HPLC法测定枫蓼肠胃康片中山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量

目的采用高效液相色谱法测定枫蓼肠胃康片中山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量。方法采用岛津LC-20AD高效液相色谱仪,以乙腈-0.4%甲酸（16∶84）为流动相,流速1.0m L·min-1,检测波长346nm,柱温：35℃。结果山奈酚-3-O-芸香糖苷线性范围为6.92~69.2μg·m L-1（r=0.9997）,平均回收率（n=6）为98.69%.结论本法可测定枫蓼肠胃康片中山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量,可用于该产品的质量控制。

LC-MS/MS法测定血浆中山奈酚-3-O-芸香糖苷浓度及其在大鼠药动学研究中的应用

目的：建立能够灵敏、特异、准确、可靠地测定血浆中山奈酚-3-O-芸香糖苷浓度的分析方法。方法：优化山奈酚-3-O-芸香糖苷（kaempferol-3-O-rutinoside，NFR）的离子化及其断裂方式，确定相关液相色谱条件，选择能有效地从血浆样品中提取NFR的样品前处理方法；开展方法学考察，以验证新建分析方法的准确性、精密度等，在此基础上将该方法用于分析大鼠静脉注射NFR后所得的实际血浆样品，以验证新建分析方法的适用性。结果：ESI（＋）为NFR提供最佳的离子化条件，采用SRM工作模式，用m／z595→287来检测NFR。同时，以左旋千金藤啶碱（1-Stepholidine）为内标物化合物（IS），其SRM检测采用m／z328→178。NFR及IS的色谱保留时间（tR）分别为2．3和2．2min。用乙酸乙酯（EtOAc）提取经HCl酸化的大鼠血浆样品，NFR和IS的回收率分别为58．5％～70．1％和72．5％。NFR和IS在整个分析过程中稳定。在0．192～600ng·ml^-1的浓度范围内，对NFR与IS的峰面积比值和NFR的血药浓度进行线性回归，其回归曲线线性良好（r=0．9999，n=6×5）。批内准确性为92％～107％，其精密度为1．0％～5．7％；批间准确性为94％～99％，其精密度为1．5％～8．4％。本方法的LLOQ为0．192ng·ml^-1。大鼠静脉给药单剂量NFR（30 mg·kg^-1）后，NFR的消除半衰期（T1/2）为1．27 h、体内平均滞留时间（MRT）为0．32 h，NFR在大鼠体内的清除率（CL）为2．73 L·h·kg^-1、稳态分布体积（VSS）为0．92 L·kg^-1。结论：应用LC-MS／MS技术建立的测定血浆中山奈酚-3-O-芸香糖苷浓度的新方法灵敏可靠，这项研究工作为全面开展NFR注射液的临床前药代动力学研究打下了重要的分析方法学基础。

紫丁香花中山奈酚-3-O-芸香糖苷的提取工艺优化及含量动态变化规律

〔目的〕优化紫丁香花中山奈酚⁃3⁃O⁃芸香糖苷(KR)的提取工艺,探讨其含量的动态变化规律。〔方法〕以KR为指标,用高效液相色谱法测定紫丁香花中KR的含量,在单因素试验基础上,采用正交试验法确定KR的最佳提取工艺。〔结果〕固液比为1∶180,粉碎目数为70目,超声时间为50 min,离心转速为4000 r/min是紫丁香中KR最优提取条件。固液比和粉碎目数两因素对KR的提取量影响最大;在紫丁香开花的中期KR含量最高(8.58 mg/g),KR的含量整体呈现出先增加后降低的趋势。〔结论〕优化的提取工艺方法简单、可靠,稳定性好,可为后期KR的高效开发利用提供参考。

HPLC法测定牛耳枫中山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量

目的:采用高效液相色谱法测定牛耳枫中山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量。方法:采用岛津LC-20AD高效液相色谱仪,以乙腈-0.4%甲酸(16:84)为流动相,流速1.0ml·min^(-1),检测波长346nm,柱温:35℃,检测牛耳枫中山奈酚-3-O-芸香糖苷含量。结果:山奈酚-3-O-芸香糖苷线性范围为6.92~69.2μg·ml^(-1)(r=0.9997),平均回收率(n=6)为98.69%。结论:HPLC法测定牛耳枫中山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量准确性高,可用于牛耳枫的质量标准控制。

龙脷叶中山奈酚-3-O-龙胆二糖苷含量测定与相关性分析

中药龙脷叶系大戟科守宫木属植物龙脷叶Sauropus spatulifolius Beille的干燥叶,性平,味甘、淡,归肺、胃经,具有润肺止咳、通便等功效,主要用于肺燥咳嗽、咽痛失音、便秘等症,主要分布于广西、广东、福建、江苏等省[1]。研究表明,龙脷叶含多种化合物,包括皂苷、糖类、生物碱、鞣质、黄酮类、香豆素等[2],具有止咳、祛痰、抗炎、镇痛、抑菌、保肝、抗过敏等药理活性[3]。目前,龙脷叶现有研究多集中于单体化合物提取分离、药理活性、显微与薄层鉴定与组学研究等,对于多产地含量测定比较研究鲜有报道[4-7]。

不同产地不同采收时间枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷含量的比较

目的:比较不同产地、不同采收期枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量。方法:采收相同产地下不同采收期和相同采收期下不同产地的枫香树叶,称重、晒干,并用HPLC法测定异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量。结果:24批枫香树叶,同一采收期中江西余江、江西鹰潭、江西弋阳三个产地的枫香树叶异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的总含量均较高;同一产地的8个采收期中,以5,6,7月份采收的枫香树叶异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的总含量较高,12月份采收的异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的总含量最低。结论:不同产地、不同采收期枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量存在明显差异,应注意生长环境和采收季节对枫香树叶药材质量的影响。

山柰酚-3-O-芸香糖苷对血管平滑肌细胞增殖、迁移及TGFBR1信号通路活化的影响

目的:探索山柰酚-3-O-芸香糖苷(KR)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移及转化生长因子β受体1(TGFBR1)信号通路活化的影响。方法:将KR(10、20和40μmol/L)孵育大鼠VSMC细胞系A7R5 24 h,或将40μmol/L KR孵育A7 R5细胞24、48和72 h后,MTT法检测细胞活力,Ed U染色检测细胞增殖情况,Transwell小室实验检测细胞迁移能力的变化,Western blot检测细胞迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP2)及基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达;分子对接技术探索KR与TGFBR1之间的相互关系,Western blot检测TGFBR1及其下游的Smad2和Smad3的激活情况。结果 :KR剂量和时间依赖性地降低细胞活力,剂量依赖性地减少Ed U染色阳性细胞数量,降低迁移细胞数量,减少迁移相关蛋白MMP2和MMP9的表达(P<0.05)。KR与TGFBR1发生分子对接的结合力为-9.804 kcal/mol,与TGBFR1的SER-280、ARG-215、ASP-290和LYS-335氨基酸残基形成氢键连接。KR剂量依赖性地降低TGFBR1及其下游Smad2和Smad3的激活(P<0.05)。结论:KR能抑制VSMC的增殖和迁移,其机制可能与抑制TGFBR1信号通路相关。

桑叶中山奈酚-3-O-芸香糖苷水热酸控质子化作用

KR(山奈酚-3-O-芸香糖苷)具有药理高附加值。采用水热酸控醇提法提制桑叶中KR,优化获得KR浸提适宜参数,构建动力学模型,探究KR的传质溶浸过程。结果表明:投加柠檬酸质量浓度0.050 g/L,桑叶与45%的乙醇溶液质量体积比为120 g/mL,80℃水热反应釜中处理40 min,2.00 g桑叶可溶浸KR 16.09 mg/g,是自动中药煲水热浸提KR(0.41 mg/g)的40倍;SEM(扫描电镜)显示水热酸控反应后桑叶表面孔隙明显增多增大,FT-IR(傅里叶变换红外光谱)表明水热酸控反应有利于桑叶C—O、C—H等键水裂解,KR溶浸满足一级动力学模型,溶出速率为-3.45 min-1,为桑叶高值化开发提供理论依据。

HPLC法测定金钱草中紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素

目的建立HPLC-UV法测定金钱草中紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素。方法采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇–0.4%磷酸水,梯度洗脱,检测波长360 nm,体积流量0.5 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素分别在22.10~176.80、21.14~169.12、17.40~174.00、51.12~408.96、23.30~186.40μg/mL呈现良好线性关系(R^(2)>0.9991);平均加样回收率分别为99.50%、100.39%、99.93%、105.58%、98.96%,RSD值分别为1.07%、1.44%、0.57%、0.24%、0.65%(n=6)。结论方法的重复性好,操作简单,结果准确,可以用来控制金钱草药材及其制剂的质量。

苦荞活性组分在SC-CO2/CH3OH中无限稀释扩散系数的测定及计算

为了测定苦荞活性组分(芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷)在超临界二氧化碳-甲醇(SC-CO2/CH3OH)体系中的无限稀释三元扩散系数,采用色谱峰扩展法在温度为308.15~323.15K,压力为8~14MPa进行实验,考察了压力、温度、密度及夹带剂等因素对扩散系数的影响规律,结果表明三元扩散系数随压力、密度及夹带剂质量分数的升高而减小,随温度的升高而增大。分别采用了修正的Wilke-Chang、He-1997及Dymond-Hildebrand-Batschinski模型对相关溶质分子在SC-CO2/CH3OH中的三元扩散系数进行理论关联及预测,计算结果与实验数据比较发现,Dymond-Hildebrand-Batschinski模型的预测效果最佳,芦丁与山奈酚-3-O-芸香糖苷组分的平均绝对偏差分别为2.48%和3.71%。

UPLC-MS法同时测定玉簪花中3种成分

目的建立超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)法同时测定玉簪花中3种成分的含有量。方法玉簪花60%乙醇提取液的分析采用Agilent ZORBAX RRHD Ecilipse Plus-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流动相0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;检测波长265、350 nm;柱温30℃;体积流量0.4 mL/min。结果山柰酚、山柰酚-7-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷分别在0.08~2.5、0.16~5.0、3.75~120.0μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999),平均加样回收率96.4%~102.9%,RSD 1.2%~2.7%。结论该方法专属性强,重复性好,可用于玉簪花的质量控制。

RP-HPLC法同时测定枫蓼肠胃康胶囊中4种黄酮苷成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定枫蓼肠胃康胶囊中芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量的方法。方法:采用Waters X bridge C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相系统:乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:25℃;检测波长:350 nm。结果:芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷的质量浓度分别在12.42~310.50、5.95~148.75、6.85~171.25、7.88~197.00μg·mL与色谱峰面积呈良好的线性关系,加样回收率分别为98.6%、104.2%、104.5%、101.0%(n=6),RSD分别为1.3%、1.1%、1.3%、1.6%。结论:本方法符合方法学验证要求,简便、快捷,可用于枫蓼肠胃康胶囊中4种黄酮苷成分的同时测定。

高效液相色谱-串联质谱联用技术鉴定樱桃叶中的黄酮成分

采用高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS-MS)技术对樱桃叶中黄酮成分进行分离鉴别,流动相为0.1%甲酸溶液-甲醇溶液,梯度洗脱,在ESI负离子模式下采集数据,结合标准品对比,根据相对分子质量、质谱碎片等信息,从樱桃叶中鉴定出9种酚类成分,利用外标法及内标法对其进行定量,分别为:木犀草苷(14.42mg/g)、牡荆素(24.67mg/g)、芦丁(54.66mg/g)、金丝桃苷(56.74mg/g)、紫云英苷(44.20mg/g)、绿原酸(28.12mg/g)、奎宁酸(10.12mg/g)、槲皮素-3-芸香糖葡萄糖苷(20.15mg/g)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(86.57mg/g)。建立的HPLC-MS-MS法快速有效可以用于鉴定樱桃叶中的化学成分。

UPLC-QQQ/MS法分析比较不同品种苦荞麦代表性成分含量

建立超快速液相色谱-三重四极杆质谱联用技术(UPLC-QQQ/MS)同时测定川荞1号、西荞1号、米荞1号、迪苦4个不同品种苦荞麦中6种代表性成分含量的方法,并对不同品种之间含量差异进行分析与评价。所测6种成分葫芦巴碱、芦丁、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山奈酚、大黄素在测定质量浓度范围内具有良好的线性关系,方法精密度、重复性和稳定性良好,加样回收率为95.27%~107.31%。4个品种苦荞麦成分含量存在显著性差异的主要为黄酮类成分,其在米荞1号中含量最高,远高于川荞1号和西荞1号(P <0.01)。方法简单、快速、准确度及灵敏度高,可用于不同品种苦荞麦6种成分的测定,为不同产地、不同品种苦荞麦质量评价提供新的技术参考。

木芙蓉叶质量标准的提升研究

目的提升木芙蓉叶质量标准。方法在原标准的基础上,优化供试品制备方法,增加银锻苷TLC鉴别,采用UPLC法同时测定芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、银锻苷的含量。该药材60%甲醇提取液的分析采用Utimate UPLC AQ-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;柱温40℃;检测波长260 nm。结果银锻苷TLC特征斑点清晰,分离度好。芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、银锻苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率为95.26%~102.52%,RSD为1.05%~2.63%。结论该方法准确可行,可用于木芙蓉叶的质量控制。建议木芙蓉叶含芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、银锻苷总含量不得少于2.1996 mg/g,即0.22%。

UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱结合一测多评法的不同品种苦荞麦质量评价

目的建立18个品种苦荞麦Fagopyrum tataricum指纹图谱,并以芦丁为内标物,采用一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)同时检测苦荞麦中葫芦巴碱、表儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和大黄素含量,以期对不同产地苦荞麦进行质量控制。方法采用超高效液相-三重四级杆液质联用技术(UPLC-QQQ-MS/MS),首次以一级全扫(Full-MS)和多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)2种采集模式相结合的方式建立UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱共有模式,采用夹角余弦法进行相似度评价。以ThermoFisher Accucore^(TM)C_(18)色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.6μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,体积流量0.3 mL/min,柱温30℃,梯度洗脱。以芦丁作为内标物,建立苦荞中其他6种指标成分的相对校正因子(fs/x),从而计算各待测成分的量,并将QAMS计算值与外标法(external standard method,ESM)实测值进行比较,以验证QAMS的准确性和方法适宜性。运用聚类分析、主成分分析、加权分析等化学计量学分析手段建立苦荞麦综合质量优劣评价方法。结果建立了苦荞麦的UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱,在Full-MS扫描模式下标定了15个共有峰,各品种间相似度在0.399~0.973;同时以MRM扫描模式结合对照品对其中芦丁等7种指标成分进行了峰指认。以芦丁为内标物,与葫芦巴碱、表儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和大黄素6种有效成分的建立的fs/x重现性良好,分别为0.283、1.338、0.654、1.162、8.509、0.709。且采用QAMS测定的18个品种苦荞麦中7种指标成分含量与ESM的实测值之间无显著性差异(P>0.05)。化学计量学分析结果表明,芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷和山柰酚是影响苦荞麦质量的主要潜在标志物,质量排序相对靠前的苦荞麦产区主要集中在海拔高、光照强、昼夜温差大的中国西南地区,而指纹图谱相似度差异较明显的荞杂2号、综甜2号和通荞1号排在后3位。结论所建立的指纹图谱结合QAMS简便可行,结果准确,化学计量学分析方法全面客观,可为苦荞麦品质评价和质量控制提供参考和依据。

合欢花化学成分的研究(Ⅱ)

从合欢花甲醇提取物的石油醚和乙酸乙酯部分分离得到7个化合物,经化学方法和波谱法鉴定为:二十四烷酸(1)、二十八烷醇(2)、α-菠甾醇(3)、山奈酚(4)、槲皮素(5)、α-菠甾醇-3-O--βD葡萄糖苷(6)、山奈酚-3-O--αL鼠李糖苷(7)。除二十四烷酸以外,以上化合物均为首次从该植物中获得。

岗松中的一个新黄酮醇苷类化合物

为了研究岗松的化学成分，采用硅胶、聚酰胺柱层析色谱和重结晶的方法对化合物进行分离纯化，通过理化性质和波谱技术鉴定化合物结构。分离并鉴定了8个化合物：6，8-二甲基山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷（1）、槲皮素（2）、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷（3）、杨梅素（4）、杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷（5）、没食子酸（6）、熊果酸（7）和1，3-二羟基-2-（2＇-甲基丙酰基）-5-甲氧基-6-甲基苯（8）。其中，化合物1为新黄酮醇苷类化合物，化合物2—7为首次从该植物中分离得到，化合物8为首次从植物中分离得到。

穿龙薯蓣地上部分的化学成分

目的研究穿龙薯蓣地上部分的化学成分。方法应用多种色谱技术进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据分析鉴定其结构。结果得到10个化合物，分别鉴定为7-羟基-2，6-二甲氧基-1，4-菲醌（Ⅰ）、山柰酚-3-O-β-芸香糖苷（Ⅱ）、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（Ⅲ）、（3S）-6，8-二羟基-3-苯基-3，4-二氢异香豆素（montroumarin，Ⅳ）、4’，5-二羟基-3，3’-二甲氧基联苄（Ⅴ）、薯蓣皂苷元（Ⅵ）、胡萝卜苷（Ⅶ）、β-谷甾醇（Ⅶ）、甘露醇（Ⅸ）、正癸烷（Ⅹ）。结论化合物Ⅰ～Ⅴ均为首次从该属植物中获得。