江苏地区肉鸡屠宰链弯曲菌分离菌株毒力基因分布及分子分型研究

目的了解江苏地区肉鸡屠宰生产链中弯曲菌分离菌株毒力基因分布及不同环节分离菌株遗传相关性。方法利用特异性引物对肉鸡屠宰过程不同环节分离所得的96株弯曲菌分离菌株的10种致病相关毒力基因进行聚合酶链式反应(polymera sechainre action,PCR)检测,应用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)方法对分离菌株进行分子分型研究,通过与弯曲菌MLST数据库比对获得各株菌等位基因值、序列型(sequence types,STs)及克隆复合体。结果96株分离菌株中,flaA、cadF和cdtB毒力基因携带率均为100%,其次为cdtC、iam和cdtA毒力基因,携带率较高,分别为96.9%、86.5%和84.4%,另外3个毒力基因flhA、virB11、ciaB携带率均较低,分别为25.0%、15.6%、11.5%;格林-巴利综合症相关毒力基因wlaN在所有菌株中均无检出。MLST分型结果显示,96株弯曲菌可分为10个STs,其中2个为新STs,形成1种优势克隆复合体CC828(56株)和4种未定义的克隆复合体,表现为较低的遗传多样性。结论肉鸡屠宰生产链中弯曲菌毒力基因分布广泛,不同环节弯曲菌分离菌株遗传多样性较低,表明弯曲菌在肉鸡屠宰生产链中存在交叉污染。

成都地区肉鸭屠宰链弯曲菌毒力基因分布及分子分型研究

目的了解并分析肉鸭屠宰环节中弯曲菌分离株的9种毒力基因分布及分子分型特征。方法利用特异性引物对弯曲菌9种与致病力相关的毒力基因进行PCR检测;参照美国PulseNet脉冲场凝胶电泳(PFGE)标准方法,对68株鸭源弯曲菌分离株进行PFGE分型。结果毒力基因PCR检测结果显示空肠弯曲菌中cadF、iamA和cheY毒力基因携带率均为100%,flaA(97.1%)、cdtB(94.3%)、cdtC(94.3%)和ciaB(80%)毒力基因的携带率也较高,其余毒力基因cdtA(25.7%),virB11(2.9%)较低;结肠弯曲菌中除cadF(100%)毒力基因外,高于50%携带率的毒力基因有cheY(84.8%)、cdtB(72.7%)、iamA(66.7%)和cdtA(54.5%),另外4个毒力基因flaA(48.5%)、virB11(18.2%)、cdtC(36.4%)和ciaB(18.2%)携带率均较低。利用PFGE方法对弯曲菌分离株进行分子分型,结果显示35株空肠弯曲菌和33株结肠弯曲菌可分为15个和11个谱型,表现为较低的遗传多样性。结论弯曲菌毒力基因分布广泛,且空肠弯曲菌携带率较高;PFGE基因谱型相似性表明该肉鸭屠宰场存在交叉感染和弯曲菌沿屠宰链传播的现象。

肉鸡屠宰生产链中沙门氏菌耐药基因检测与耐药相关性分析

目的:了解肉鸡屠宰生产链沙门氏菌耐药性与耐药基因的相关性。方法:采用纸片扩散法对肉鸡屠宰生产链分离鉴定的72株沙门氏菌进行10种抗生素敏感性实验;采用PCR方法检测耐药沙门氏菌相应的耐药基因。结果:72株肉鸡屠宰生产链中沙门氏菌对萘啶酸(100%)的耐药率最高;对氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、环丙沙星、四环素、庆大霉素耐药率分别为69.44%、54.17%、38.89%、34.72%、13.89%。72株沙门氏菌中有67株至少含有一种耐药基因,bla TEM、bla CMY-2、sul2、sul3、tet B和tet C耐药基因较为普遍,其耐药菌bla TEM、bla CMY-2、sul2、sul3、tet B和tet C基因检出率分别为96.08%、100%、94.87%、71.79%、78.38%和100%。结论:沙门氏菌对常见抗生素具有不同程度的耐药性,且耐药基因普遍存在于耐药菌株中,药敏实验结果与耐药基因检测结果有很高的一致性(≥75%)。

金黄色葡萄球菌ST398-t571型在陕西生猪屠宰场的流行传播及其耐药性分析

目的 调查陕西省某生猪屠宰场ST398-t571型金黄色葡萄球菌的流行情况及耐药性。方法 本研究对陕西省某生猪屠宰链及屠宰场内部环境共采集485份样品。使用常规检测方法和分子生物学技术对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,然后对分离株进行分子分型鉴定和对15种抗菌药物进行耐药性试验;并对其进行26种毒力基因和13种耐药基因的检测。结果 样品中共分离出62株金黄色葡萄球菌,总分离率为12.8%;其中ST398-t571型分离株为优势克隆型,占90.3%(56/62)。耐药试验结果显示,所有受试菌株均对苯唑西林、阿米卡星、万古霉素和头孢噻肟敏感,对其余的抗菌药物表现出不同程度的耐药性。26种毒力基因中11种毒力基因(seb、seg、sei、sek、sen、seq、lukD、lukE、lukF-PV、lukS-PV、sasG)被检出。13种被检耐药基因除万古霉素耐药基因vanA基因外均有检出。结论 屠宰场生猪屠宰链普遍存在以ST398-t571型为主的金黄色葡萄球菌污染,不同批次分离株基因携带情况存在一定差异且菌株存在较为严重的耐药性。

鸭源弯曲菌的分离鉴定及其耐药性、毒力基因分析

目的了解鸭肉生产链中弯曲菌的污染情况及其耐药性和毒力基因分布情况。方法根据GB 4789.9-2014,从肉鸭屠宰链中分离疑似弯曲菌,采用三重PCR方法,对疑似菌株进行准确鉴定;采用微量肉汤稀释法,对弯曲菌分离菌株进行8种抗菌药物敏感性试验,参考NARMS标准判定药敏试验结果;利用PCR检测与弯曲菌致病相关的4个毒力基因。结果根据形态特征、生化指标及PCR鉴定结果,从489份样品中,鉴定出空肠弯曲菌100株、结肠弯曲菌79株,其他弯曲菌8株,弯曲菌的总体分离率为38.24%,肉鸭屠宰前、脱毛环节、掏膛环节、屠宰后样品弯曲菌分离率分别为76.33%、5.62%、24.00%、0%;药敏试验结果表明弯曲菌对TET(95.72%)、CLI(90.91%)的耐药率较高,对AZI(63.64%)耐药率居中,对CIP(31.02%)、GEN(34.76%)、NAL(37.43%)、ERY(41.18%)、CHL(41.18%)的耐药率相对较低,所分离菌株多重耐药现象较为普遍,多重耐药率达72.19%。弯曲菌分离株对黏附相关基因cadF、鞭毛基因flaA、侵袭蛋白基因iamA、毒素调节基因cdtB的携带率分别为100%、80.75%、71.12%、94.65%。结论肉鸭屠宰过程中存在不同程度的弯曲菌污染,且其耐药情况较为严重,毒力相关基因广泛存在于弯曲菌中,应该加强卫生管理和抗菌药物使用监督。

成都地区鸭源沙门氏菌的分离鉴定及其耐药特征、毒力基因分析

目的了解肉鸭屠宰生产链中沙门氏菌的污染、耐药状况以及毒力基因携带情况。方法参照GB 4789.4-2010,从肉鸭屠宰链中分离疑似沙门氏菌,采用双重PCR对疑似菌株进行准确鉴定,并进行血清分型;采用纸片扩散法对分离株进行10种抗菌药物敏感性试验,根据CLSI标准判定结果;通过PCR检测与沙门氏菌致病性相关的9个基因。结果 343份样品共分离鉴定出99株沙门氏菌,总体分离率为28.86%,宰前、脱毛、掏膛、分割、宰后样品沙门氏菌分离率分别为45.71%、22.68%、24.72%、38.33%、25.81%;分离株共产生了7种血清型,以印第安纳、纽兰和鸭沙门氏菌为优势血清型;药敏试验结果表明,沙门氏菌对NAL(91.92%)的耐药率最高,对TET(43.43%)、AMP(42.42%)、SXT(34.34%)、CIP(29.29%)、CRO(27.27%)、GEN(24.24%)、KAN(22.22%)的耐药率相对较低,对AMC(9.09%)和MH(6.06%)的耐药率最低,多重耐药率为47.47%,其中印第安纳、伤寒和鼠伤寒沙门氏菌的耐药性较突出;沙门氏菌分离株spvR(94.95%)、avrA(93.94%)、ssaQ(90.91%)、mgtC(87.88%)、sopB(83.84%)、bcfC(80.81%)、siiD(77.78%)毒力基因的携带率较高,spvB(29.29%)和spvC(11.11%)的携带率较低。结论肉鸭屠宰生产链容易受到不同血清型、不同耐药特征,且毒力基因携带率高的沙门氏菌污染,相关企业和部门应当在卫生和抗菌药物的使用上加强监督和管理,保障食品安全和公众健康。

河南省肉鸡沙门菌血清型分布及耐药检测

为了解河南省肉鸡屠宰加工生产链中沙门菌血清型分布及耐药性,采用随机抽样的方法采集肉鸡屠宰加工厂的肉鸡样本,按照国家标准进行沙门菌的定性检测和血清型鉴定,通过微量肉汤稀释法对阳性分离株进行药敏试验。结果表明:554份肉鸡样本中检出沙门菌77份,其中肛拭子阳性率(32份)8.7%,肉鸡胴体阳性率(45份)24.2%。共鉴定出5种血清型,以印第安纳沙门菌和肠炎沙门菌为主。耐药性结果显示分离株对磺胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、β-内酰胺类、四环素类等均具有严重的多重耐药性,其中,喹诺酮类耐药性高达100.0%,耐药最小抑菌浓度分布主要集中在中高浓度区间。提示河南省肉鸡屠宰加工生产链中沙门菌污染以印第安纳沙门菌和肠炎沙门菌血清型为主,且存在较严重的耐药性,应从源头加强肉鸡孵育、养殖环节卫生控制,减少沙门菌的污染和抗菌药物的使用。