山药牛髓粉对H2O2诱导的成骨细胞ME3T3-E1氧化应激损伤的改善作用机制

为研究山药牛髓粉(SN)对H2O2诱导的成骨细胞ME3T3-E1氧化应激损伤的改善作用,通过MTT法测定细胞存活率,并筛选出适宜的SN给药剂量及H2O2造模剂量;将细胞分为对照组、模型组及给药+造模组,用超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)试剂盒及活性氧(ROS)水平测定经氧化损伤后SN的改善能力。通过碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARS)染色进行细胞矿化水平检测,并以蛋白印迹法(Western Blot)检测成骨功能相关蛋白的表达情况。确定SN给药剂量是2 mg/mL,造模剂量是30μM。与模型组相比,T-AOC、SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),ROS水平显著下降(P<0.05);SN上调成骨细胞ALP活性和钙结节矿化;成骨相关基因Bone sialoProtein(BSP)和OsteoPontin(OPN)的表达均显著升高。结果表明H2O2能够抑制成骨细胞的增殖,提高细胞碱性磷酸酶的表达,进而促进成骨细胞的增殖与修复,也能明显上调成骨功能相关蛋白的表达。