显下降;第8代时(分别为489和736DPM/mg)又进一步下降,并且与对照组无显著的差异。不同培养时期的梅花鹿鹿茸间充质层细胞对IGF1刺激的敏感度不同,取材于生长90天鹿茸的间充质层细胞在离体培养8代后已失去了对IGF1刺激的敏感性。

梅花鹿鹿茸间充质层细胞的体外培养和冷冻保存

为了研究梅花鹿鹿茸间充质层细胞的生物学特性,取梅花鹿鹿茸生长顶端间充质层组织,分离间充质层细胞进行体外培养及冷冻保存。结果表明:在含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中,鹿茸间充质层细胞能进行短期体外培养,培养的细胞呈成纤维细胞样,培养7 d可长至汇合。以含5%二甲基亚砜(DMSO)和10%FBS的DMEM为冻存液,经梯度降温后冻存,间充质层细胞复苏后存活率较高。在4℃条件下,间充质层组织在含10%FBS的DMEM中可保存7 d。