山羊关节炎脑炎病毒甘肃株全基因组克隆和序列分析

根据GenBank中发表的山羊关节炎脑炎病毒CAEV-CO株(caprine arthritis encephalitis virus-CO,CAEV-CO)的全基因组序列(序列号:NC-001463),设计合成了7对引物,对CAEV甘肃株的全基因组进行了PCR扩增,并对扩增产物进行了克隆和测序。结果表明,CAEV-甘肃株基因组全长为9 186nt。与国际标准毒株CAEV-CO株相比,在编码区有12个碱基的缺失,二者的核苷酸同源性为91.0%;在非编码区有27个核苷酸的插入,核苷酸同源性为97.0%。gag、pol、蛋白Q、tat、env基因编码的氨基酸同源性分别为94.6%、94.7%、87.9%、94.7%和91.5%。

山羊关节炎─脑炎前病毒的PCR检测

山羊关节炎─脑炎前病毒的ＰＣＲ检测相文华，丁恩雨，秦运安，吕晓玲，沈荣显（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨１５０００１）关键词聚合酶链反应，山羊关节炎—脑炎病毒，整合山羊关节炎—脑炎（ＣａｐｒｉｎｅＡｒｔｈｒｉｔｉｓ－Ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ，Ｃ...

山羊关节炎-脑炎病毒P28蛋白的表达与间接ELISA方法的建立

为建立检测山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)血清抗体的间接ELISA方法,本研究将原核表达并纯化的CAEV P28蛋白作为检测抗原,采用方阵法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,经过对反应条件的优化建立了CAEV间接ELISA抗体检测方法。该方法仅对CAEV血清检测为阳性,对口蹄疫、山羊痘和蓝舌病病毒的阳性血清检测结果均为阴性;敏感性试验表明标准阳性血清1∶3 200倍稀释时,检测结果仍为阳性。该方法的批内和批间重复试验的变异系数分别小于7%和10%。对人工感染山羊血清进行检测,该ELISA方法最早可以在第2周检出抗体,琼脂凝集免疫扩散试验(AGID)最早可以在第4周检出抗体;与AGID试验方法相比,ELISA检出率提高27.2%。结果表明,本研究所建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性,为该病的诊断和监测提供了有效的技术手段。

山羊关节炎-脑炎病毒甘肃株env基因的克隆和序列分析

本试验参考GenBank上发表的CAEV-63株的env基因核苷酸序列设计一对引物,以CAEV甘肃株前病毒DNA为模板,PCR扩增产物约2.9kb,与预期的目的片段大小一致。回收目的基因片段并将其克隆到pMD18-T载体上,经PCR及酶切鉴定阳性的重组质粒测序,结果表明所扩增2893个核苷酸片段含有CAEV囊膜基因的全序列,编码964个氨基酸。核苷酸和氨基酸序列分析显示,CAEV甘肃株env基因与CAEV-63美国株的env基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.0%和98.1%。

绒山羊关节炎-脑炎的病理组织学观察

2006年12月初,大庆某绒山羊养殖场发现,数只绒山羊羔出现跛足、运动失调和后肢麻痹、头痉挛,有时做转圈运动,确诊为山羊关节炎-脑炎。对脑组织、淋巴结和脾脏进行病理学观察发现:脑组织可见不对称性褐色-粉红色肿胀区并压迫邻近组织,有脑软化,淋巴结和脾脏稍肿大;同时,镜下可见脑脊髓炎,脑组织水肿神经细胞肿胀或萎缩,神经细胞与周围组织间隙增大;胞核肿胀或固缩;神经纤维有程度不等的脱髓鞘;毛细血管充血,有较多的淋巴细胞和巨噬细胞浸润;脾脏可见白髓萎缩,少量细胞坏死;淋巴结中淋巴组织增生,有小灶状坏死。

山羊关节炎-脑炎及其综合防疫措施

山羊关节炎-脑炎是20世纪80年代在我国发现的一种慢性传染病,由山羊关节炎-脑炎病毒引发,常发生于山羊,导致成年山羊出现慢性多发性关节炎等病症,羔羊出现脑脊髓炎。一旦发生,病情呈现慢性进行性过程,干预后效果不好,大多病羊死亡,不利于羊生产。笔者主要对山羊关节炎-脑炎及其综合防治措施展开简述,以期提高对该病的了解和预防。

山羊关节炎脑炎的临床症状与防治措施

山羊关节炎脑炎是一种主要引起山羊关节炎、脑炎和乳房炎的病毒性传染病,临床症状为脑白质、慢性多发性关节炎或伴发间质性肺炎或间质性乳腺炎。目前本病暂无有效治疗方法,预防措施为做好生物安全措施和定期对养群进行检疫。

山羊关节炎-脑炎的发病症状、诊断和防控措施

山羊关节炎-脑炎病是一类致死率较高的慢性病毒性疾病,不同年龄山羊均易感,但呈现的临床症状不同,6月龄内羔羊主要为脑脊髓炎型,成年山羊为关节炎型,奶山羊和老龄羊呈肺炎性。本文首先对山羊关节炎-脑炎病原特点和流行特点进行概述,并总结了脑脊髓炎型、关节炎型和肺炎型三种常见的山羊关节炎-脑炎病发病症状和病理解剖变化,最后提出诊断和防治措施,以期为山羊关节炎-脑炎病综合防治提供理论参考。

山羊关节炎脑炎临诊检疫

CAE是山羊关节炎脑炎。它是一种影响山羊而不危害人类的病毒。山羊通过感染的初乳、奶水或血液相互传染。它不通过粪便、繁殖、或食物和水传播。大多数感染脑炎病毒山羊都无症状,主要的临床表现包括:关节炎、脑脊髓炎、间质性肺炎、乳腺炎与病毒感染有关。山羊关节炎-脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒引起的山羊一种慢性病毒性传染病。其特征为成年山羊呈缓慢性发展的关节炎,并伴有间质性肺炎、乳房炎和2~6月龄幼年羊脑炎。临床常见的影响包括:腕关节、踝关节、膝关节、球关节和髋关节。

吐根堡山羊关节炎脑炎的调查报告

山羊关节炎脑炎(Caprine athritis encephalitis)是由反转录病毒科的慢性病毒亚科的病毒引起,以神经症状为主的慢性进行性传染病。南华县从某省引进的吐根堡山羊,相继发生以神经症状为主的疫病,经临床、病理、血清学诊断,确诊为山羊关节炎脑炎。现报告如下:

山羊关节炎-脑炎治疗分析

山羊关节炎-脑炎是一种慢性病毒性传染病,不仅感染力较强而且潜伏期较长,会降低山羊的生产性能以及产奶。基于此种情况,本文围绕山羊关节炎-脑炎展开探讨,对其病原病理进行简要分析,并介绍了其临床症状和诊断,最后提出了山羊关节炎-脑炎的有效防治措施。

山羊关节炎脑炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立及应用

为建立检测山羊关节炎脑炎病毒(caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)的快速诊断方法,本研究根据CAEV甘肃株Gag基因设计1对引物,并以含有CAEV甘肃株全基因组序列的质粒pUC57-CAEV为模板,建立CAEV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示,本研究所建立的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品模板在1.19×109~1.19×10^1 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.997,斜率为-3.74,检测下限为1.19×10^1 copies/μL,且对痘苗病毒、山羊痘病毒均无扩增。重复性试验结果显示,批间与批内变异系数均小于1%,重复性好。本研究首次建立了CAEVGag基因的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法,为CAEV的快速检测和病毒感染预防提供了技术手段。

我国11个省份山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的血清抗体检测

为摸清我国山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的流行情况,用竞争ELISA（C-ELISA）方法对采自河北等11个省份的山羊与绵羊血清进行了抗体检测。结果显示,共检测山羊血清2 083头份,检出山羊关节炎-脑炎抗体阳性血清8份,阳性率为0.38%;检测绵羊血清1 339份,检出绵羊进行性肺炎抗体阳性血清6份,阳性率为0.45%。按不同山羊血清来源统计,山羊关节炎-脑炎的规模场阳性率为0.51%,散养户阳性率为0.50%;按不同绵羊血清来源统计,绵羊进行性肺炎的规模场阳性率为0.53%,屠宰场阳性率为0.12%。按不同山羊饲养方式统计,山羊关节炎-脑炎的全舍饲阳性率为0.41%,半舍饲阳性率为0.35%,放牧阳性率为0.35%。按不同绵羊饲养方式统计,绵羊进行性肺炎的全舍饲阳性率为0.48%,半舍饲阳性率为0.26%,放牧阳性率为0.85%。结果表明,我国山羊与绵羊中分别存在山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的感染,但感染流行率较低。

山羊关节炎-脑炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立检测山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)血清抗体的间接ELISA方法,采用PCR方法扩增山羊关节炎-脑炎病毒CA蛋白编码基因序列,然后克隆至原核表达载体pET-28a(+),诱导含有重组载体pET-28a(+)-CA的大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白rHis-CA。采用Ni柱亲和层析方法纯化重组蛋白rHisCA,并以纯化的rHis-CA为包被抗原建立检测山羊关节炎-脑炎血清抗体的间接ELISA方法。结果表明重组蛋白rHis-CA以包涵体形式表达,具有良好的反应原性。所建立的rHis-CA间接ELISA方法的最适抗原包被质量浓度和血清稀释度分别为0.4 μg/mL和1∶100,血清阴阳性的D_(450)临界值为0.45。该方法仅与山羊关节炎-脑炎病毒阳性血清发生特异性反应,不与山羊痘病毒、蓝舌病病毒和口蹄疫病毒阳性血清发生交叉反应。对来自陕西地区的48份山羊血清进行CAEV抗体检测,rHis-CA ELISA和琼脂凝胶免疫扩散试验的阳性检出率分别为35.41%(17/48)和31.25%(15/48)。对来自天津地区2个山羊场的240份山羊血清样本进行CAEV抗体检测,rHis-CA ELISA方法和琼脂凝胶免疫扩散试验的检测结果均为阴性。

山羊关节炎-脑炎病毒陕西分离株全基因组的克隆和序列分析

为了解山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)陕西分离株全基因组的特点及基因演化变化,根据Gen-Bank中登录的CAEV CO株的全基因组序列,设计合成了5对引物,对CAEV陕西株的全基因组进行了PCR扩增,并对扩增产物进行了克隆和测序。结果显示,CAEV陕西株的基因组全长为9 065nt,获得的GenBank登录号为GU120138,包括两端的长末端重复序列,结构蛋白编码基因gag、pol、env和调节蛋白编码基因tat和rev,以及辅助蛋白编码基因vif。核苷酸序列比对表明,CAEV陕西株和CAEV甘肃株的同源性为99.6%,与CAEV CO株的同源性为92.4%,根据全基因组序列和gag基因序列构建的遗传进化分析结果显示,CAEV陕西分离株属于SRLV B2亚型。

山羊病毒性关节炎-脑炎诊断与防治

山羊病毒性关节炎-脑炎是由山羊病毒性关节炎-脑炎感染引起的,以慢性多发性关节炎伴随间质性肺炎或间质性乳房炎的病毒性传染性疾病。临床上不同年龄的羊感染该种病毒后,所表现的症状存在一定差异,成年羊主要呈现为关节炎脑炎症状,羔羊呈现脑脊髓炎临床特征。为更好地防范该类传染性疾病,需要掌握山羊病毒性关节炎-脑炎的具体流行特点、临床症状、病理变化和诊断方法,构建完善的防治措施,将病情控制在萌芽阶段,避免进一步传播蔓延造成严重的经济损失。

山羊病毒性关节炎-脑炎的诊断与预防

山羊病毒性关节炎-脑炎在全世界范围内均有流行,是阻碍羊养殖业发展的重要因素。了解该病发病特点,做好该病的诊断与防治,是降低该病危害性、提升山羊养殖经济效益的关键。本文在总结以往研究资料、自身养殖经验基础上,概述山羊病毒性关节炎-脑炎特点,介绍本病诊断方法、防治对策,希望能够为养殖户提供参考。

山羊病毒性关节炎-脑炎的流行病学及防控措施

山羊病毒性关节炎-脑炎是由山羊关节炎-脑炎病毒感染引起的病毒性传染病,病羊临床特征为成年羊慢性多发性关节炎、间发或伴发间质性肺炎和乳房炎,羔羊脑脊髓炎,由此导致羔羊高度的病死率和成年羊的淘汰率,给山羊养殖造成严重的经济损失。本文对山羊病毒性关节炎-脑炎的病原特征、流行病学特点、临床和病理特征、诊断和防控措施进行综述,为山羊病毒性关节炎-脑炎的防控提供参考。

奶山羊CAEV感染血清抗体的消长规律

【目的】研究山羊感染关节炎-脑炎病毒(Caprine arthritis encephalitis virus,CAEV)后血清总抗体的消长规律,为CAEV检疫、净化方案的制订提供参考数据。【方法】采用我国分离的CAEV山东株(试验组)、参考株ATCC VR-905(参考株对照组)和细胞培养基(阴性对照组)经颈静脉注射感染3~5月龄关中奶山羊9只(每组3只),选用OIE推荐的CAEV/MVV总抗体检测试剂盒(IDEXX)定期检测抗体。【结果】阴性对照组始终为阴性,试验组和参考株对照组在感染后第24 d出现抗体转阳个体,试验组在第42 d时全部转阳,参考株对照组在第71 d时全部转阳,且在后续监测期内抗体OD值均处较高水平并。【结论】山羊感染CAEV后能够产生较好的体液免疫应答,前2个月内抗体水平差异较大,抗体刺激起来后将持续处在较高水平。血清中CAEV总抗体水平可作为山羊CAE检疫的判断标准,但必须进行间隔期不少于60 d的2次以上的检疫。