UPLC-MS法测定大鼠血浆中荭草花的3个指标成分及其药动学研究

目的建立UPLC-MS法测定大鼠口服荭草花提取物后血浆中原儿茶酸、山柰素-葡萄糖、槲皮苷的分析方法,并用该方法研究原儿茶酸等3个指标成分的药物代谢动力学。方法血浆样品选择酸化后甲醇沉淀蛋白,Waters BEH C18（2.1 mm×100 mm,1.7μm）柱,流速：0.30 m L·min-1,流动相：0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,扫描方式为多反应离子监测（SIR）。结果 3种成分分别在2.74-677、0.69-186、0.82-200μg·L-1呈良好线性关系。提取回收率、精密度、准确度和稳定性均良好达到测定要求。原儿茶酸、山柰素-葡萄糖和槲皮苷3个指标成分的Tmax（h）分别为0.46±0.1、0.79±0.33和2.63±4.6,Cmax（μg·L-1）分别为463.8±207.81、18.53±7.82和137.38±71.09。结论建立的UPLC-MS检测方法具有特异、快速、准确和灵敏的特点,能够同时测定生物样品中原儿茶酸等3种成分的血药浓度,并成功应用于荭草花在正常大鼠体内这3个指标成分的药动学研究。

荭草花提取物中5种成分在大鼠体内的肠吸收动力学

目的研究荭草花Polygonum orientale L.提取物中原儿茶酸、花旗松素、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷、山柰素-鼠李糖苷在大鼠体内的肠吸收动力学特征。方法采用在体肠灌流模型,超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLCESI-MS/MS)法测定这5种成分质量浓度。结果这些成分对p H值均不敏感,可能不是药物转运蛋白P-gp的底物;原儿茶酸、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷和山柰素-鼠李糖苷在高质量浓度下存在饱和现象;胆汁对原儿茶酸的吸收具有抑制作用,而对山柰素-葡萄糖苷的吸收具有促进作用。结论荭草花提取物中这5种成分在整个肠段都有吸收,而且小肠优于结肠,符合一级动力学特征。

基于UHPLC-Q-TOF-MS分析荭草花提取物在H9c2心肌细胞中效应物质

目的:利用H9c2心肌细胞和UHPLC-Q-TOF-MS技术筛选荭草花抗心肌缺血作用的活性成分。方法:用心肌细胞选择性地结合荭草花提取液中的活性成分,洗去未结合的其他成分后,使细胞靶点失活,被结合的活性成分从心肌细胞中释放出来,采用Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~2 min,95%~79%A;2~5 min,79%A;5~6.5 min,79%~60%A;6.5~7.5 min,60%~55%A;7.5~9.5 min,55%~0%A;9.5~10 min,0%~95%A),电喷雾离子源(ESI)正、负离子模式下扫描采集数据,通过采用对照品比对及二级碎片离子对化学成分进行鉴定。结果:检测出荭草花提取物中可与心肌细胞结合的17个成分,采用对照品比对后,确定8个色谱峰所表征的化学成分,依次为原儿茶酸,儿茶素,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷,槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷,山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷,N-p-香豆酰酪胺,槲皮素和山柰酚。结论:通过分析心肌细胞破碎液中与活性细胞相结合的成分,筛选出了荭草花提取物中能与心肌细胞有相互作用的成分,为明确荭草花的药效物质基础提供了科学依据。

HPLC法同时测定颠茄片5个指标成分含量及特征图谱分析

目的：建立不同生产企业颠茄片中5个指标成分的含量和专属的颠茄片特征图谱检测方法。方法：采用Welch XB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.05%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,检测波长344 nm柱温30℃。结果：5个指标成分东莨菪苷、绿原酸、山柰素-3-O-半乳糖-（6→1）鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、东莨菪内酯和芦丁在含量分析测定条件下,各组分分离,线性范围分别为32.60-978.0、10.00-300.0、31.90-957.0、36.3-1089和10.10-303.0 ng,加样回收率在97.6%-99.7%之间;在特征图谱研究中,以东莨菪内酯为参照峰,标定了16个共有峰,分析的13批颠茄片与共有模式之间有良好的相似性,相似度在0.9以上。结论：建立的含量测定及特征图谱分析方法灵敏度高、结果准确、专属性强,可用于颠茄片的质量控制。