山楂叶提取物对庆大霉素诱导大鼠急性肾损伤的影响及机制研究

目的探讨山楂叶提取物对庆大霉素致急性肾损伤(AKI)大鼠的保护作用及机制。方法大鼠连续7 d腹腔注射100 mg·kg^(-1)庆大霉素,诱导急性肾损伤的发生。通过测定血清BUN、SCR和尿液NAG、LZM含量,检测模型是否成功建立。将急性肾损伤大鼠随机分为模型组,山楂叶提取物低剂量组,山楂叶提取物中剂量组,山楂叶提取物高剂量组及阳性药组,口服给药14 d。血清用于检测肾功能指标;肾组织进行苏木精-伊红(HE)染色,肾组织匀浆用以检测生化指标及炎症因子含量、MAPK信号通路的相关蛋白表达水平。结果大鼠连续7 d腹腔注射100 mg·kg^(-1)庆大霉素可成功建立急性肾损伤模型。山楂叶提取物能缓解庆大霉素引起的肾组织病理学改变,降低肾体指数和血清BUN、SCR含量,降低肾组织NO、MDA、NOS含量,增加SOD和GSH-PX含量,降低炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和KIM-1的表达,抑制肾组织中P-p38 MAPK、P-ERK1/2、P-JNK蛋白的表达。结论山楂叶提取物对庆大霉素致AKI大鼠有保护作用,可能是通过抑制MAPK信号通路表达,从而减轻炎症因子释放,改善肾损伤,起到保护肾功能作用。

山楂叶提取物及其制剂对人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤中性粒细胞黏附的影响

目的研究山楂叶提取物(牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷)及其制剂奥沙恩注射液对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧复氧损伤时中性粒细胞(PMN)黏附的影响及其分子机制。方法以HUVEC为实验对象,复制缺氧复氧损伤模型,用酶标仪检测山楂叶提取物牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及其制剂奥沙恩注射液对HUVEC缺氧60min复氧30min和复氧240min时PMN黏附的影响;应用流式细胞学方法,观察牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及奥沙恩注射液对PMN表面黏附分子CD11/CD18表达的影响。结果缺氧60min后可见HUVEC皱缩,变形;复氧30min,模型组PMN-HUVEC之间有明显的细胞黏附现象,正常组细胞之间黏附较少,各用药组与模型组比较,PMN-HUVEC黏附较少。复氧240min处理的细胞各组情况与复氧30min相似。山楂叶提取物牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及其制剂奥沙恩注射液均可显著抑制复氧30min和240min时PMN-HUVEC之间的黏附,且呈现出一定的量效关系。牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷可显著抑制HUVEC缺氧复氧损伤导致的PMN表面CD11/CD18分子表达,且奥沙恩注射液和牡荆素葡萄糖苷均表现出良好的量效关系。结论在静息状态下,PMN表面几乎不表达CD11/CD18分子,但缺氧复氧30min和240min处理的HUVEC上清液孵育中性粒细胞30min,可增强PMN表面CD11/CD18分子表达的增加。且第1个时相即复氧后30min时PMN-HUVEC的黏附比第2个时相点更为明显。复氧时经牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷及其制剂奥沙恩注射液处理的HUVEC上清液可抑制PMN表面CD11/CD18分子表达的增加,降低PMN-HUVEC黏附,这可能是山楂叶提取物及其制剂奥沙恩注射液保护心脏免于缺血再灌注损伤的重要分子作用机制之一。

分光光度法测定山楂叶提取物中总黄酮的含量

目的:建立山楂叶提取物中总黄酮的含量测定方法。方法:以芦丁为对照,采用两种紫外-可见分光光度法对不同条件处理下的山楂叶提取物中总黄酮含量进行测定和比较分析。结果:山楂叶提取物中总黄酮的含量以硝酸铝显色法(510nm)测定为86.15%;氯化铝显色法(272nm)测定为35.19%。结论:两种紫外-可见分光光度法测定山楂叶提取物中总黄酮的含量有较大差异,采用何种方法测定其总黄酮的含量还有待进一步考究。

高效液相色谱法测定山楂叶提取物中金丝桃苷的含量

目的为山楂叶提取物建立专属性含量测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法测定。色谱柱：Diamonsil C18柱，流动相：甲醇-水-冰醋酸（48：52：1），检测波长：340nm。结果金丝桃苷浓度在13．18—79．08μg／ml范围内与峰面积线形关系良好，相关系数为0．9998，平均加样回收率为97．43％，RSD为1．26％（n=5）。结论该法操作简单、准确，可作为山楂叶提取物的定量分析方法。

山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病大鼠糖脂代谢作用的研究

目的:观察山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠糖脂代谢的影响。方法:用高脂饲料诱导建立大鼠NAFLD模型,分为正常组、模型组、阳性药物对照组、山楂叶提取物组、自然恢复组和节食组,观察各组大鼠血清中甘油三酯(TC),总胆固醇(TG),游离脂肪酸(FFA),脂蛋白酯酶(LPL)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(INS)和胰岛素抵抗指数(IRI)以及大鼠肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA的表达情况及其肝组织病理学改变情况。结果:与模型组和自然恢复组相比,山楂叶提取物组大鼠体重明显降低,血清TC、FFA、FPG、INS、IRI明显降低(P<0.05),同时LPL升高以及PPARαmRNA表达量升高亦有统计学意义(P<0.05)。结论:山楂叶提取物能够改善NAFLD大鼠的糖脂代谢异常,这可能与提高LPL的含量和增加PPARαmRNA表达有关。

山楂叶提取物自微乳化释药系统的降血脂作用

目的研究山楂叶提取物自微乳化释药系统的降血脂作用。方法通过高脂饲料喂养,造成大鼠高血脂模型,经给予山楂叶提取物自微乳化释药系统后,测定血脂变化。结果山楂叶提取物自微乳化释药系统能明显降低高血脂大鼠的血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白。结论山楂叶提取物自微乳化释药系统有明显降低大鼠高血脂的作用。

山楂叶提取物对高血脂大鼠的影响

目的:观察山楂叶30%乙醇提取物对高血脂大鼠的影响。方法:观察山楂叶提取物对高血脂大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度酯蛋白(LDL)及高密度酯蛋白(HDL)的影响。结果:TC、TG均显著升高(P<0.05)。LDL及HDL也有不同改变。结论:口服剂量山楂叶乙醇提取物可降低大鼠血浆中TC及TG,同时有降低LDL及增高HDL的趋势,具有降血脂的作用,其中以30%乙醇提取物效果最佳。

基于主成分分析的山楂叶提取物对急性血瘀证血常规影响的研究

目的观察山楂叶不同提取物对急性血瘀证模型大鼠血常规的影响。方法取Wistar雄性大鼠120只,随机分成正常组、模型组、阳性对照、山楂叶乙酸乙酯部位、2015版《中国药典》山楂叶大孔树脂提取物、山楂叶水饱和正丁醇部位和山楂叶50%乙醇提取物组,制作急性血瘀模型大鼠,测血常规指标。用主成分分析和单因素方差分析结合的方法分析数据。结果山楂叶4种不同提取物均能显著降低淋巴细胞百分比(%)、淋巴细胞数(10~9/L)和粒细胞数(10~9/L),能显著抑制血红蛋白(g/L)、红细胞平均体积(f L)和红细胞压积(L/L),对血小板总数(10~9/L)的异常改变也有明显改善作用。结论山楂叶4种不同极性的提取物能促进急性血瘀证大鼠血常规异常指标的恢复,有利于血液功能的调节。

山楂叶提取物对犬急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究山楂叶提取物(奥沙恩注射液)对犬急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:以犬为实验对象,复制心肌缺血再灌注损伤模型,从心肌酶、血管活性物质、心外膜电图、心肌耗氧量、心肌缺血及坏死面积等多种角度,研究奥沙恩注射液对心肌缺血再灌注损伤的影响。结果:奥沙恩注射液可显著降低心肌缺血再灌注后心肌酶(CK、CK-MB、LDH)的含量,显著降低血管活性物质 (ET、TXB2)的升高,提高血浆6-Keto-PGF1α的水平和6-Keto-PGF1α/TXB2比值,显著降低心肌耗氧, 减少心肌死区面积。结论:奥沙恩注射液对犬急性心肌缺血再灌注损伤具有明确的保护作用。

HPLC法同时测定山楂叶提取物中的7种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中牡荆素葡萄糖苷（I）、牡荆素鼠李糖苷（Ⅱ）、芦丁（Ⅲ）、牡荆素（IV）、金丝桃苷（V）、熊果酸（Ⅵ）和槲皮素（Ⅶ）的含量。方法采用HPLC法，色谱柱为Agilent ZORBAXSB—C18柱（5μm，4．6×250mm，柱号：880975—902）流动相A为1％冰醋酸水溶液，B为乙腈。梯度洗脱。0～5min，流动相A由95％～90％，B由5％～10％；5～15rain，A由90％～80％，B由10％～20％；15～35min，A由80％～0％，B由20％～100％；35～45rain，A0％，B100％，流速1．0mL·min^-1；检测波长0～20min，检测波长为360nm；20～30min，检测波长为220nm；30～45min，检测波长为360nm，参比波长均为385nm，柱温40℃。结果I～Ⅶ的平均加样回收率分别为99．87％、99．86％、101．23％、100．65％、101．58％、101．45％和98．37％，其RSD分别为1．26％、1．28％、1．35％、1．49％、1.32％、1．51％和1．44％（n=6）。结论该方法简便、快速、准确、可靠，可用于山楂叶提取物的质量控制。

山楂叶提取物类脂质体稳定性影响因素及体外释药特征

目的考察山楂叶提取物类脂质体的稳定性及体外溶出特征,为其进一步的剂型选择、工艺设计及贮存条件的确定提供实验依据。方法以山楂叶提取物类脂质体的外观质量、总黄酮和牡荆素鼠李糖苷的含量为考察指标,对其进行高温、高湿、强光照射试验考察;以牡荆素鼠李糖苷的含量作为考察指标,采用动态反透析法检测山楂叶提取物类脂质体的体外释药特征。结果山楂叶提取物类脂质体具有一定的耐光照、热稳定性,外观质量无变化,总黄酮、牡荆素鼠李糖苷的含量无统计学意义,RSD均小于2.0%,但高湿条件下吸湿明显,重量变化较大;山楂叶提取物类脂质体在磷酸盐缓冲溶液(p H 7.4)中的牡荆素鼠李糖苷24 h累积释放率均达到70%以上,且释放机制遵循Higuchi方程。结论山楂叶提取物类脂质体的稳定性较好,应在相对临界湿度60%以下条件下保存,体外释药特征以被动扩散为主。

山楂叶提取物对犬左心室的影响

为了探讨山楂叶提取物对麻醉开胸犬左心室的影响,本试验通过对犬的左心室的收缩力、作功、室内压、内压最大上升速率的测定。结果显示,山楂叶提取物能增强心肌收缩力,增大心室的运动振幅,具有强心作用。

山楂叶提取物抗抑郁作用的初步研究

目的探讨山楂叶提取物抗抑郁作用。方法将小鼠随机分为山楂叶提取物高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg)、百合皂苷组(0.05 g/kg)、氟西汀(0.004 g/kg)组和正常对照组(等容生理盐水),观察小鼠悬尾不动时间、强迫游泳不动时间和拮抗利血平降低小鼠体温的变化。结果与对照组相比,山楂叶提取物高、中、低剂量组、百合皂苷组和氟西汀组小鼠悬尾不动时间和强迫游泳不动时间均明显缩短,组间比较差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01);山楂叶提取物中、低剂量组、百合皂苷组合氟西汀组小鼠体温变化明显减小,组间比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论山楂叶提取物具有一定的抗抑郁作用。

HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中山楂叶提取物3种黄酮类成分及其药代动力学研究

[目的]建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定大鼠灌胃给予山楂叶提取物后牡荆素、牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷的药代动力学。[方法]大鼠给予山楂叶提取物(1、2、4 g/kg)后采集不同时间点血浆样品,经甲醇处理后,以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,通过Agilent ZORBAX XDB-C_(18)(3.5μm,2.1×50 mm)色谱柱梯度洗脱,采用负离子电喷雾离子化源,多反应监测(MRM)模式进行测定。[结果]牡荆素、牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷分别在0.5~500.0 ng/mL(r=0.998)、1.0~1 000.0 ng/mL(r=0.999)、1.0~1 000.0ng/mL(r=0.998)范围内呈良好的线性关系,方法精密度、准确度、回收率和稳定性均符合生物样品的测定要求。[结论]本方法简便、快速、专属性强,可用于大鼠血浆中牡荆素、牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷的同时测定及其药动学研究。

山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷的含量测定

目的：建立一种准确度和灵敏度高,重现性好的山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷的高效液相色谱测定法。方法：色谱柱为Zorbax SB-C18（250mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为乙腈,B为水溶液,梯度洗脱。0-5m in,流动相A由5%-10%,B由95%-90%;5-10m in,A由10%-18%,B由90%-82%;10-30m in,A保持18%,B保持82%,流速为1.0mL/m in,检测波长334 nm,柱温30℃。结果：牡荆素鼠李糖苷在4.296-64.440μg/mL浓度范围内与峰面积值线性关系良好（r=1）,平均回收率为99.19%,RSD=1.94%。结论：建立的含量测定方法简便、准确、灵敏,可用于山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷的测定。

山楂叶提取物在心血管疾病中的研究进展

山楂为传统中药,具有消食化积,活血化瘀的功效,实验表明山楂叶提取物同样具有活血化瘀的作用。目前研究表明,山楂叶提取物具有抗血栓,调脂,抗心肌缺血,抗动脉粥样硬化,减少血管成形术后再狭窄以及抗心衰等多方面的作用。由于现代医学对心血管药物的研发已经进入平台期,因此以天然植物药为主的药物如山楂叶提取物因其多靶点的综合治疗作用,以及较低的毒副作用被重新重视,成为各国研究者的新热点。

山楂叶提取物HPLC指纹图谱归属分析及谱效关系初探

目的:探讨山楂叶不同提取部位指纹图谱特征峰所代表的化学成分与降低血瘀大鼠血浆黏度的相关性,为建立"指纹图谱与药效关联"的中药质量控制模式提供理论依据和数据支持。方法:采用HPLC法建立山楂叶不同提取部位的指纹图谱;采用MATLAB软件的逐步后退分析方法,计算指纹图谱共有峰X与血浆黏度药效值Y的多元线性回归方程。结果:指纹图谱共有峰有32个,X_9、X_(10)、X_(11)、X_(13)、X_(14)、X_(15)、X_(17)、X_(19)、X_(27)、X_(31)和血浆黏度值具有相关性,组成功效成分组。X_9、X_(10)、X_(13)、X_(14)、X_(17)、X_(31)具有负相关性,有可能是活性单体成分,其中X_(14)是牡荆素葡萄糖苷,X_(17)是牡荆素。结论:该研究利用MATLAB软件计算得到的多元回归方程(P<0.01)具有统计学意义,因此可以为进一步研究山楂叶提取物的活性成分提供科学的理论依据。

山楂叶提取物泡腾片成型工艺的研究

目的优化山楂叶提取物泡腾片的制备工艺条件。方法以pH值、崩解时限、第30日的硬度为评价指标,采用正交试验进行工艺优化。结果最佳工艺配比为20%柠檬酸、20%碳酸氢钠,并采用聚乙二醇6000包裹碳酸氢钠。结论该工艺稳定、可靠。

山楂叶提取物分离纯化工艺的优化

目的优化《中华人民共和国药典》2015年版山楂叶提取物工艺的分离纯化条件,提高山楂叶提取物制备的达标率。在现有的针对总黄酮研究的基础上,提高牡荆素鼠李糖苷的含量,符合山楂叶提取物用药要求。方法以牡荆素鼠李糖苷含量为指标,考察了山楂叶提取参数、分离纯化过程中的树脂型号、洗脱体系等。结果选用LX158树脂替代药典规定的D101树脂,采用3BV水洗除杂后,3BV 10%乙醇洗脱除杂,洗脱剂为6BV 30%乙醇。结论优化后的工艺总黄酮含量≥80%,牡荆素鼠李糖苷含量≥8.8%,满足药典相关要求且较比药典工艺收率高7.07%,为中国药典山楂叶提取物制备工艺的补充和修订提供科学依据。

一测多评法测定山楂叶提取物中4种成分的含量

目的:建立同时测定山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷、金丝桃苷、牡荆素含量的一测多评法。方法:以牡荆素葡萄糖苷为内标物,计算牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素3个成分的相对校正因子,并将该方法的测量结果与传统外标曲线法的测定结果进行比较。结果:牡荆素葡萄糖苷与牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素的相对校正因子分别为0.963、1.116、1.034;一测多评法与传统方法测定结果比较,牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素的含量无明显差异。结论:经方法学验证,本研究建立的一测多评法可用于山楂叶提取物中4种成分含量的同时测定。