解淀粉芽孢杆菌在山茶叶中的定殖及对山茶灰斑病的防效

【目的】解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是从山茶叶片内部分离得到的1株内生拮抗菌株,通过研究该菌株在山茶叶片表面和内部的定殖规律及其对山茶灰斑病的田间防治效果,为新型生防制剂的开发及山茶灰斑病的生物防治提供理论依据。【方法】采用抗生素标记法,结合比较标记菌株和非标记菌株的形态特征、拮抗能力、防病效果,筛选出最佳标记菌株;分别采用喷施和针刺法研究接种浓度、病原菌对生防菌在山茶叶表面及内部定殖动态的影响,并测定生防菌对山茶灰斑病的田间防治效果。【结果】从含500μg/mL链霉素抗性平板上得到最佳标记菌株,标记菌株与未标记菌株在形态特征、拮抗能力、防病效果方面均无明显差异。定殖试验表明,解淀粉芽孢杆菌能够高效定殖于山茶叶表面及内部,且叶表面的定殖较叶片内部更为高效、持久,其定殖量与接种浓度呈正相关,并在一定时间内维持相当数量,病原菌仅与叶表面定殖密切相关,与生防菌的叶内定殖无关。田间防治试验表明,生防菌解淀粉芽孢杆菌菌悬液对山茶灰斑病有显著生防效果,预先接种生防菌菌悬液后再接种病原菌的生防效果最好,防效为75.35%,先接种病原菌后喷施解淀粉芽孢杆菌菌悬液处理的防效为73.89%,同时接种生防菌菌悬液和病原菌时的防效最低,为72.95%。【结论】生防菌株B.amyloliquefaciens能够有效定殖于山茶叶片表面及内部,且对山茶灰斑病具有显著的生物防治效果。

山茶灰斑病病原菌的分离鉴定

山茶(Camellia japonica)属山茶科山茶属的常绿乔木或灌木,是传统的名贵花卉之一,具有极高的经济、生态和观赏价值。随着其在园林绿化中的普遍应用和生产基地面积的不断扩大,山茶病害发生逐渐呈上升趋势,严重影响产业发展。目前已报道的主要病害有山茶炭疽病、灰斑病、褐斑病、叶斑病等,常导致较大的经济损失。近年来,国内外报道的山茶灰斑病病原主要有污斑拟盘多毛孢(Pestalotiopsis maculans)、白珠树拟盘多毛孢(P.gaultheriae)[2]、长刚毛拟盘多毛孢(P.longiseta)[3]、山茶拟盘多毛孢(P.camelliae)[4]、葡萄牙拟盘多毛孢(P.portugalica)[5]等。

贵州山茶花灰斑病致病菌的分离与鉴定

为明确在贵州发现的山茶花灰斑病的致病菌。采用组织分离法和离体接种法分别对其病原菌进行分离和致病性测定,利用形态学及ITS基因序列分析对病原菌进行鉴定。鉴定结果表明:分离得到的致病菌菌株(编号为schb1),在PDA培养基上菌落边缘缺刻状,呈现出很明显的褶皱微凸面,气生菌丝呈白色,背面黄褐色。根据显微观察结果,分生孢子较多,呈纺锤形,分生孢子顶生附着丝1~2根。在以ITS基因序列构建的系统发育树中,schb1与葡萄牙拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis portugallica)聚于一支,且支持率达100%,结合形态特征与系统发育分析将其鉴定为葡萄牙拟盘多毛孢菌。