实验动物屏障设施微生物污染防控管理要点

实验动物屏障环境设施运行过程中的病原微生物污染严重影响研究人员和动物健康或导致生物安全事故,干扰实验结果或导致实验中断。然而,在其长期运行中杜绝污染并非易事,可因管理和操作细节的疏漏而发生。病原微生物污染是长期困扰实验动物管理者的难题。笔者从事实验动物屏障设施运行管理多年,深感细节管理在防止病原体微生物污染中的重要性,为此,根据多年的工作经验,结合设施布局、人员管理等细节问题,加以总结,以供同行探讨和借鉴。

新建实验动物屏障设施暖通空调自控系统的调试

该文阐述实验动物生产屏障设施建成后暖通空调(HVAC)自控系统的调试。屏障设施建成后,启动自控系统,在初步调整送风量和压差的前提下,使用风量罩和压差计等设备,对各个区域高效进风口实时检测送风量,配合自控系统微调送风量、压差等,使屏障系统达到使用要求。屏障系统全方位清洁消毒,根据国家标准“GB14925-2010实验动物环境及设施”指标要求,进行环境指标的自检和委托第三方检测。对自检结果和第三方检测结果数据进行比较分析,2次结果无明显差异,均符合国家标准。持续观察现场显示的压差、温度、湿度实时检测数据,与2次检测结果数据相似。自控系统控制的暖通空调能够正常稳定安全运行,该屏障设施可以正常投入使用。

屏障设施内1例散发性柏氏禽刺螨的鉴定与清除

未使用杀虫剂,仅通过更换笼盒和在屏障设施环境中交替使用消毒液喷雾消毒的方法对一例柏氏禽刺螨早期感染进行了清除,两年内未复发,证明该方法有效,为其他屏障设施出现同样问题提供更多的选择。方法 2020年9月,实验动物中心屏障环境中饲养的基因工程小鼠的IVC笼盒内发现体外寄生虫,经形态学鉴定为柏氏禽刺螨,因该房间内饲养的基因工程小鼠均在繁殖期和实验期,鉴于使用杀虫剂可能会对基因工程鼠的生产和后续实验结果产生影响,研究人员选择了更换笼盒和交替使用百毒杀和过氧化氢的方法进行清除。结果 使用该方法后至今未复发,证实该方法有效。结论 经形态学鉴定发现感染基因工程小鼠的为柏氏禽刺螨,基于感染的种类结合其生活习性和生活周期,可以选择对小鼠影响较小的更换笼盒和使用消毒液的方法进行清除,该方法简单有效,保证了基因工程小鼠的正常繁育和实验结果不受干扰。

实验动物屏障设施运行管理标准操作规程的制定和实施

目的:建立一套科学、规范和行之有效的实验动物屏障设施管理标准操作规程,确保实验动物屏障设施管理良好运行。方法:根据实验动物管理的国家标准和实验动物设施的特点,通过调研和专家论证,编写符合实验动物屏障设施运行管理要求的标准操作规程。结果:制定并实施了中国疾病预防控制中心实验动物屏障设施运行管理标准操作规程(SOP)。结论:通过制定和实施实验动物屏障设施运行管理标准操作规程,实现规范化管理,提高管理水平。

广东省屏障设施小鼠群中小鼠肝炎病毒感染情况

目的了解我省屏障设施小鼠群中小鼠肝炎病毒(MHV)感染情况。方法收集2003～2007年实验动物小鼠血清样品的监测数据,并对MHV感染情况有关数据进行分析。结果在6个屏障设施内抽检小鼠,5个屏障设施内抽检的样品检出MHV毒抗体阳性,检出率分别为1.4%,2.4%,2.8%,2.6%,13.2%。品系方面主要分布在BALB/c,BALB/c-nu/nu,NIH三个品系,检出率分别为3.6%,14%,7.1%。结论屏障设施小鼠群中小鼠肝炎病毒感染较为普遍。

实验动物屏障设施管理中的几个关键问题

在实践经验的基础上,本文对实验动物屏障设施运行管理中的软件建设、内环境的洁净维持、配套设备的管理、"四流"的净化控制等几个关键问题作了论述,希望能对我国实验动物屏障设施管理水平的提高有所帮助。

紫外线和臭氧在屏障设施消毒中的应用及职业防护

紫外线消毒灯和臭氧空气消毒机在屏障设施物体表面消毒、水的消毒、空气消毒除臭等方面有一定的应用。本文阐述了紫外线消毒和臭氧消毒、除臭的原理,分析了影响消毒效果的众多因素并提出相应对策,重视"紫外线辐射强度"监测,加强职业防护,并提出在屏障设施如何正确使用紫外线灯值得商榷。

脉动真空灭菌器在实验动物屏障设施中的使用体会

脉动真空灭菌器作为实验动物屏障设施中最主要的灭菌设备,其使用效率将直接影响到屏障设施内实验动物质量。结合本中心十多年来使用该类设备的经验,归纳了使用过程中诸多心得,包括设备使用前注意事项、影响灭菌效果的可能因素和设备的维修保养等方面的使用经验与体会。

负压屏障设施动物饲养笼具的选择及其感染风险的识别

目的生物安全实验室的感染性动物实验大部分经空气传播的致病因子可利用安全隔离装置有效控制,啮齿类动物饲养笼具作为一种常用设备对其要求仍不明确。本研究将测试本实验室(负压屏障设施)模拟感染动物实验在使用开放和密闭2种啮齿类动物笼具的病原暴露风险,并评价本设施的硬件条件和管理措施对于风险控制的水平。方法使用具有卡那霉素抗性的大肠杆菌(Kan^+,E.coli,DH5α)作为指示微生物,测试开放笼盒饲养、密闭笼盒(与外界无压力梯度)饲养、生物安全柜动物换笼等操作的暴露风险,并对负压设施内外的指示微生物进行监测。结果动物在负压屏障设施中使用开放笼具饲养存在病原暴露风险,负压屏障设施一定程度上可以控制病原的播散;动物在无压力梯度的密闭笼盒的饲养环节未能检测到指示菌;密闭笼盒使用生物安全柜设备进行换笼操作可有效控制病原暴露风险。结论在负压屏障设施内使用密闭笼盒,在笼盒与外界无压力梯度的情况下亦可保障生物安全风险的有效控制。

负压屏障设施实验动物兽医的职责

目的:阐述在负压屏障设施工作中实验动物兽医的职责。方法:文献评阅实验动物兽医相关的文献和资料,结合实际工作经验,对负压屏障设施内实验动物兽医的职责提炼总结。结果:通过参考有关文献关于实验动物兽医职责的论述,对负压屏障设施实验动物兽医的职责进行归纳总结。结论:循证研究负压屏障设施实验动物兽医的职责,可为负压屏障设施的管理提供参考。

屏障设施实验动物生产管理SOP的制定和实施

根据屏障设施实际,制定实验动物生产管理SOP并加以实施,实现规范化管理,确保实验动物质量,提升单位管理水平。

高校实验动物屏障设施微生物监控管理

通过阐述实验动物微生物监控的理念,结合自身实际情况,从环境质量控制、动物质量控制、人员管理等三个主要控制点对高校实验动物屏障设施微生物监控管理进行了探讨,以期对高校实验动物屏障设施微生物监控管理提供有益借鉴,使其制定出符合自身设施的动物微生物监测计划。

SPF鸡屏障设施的科学管理

作为屏障设施的管理人员,只有明确净化设施的工作原理,才能制定合理的管理制度,进行科学的管理。国家标准对屏障环境的运行参数给出一个区间,在实际操作中,如何在该区间内确定一个既达到净化要求又达到节能要求的运行参数?本文从几个典型参数着手进行了探讨。

HZ-100型臭氧灭菌机对实验动物屏障设施熏蒸灭菌效果观察

目的:对日本产HZ-100型臭氧熏蒸灭菌机在屏障环境内杀菌效果进行验证,为屏障环境内控制微生物污染提供参考。方法:使用日本产HZ-100型臭氧熏蒸灭菌机对密闭屏障房间进行熏蒸消毒处理,通过熏蒸前、后房间内菌落检测比较,观察其灭菌以及使用效果。结果:熏蒸前,房间内落下菌>59CFU/皿,墙壁拭子菌落1 CFU/皿,枯草杆菌试纸培养阳性;熏蒸后,房间内落下菌2.5 CFU/皿,墙壁拭子菌落未检出,枯草杆菌试纸培养结果阴性。结论:HZ-100型臭氧机熏蒸灭菌效果良好,全程自动化,操作便捷,使用安全。

微电解无菌水系统在实验动物屏障设施中应用的跟踪监测

目的跟踪观察实验动物屏障设施长期应用微电解无菌水系统是否可以持续维持终端供水的无菌。方法在2018年4月—2022年3月期间,每季度跟踪监测中山大学实验动物中心生产繁殖SPF级大小鼠的屏障设施中微电解无菌水系统1次。设置8个采样点,包括微电解出水口进入输水管道前取样点1个、终端出水口6个、输水管网回水取样点1个。按无菌操作流程取样,依据国家标准GB 14925—2010、GB/T 14926.41—2001进行微电解无菌水微生物检测。结果2018年4月—2022年3月共进行17次采样;在微电解无菌水系统正常运行期间,8个采样点的微电解水均检测无菌,符合国家标准。结论微电解无菌水系统能持续维持终端供水的无菌,可以长期应用于实验动物屏障设施。

小型实验动物屏障设施的设计与建设

介绍了适用于高校和科研院所的小型实验动物屏障系统的工程设计与建设经验,并对设施使用和管理中存在的问题进行了探讨。根据实验动物屏障系统的特点,结合本单位工作实际,严格按照国家相应标准进行工程设计和施工,在有限的空间内设置实验动物屏障系统的必备结构,建成后的设施功能较为齐全,空间利用合理,实现了人员、物品、空气的单向流动。

实验动物屏障设施建设技术指标控制的研究

结合实验动物环境设施建设及运行的实践,吸取其他生物洁净室(医疗、制药)建设的经验,从工程建设(尤其是空调净化、温湿度控制、通风换气、梯度压差等)技术角度,遵循节能、高效原则,探讨实施国标GB/T14925-2001和建设中若干技术保障方法,并提出了实验动物环境设施建设标准化问题。

屏障设施内实验动物感染风险分析与应对措施

近年来,越来越多的科研单位使用屏障设施饲养实验动物,如何降低屏障设施内的实验动物被外来病原感染成为重要话题。本文从病原传播途径分析了实验动物的感染风险,着重讨论了针对病原传播途径的饲养管理以及应对措施。