罗汉果叶中山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的提取及自由基清除活性

以乙醇萃取及大孔树脂分离方法从罗汉果叶中提取出山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷。采用二苯代苦味酰自由基(DPPH)法和2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)法测定了山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖甙的自由基清除能力。结果表明:可以简便地从罗汉果叶中提取到纯度>60%的山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷粗品。山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷显示了良好的自由基清除活性,在DPPH自由基清除测定中,山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖甙的IC50值为9.08mg/mL;在对ABTS自由基清除能力测试中,山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的IC50值为3.97mg/mL。

HPLC-ELSD法测定赤雹不同药用部位中山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量

目的:建立赤雹不同药用部位(根、茎、果实)中山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷含量的PLC-ELSD测定方法。方法:采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器检测。色谱柱:Alltima C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(19∶81);柱温:30℃,流速:0.8 ml·min^(-1)。ELSD条件:漂移管温度:105℃;载气流速:2.8 L·min^(-1)。结果:山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷在51.15~920.70μg·ml^(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均回收率根、茎、果实分别为100.1%,100.5%,101.1%,RSD分别为1.82%,1.79%,1.54%(n=6)。结论:该方法简便、准确,可用于赤雹药材的质量控制。

山柰酚-3-O-鼠李糖苷抗炎作用的研究

目的研究山柰酚-3-O-鼠李糖苷的体内外抗炎作用。方法体外采用酶联免疫法检测山柰酚-3-O-鼠李糖苷对脂多糖刺激的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞264.7细胞释放炎症细胞因子的影响;体内采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验和角叉菜胶致大鼠足肿胀实验评价山柰酚-3-O-鼠李糖苷的抗炎作用。结果山柰酚-3-O-鼠李糖苷在50~200μg·ml^(-1)浓度范围内,可显著抑制脂多糖刺激的RAW264.7细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α及白介素-6的释放,且对细胞活力无明显影响(P>0.05);山柰酚-3-O-鼠李糖苷200、400 mg·kg^(-1)对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀以及角叉菜胶所致的大鼠足肿胀有明显的抑制作用(P<0.01)。结论山柰酚-3-O-鼠李糖苷具有一定的抗炎作用。

槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素致体外心肌细胞损伤的保护作用

目的观察槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素(ADR)致心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法实验选用出生24 h内的Wistar大鼠6只,雌雄不限,分离心肌细胞。采用纯化培养的心肌细胞建立ADR损伤模型,实验分为6组:空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的MEM培养基,不加入任何药物)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(加入含DMSO浓度为5μg/ml的MEM培养液)、ADR损伤组(加AOR浓度为1μg/ml的MEM培养液)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组(分别为低剂量12.5μg/ml、中剂量25μg/ml、高剂量50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组)。分组给药后孵育24 h。显微镜下观察心肌细胞形态,MTT法测定心肌细胞存活率,应用试剂盒分别检测样品中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与ADR损伤组比较,低、中、高剂量保护组均可使心肌细胞存活率增高(P<0.01),LOH活性降低(P<0.01或P<0.05),NO活性降低(P<0.01),SOD活性增强(P<0.01)。结论 12.5~50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷均能减轻ADR对心肌细胞损伤,具有明显的心肌细胞保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。

RP-HPLC法测定香椿叶中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷

目的 建立测定中药香椿叶中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷的反相高效液相色谱法.方法 采用Waters XBridge Shield RP18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液（20∶80）,体积流量为1.0mL/min,检测波长为254 nm,柱温为40℃.结果 在以上色谱条件下,供试品溶液中的槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷与干扰成分完全分离,其在5.260～105.2 mg/mL范围内线性关系良好（r2 =0.999 1）,重复性实验RSD=1.96％（n=6）,平均加样回收率为99.3％～104.1％ （n=3）,RSD为4.23％ ～4.78％.结论 6个产地香椿叶中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷的量分别为0.826％±0.025％（山西运城）、0.271％ ±0.006％（河南西平）、0.459％ ±0.016％（河南焦作）、0.222％±0.006％（四川简阳）、0.808％ ±0.019％（山东西牟）和0.293％±0.008％（江苏镇江）.

HPLC同时测定鸭跖草提取物中咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素的含量

采用高效液相色谱法同时测定鸭跖草提取物中咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素的含量。色谱条件为:色谱柱为Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以甲醇(A)-体积分数0.1%甲酸水(B)梯度洗脱:0~17 min,22%A^42%A;17~28 min,42%A^56%A;28~40 min,56%A^90%A,检测波长为350 nm,流速为1 m L/min,柱温为35℃。咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素分别在2.16~86.4 mg/L、6.445~257.8 mg/L和3.293~131.7 mg/L范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.36%,99.42%和98.00%。该方法准确、可靠、重复性好,可用于鸭跖草提取物的质量评价与控制。

UPLC法测定罗汉果不同部位中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量

目的建立测定罗汉果不同部位(果皮、果瓢和种子)罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的方法,并比较其不同部位之间的含量差异。方法采用超高效液相色谱法(UPLC)测罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量。色谱柱为Waters Acquity UPLCBEHC18(100mm×2.1mm,1.7 m);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:0.3 m L/min;检测波长:264 nm;柱温:35℃;进样量:5L。结果罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的线性范围分别为10.50~84.00和7.05~56.40 g/mL(均r≥0.9999),检测限分别为0.0210、0.0141 g/mL,定量限分别为0.0840、0.0564 g/mL,平均加样回收率分别为99.7%、99.9%,精密度、稳定性、重复性试验均RSD≤1.36%。不同部位的罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的高低整体趋势为果皮>果瓢>种子;果皮中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的平均含量分别为0.472mg/g和0.095 mg/g,果瓢中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的平均含量分别为0.218 mg/g和0.028 mg/g,种子中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷均未检测。结论建立的方法操作简单,准确可靠,重复性好,适合于罗汉果不同部位罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的测定。罗汉果不同部位罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量有差异。

HPLC测定不同产地单芽狗脊中山柰酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定单芽狗脊中山柰酚3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的方法。方法:HPLC条件为DiamonsilTMC18(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-水(30∶70),检测波长265 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温25℃。结果:9个产地单芽狗脊中山柰酚3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的质量分数范围为0.05%～0.43%。结论:该法简便、准确、专属性强,可用于单芽狗脊中山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量测定。

HPLC法测定香椿叶中山柰酚-3-O-鼠李糖苷的含量

目的：建立测定香椿叶中山柰酚-3-O-鼠李糖苷含量的方法，为其质量控制提供参考。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo Hypersil ODS（150mm×4．6mm，5um），流动相为甲醇-水（55：45，V／V），流速为1．0ml／min，检测波长为254nm，柱温为35℃。结果：山柰酚-3-O-鼠李糖苷的质量浓度在5．14-51．40μg／ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0．9997）；精密度、重复性、稳定性试验的RSD〈2％；平均加样回收率为96．77％～103．02％，RSD为3．75％～4．64％（n=3）。结论：该方法准确、重复性和稳定性好，可用于香椿叶中山柰酚．3．D．鼠李糖苷的含量测定。

菊状千里光中的酚类成分

从菊科植物菊状千里光中首次分离鉴定了12种成分:丁二酸(1)、对羟基-肉桂酸(2)、对羟基苯甲酸(3)、对羟基苯甲醛(4)、4-羟基-3-乙酰基苯甲酸(5)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、山奈酚(7)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(8)、芦丁(9)、槲皮素-3-O-β-D-鼠李糖苷(10)、胡萝卜苷(11)和α-羟基-二十四烷酸(12)。所有化合物均为首次从该植物中分得。

珍珠梅多酚类化学成分研究

目的:对珍珠梅的多酚类化学成分进行研究。方法:综合运用硅胶、Sephadex LH-20凝胶和ODS硅胶等柱层析技术以及制备型HPLC方法进行系统分离,根据化合物理化性质和波谱数据鉴定化学结构;用LPS刺激小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7,评价化合物对巨噬细胞释放NO的抑制作用。结果:从珍珠梅95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离得到了12个多酚类化合物,分别鉴定为:儿茶素(1)、表儿茶素(2)、金丝桃苷(3)、槲皮苷(4)、高车前素-7-O-α-L-鼠李糖苷(5)、芹菜素-7-O-α-L-鼠李糖苷(6)、高车前苷(7)、珍珠梅苷(8)、sorbifolin(9)、cinchonain Ib(10)、6-O-trans-feruloylarbutin(11)和undulatoside A(12)。化合物6具有较强的抑制LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO的活性,IC_(50)值为12.2μg/mL。结论:其中,化合物4～7、10～12为首次从珍珠梅属植物中分离得到。

倒心盾翅藤中的1个新鼠李糖苷

目的研究傣药倒心盾翅藤Aspidopterys obcordate的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS等色谱分离技术,对倒心盾翅藤茎醇提物的醋酸乙酯相和正丁醇相进行分离纯化,经现代波谱技术及物理常数测定等方法对所分离的化学成分进行结构鉴定。结果从倒心盾翅藤95%乙醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为3,4-二羟基苯甲酸-3-O-α-L-鼠李糖苷(1)、3,4-二羟基苯酚乙酸酯(2)、3,4-二羟基苯甲酸(3)、儿茶素(4)、β-谷甾醇(5)、胡萝卜苷(6)、cinnacasolide C(7)、尿囊素(8)。结论所有化合物均为首次从倒心盾翅藤中分离。其中,化合物1为新化合物,命名为倒心盾翅藤苷。

HPLC法同时测定多穗柯提取物中4种黄酮苷类成分的含量

目的建立多穗柯提取物中根皮苷、3-羟基根皮苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷的含量测定方法。方法采用HPLC法,Dikma PLATISIL TM-C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,35%A→40%A;10～40 min,40%A→80%A),流速:0.8 mL.min-1;柱温:室温25℃;检测波长:260 nm。结果根皮苷、3-羟基根皮苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷的线性范围分别为0.14～2.91μg(r=0.9998),0.82～16.48μg(r=0.9994),0.06～1.22μg(r=0.9999),0.05～0.98μg(r=0.9999);平均回收率分别为100.4%,99.5%,98.2%,97.3%(n=6)。结论该方法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性,适合于多穗柯提取物中4种黄酮苷的含量测定。

合欢花化学成分的研究(Ⅱ)

从合欢花甲醇提取物的石油醚和乙酸乙酯部分分离得到7个化合物,经化学方法和波谱法鉴定为:二十四烷酸(1)、二十八烷醇(2)、α-菠甾醇(3)、山奈酚(4)、槲皮素(5)、α-菠甾醇-3-O--βD葡萄糖苷(6)、山奈酚-3-O--αL鼠李糖苷(7)。除二十四烷酸以外,以上化合物均为首次从该植物中获得。

骨碎补中2个黄酮苷类化合物的NMR研究

从骨碎补(Drynaria fortunei)的乙酸乙酯萃取物中分离得到了2个黄酮苷类化合物,结合其理化性质,并通过ESI-MS,IR,1 H NMR,13 C NMR,1 H-1 H COSY,HSQC,HMBC等多种波谱学方法进行结构鉴定,鉴定化合物1和2分别为山奈酚-3-O-β-D-6″′-乙酰基-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖苷及山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖苷,并对二者的1 H NMR化学位移信号进行了全归属,纠正了文献中C-5和C-9的归属错误.

淫羊藿中不同部位及单体化合物对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响

目的通过比较淫羊藿Epimedium brevicormon不同洗脱部位及其单体化合物对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用,筛选淫羊藿活性部位和活性成分。方法淫羊藿提取物经大孔树脂柱、硅胶柱、Sephadex LH-20及制备液相的分离纯化,得到不同洗脱部位和单体化合物。运用Aβ_(25-35)体外诱导的神经细胞损伤模型,采用Hoechst33342和PI双染法,对淫羊藿的不同洗脱部位和成分进行活性筛选。结果与模型组比较,除淫羊藿95%乙醇部位外,所有洗脱部位及其中的单体化合物山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B均对Aβ_(25-35)所致SH-SY5Y细胞损伤有显著保护作用。结论淫羊藿对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其二氯甲烷-甲醇(5∶1)部位作用最强,其次是30%乙醇部位、50%乙醇部位。

大花红景天正丁醇提取物的化学成分研究

从云南产大花红景天（Rhodiola crenulata（Hook．f.et．Thoms）．S．H．Fu）植物的正丁醇提取物中分离得到五个化合物，经光谱和波谱解析，分别为大花红天素、酪醇、红景天苷、德钦红景天苷和草质素7-O-（3″-O-β-D-葡萄糖基）-α-L-鼠李糖苷，其中德钦红景天苷为首次在大花红景天中发现的黄酮类化合物。

三桠苦中几个黄酮苷及构象异构现象研究

目的:研究三桠苦Melicopepteleifolia的化学成分。方法:三桠苦用80%乙醇渗漉提取,提取物用色谱技术分离,采用波谱技术(ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等)和化学方法进行结构鉴定。结果:从三桠苦乙醇提取物的醋酸乙酯部位分离出4个化合物,分别鉴定为山奈酚-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(1)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(2)、异鼠李素-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(3)和山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(4)。结论:所有化合物均为首次从该属植物中分离得到。黄酮苷的构象异构引起核磁共振碳谱信号裂分。

青果氯仿萃取部位的化学成分研究

目的:研究青果氯仿萃取部位的化学成分。方法:采用小孔吸附树脂、Toyopear1 HW-40F凝胶树脂、反相C_(18)、Sephadex LH-20凝胶树脂柱对青果氯仿萃取部位进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据(质谱、氢谱、碳谱)分析鉴定化合物结构。结果:从青果氯仿萃取部位中分离得到8个化合物,分别鉴定为二氢红花菜豆酸3′-O-β-D-葡萄糖苷(1)、3,4-二羟基苯甲酸(2)、3-O-没食子酰奎尼酸(3)、没食子酸(4)、没食子酸乙酯(5)、东莨菪内酯(6)、鞣花酸-4-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(7)、异柯里拉京(8)。结论:化合物1、2、7为首次从青果中分离得到;该研究为青果的质量评价奠定了一定基础。