山莓叶醇提物对不同模型小鼠腹泻的影响

本文研究了山莓叶醇提物(RE)对四种不同类型小鼠腹泻的影响。采用番泻叶、蓖麻油、硫酸镁、致泻大肠埃希氏菌建立不同小鼠腹泻模型,分别设置空白对照组(BC)、模型组(MC)、阳性药物组、山莓叶醇提物高(RH)、中(RM)、低剂量组(RL)6个组,观察稀便数、稀便级,计算腹泻指数。结果表明,与MC相比,RE对抗番泻叶所致小鼠腹泻0～3 h内的腹泻指数均极显著降低(P<0.01);RH和RM对抗蓖麻油所致小鼠腹泻0～5 h内的腹泻指数均显著降低(P<0.05);RM对抗大肠埃希氏菌所致小鼠腹泻0～2 h内的腹泻指数极显著降低(P<0.01);RM和RH对抗硫酸镁所致小鼠腹泻指数均仅在0～1 h内明显降低(P<0.01)。山莓叶醇提物对番泻叶、蓖麻油和致泻大肠埃希氏菌导致的小鼠腹泻有显著抑制作用,对硫酸镁所致腹泻的干预作用较弱。

山莓叶挥发油成分分析及抑菌活性研究

目的:研究山莓叶挥发油的化学成分及抗菌活性。方法:用水蒸气蒸馏法提取山莓叶挥发油,利用GC-MS联用仪和Xcalibur软件对山莓叶挥发油的化学成分进行分析鉴定,并采用K-B滤纸片法对其抗菌活性进行研究。结果:鉴定其中44个化合物,占挥发油总量的88.52%;挥发油浓度为50%时具有很好的杀菌作用;挥发油的浓度为0.5%仍具有很好的抑菌作用。结论:该结果为山莓叶的应用提供了依据。

山莓叶乙醇提取物与抗生素的协同抑菌效果研究

采用K-B纸片法检测山莓叶乙醇提取物（RE）、抗生素对3种致病菌（大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、沙门氏菌）的最低抑菌浓度（MIC）,再将RE与抗生素联合使用,用棋盘法与K-B纸片法相结合进行抑菌效果评价.结果显示：对于大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、沙门氏菌,RE的MIC分别为6.250、6.250、3.125 mg/mL;RE与金霉素协同使用的分级抑菌浓度（FIC）最小值分别为0.313、0.375和0.313,协同抑菌效果最好的配比分别为1/8MIC1∶1/2MIC2、1/4MIC1∶1/2MIC2和1/8MIC1∶ 1/2MIC2;RE与净球散协同的FIC最小值分别为0.375、0.313和0.375,协同抑菌效果最好的配比分别为1/4MIC1∶1/2MIC2、1/8MIC1∶1/2MIC2和1/4MIC1∶1/2MIC2.大肠杆菌、痢疾志贺氏菌和沙门氏菌山莓叶乙醇提取物的浓度控制在1/4～1/8MIC1,金霉素和净球散浓度均为1/2MIC2,均有较强的协同抑菌效果.

荧光法研究山莓叶提取物清除羟自由基的活性

在稀硫酸介质中,荧光染料亮绿(LGSF)在312nm处产生荧光,Fenton反应产生的.OH与亮绿反应,使其荧光猝灭。根据此原理,荧光光度法测定山莓叶不同萃取物清除自由基活性存在很大差异。同时,当提取物浓度达到0.40mg/mL时自由基清除率分别可达到27.34%,38.65%,40.22%,41.68%,其中,山莓叶正丁醇萃取物清除羟自由基活性最强。本研究为山莓叶的合理开发利用提供理论依据。

山莓叶化学成分分析及其生物碱的抗菌作用

采用试管法和圆形滤纸层析法,鉴定了山莓叶的化学成分,结果表明其含有生物碱、有机酸、黄酮及其甙类、多糖、香豆素及内酯,酚性成分、鞣质、多肽及蛋白质、皂甙、三帖类、蒽醌、强心苷等多种物质。采用有机溶剂提取法分离提取其抗菌有效成分-生物碱,并用其对几种兽医临床常见病原微生物进行体外抑菌试验,结果表明:山莓叶所含总生物碱对金色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌都有明显的抑菌作用,最低抑菌浓度分别为:0.125 g/mL,0.25 g/mL,0.125 g/mL,0.5 g/mL,0.125 g/mL。

山莓叶抑制家兔离体肠管运动活性物的分离纯化及活性研究

为明确山莓叶中抗腹泻的药效成分,利用溶剂萃取、常压柱层析、中压柱层析对山莓叶中的活性成分进行分离纯化,采用家兔离体肠实验检测抗腹泻活性,并对活性单体进行结构鉴定。结果表明:山莓叶中抑制离体肠效果好的化合物是对羟基肉桂酸乙酯,当其浓度为20 mg/m L时,离体肠张力增量的变化率达到70.0%,强于阿托品的抑制效果。

山莓叶总黄酮含量测定方法的建立

以湖南省湘西吉首山莓叶为研究对象,通过紫外扫描比较了标准对照品芦丁和山莓叶提取物在NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH和AlCl_3两种显色体系下的吸收特性,结果表明,NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH显色体系更适合山莓叶中总黄酮含量的测定,标准曲线回归方程A=0.021357+1.302165C,芦丁在0.0000-0.0515mg/mL范围内的浓度和吸光度线性关系良好,相关系数R=0.9968,平均回收率为99.0%。采用此方法测定了春秋两季山莓叶中总黄酮的含量,精密度高、重现性好,适用于山莓叶总黄酮的定量分析。

湘西山莓叶挥发油化学成分及其抗氧化、抑菌活性研究

目的:研究湘西山莓叶挥发油化学成分,及其抗氧化活性、抑菌作用,为山莓叶挥发油的进一步开发利用提供基础依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取山莓叶挥发油,通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术确定其中化学成分与相对百分含量。运用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法评价山莓叶挥发油清除自由基能力,刃天青96孔板微量稀释法测试五种供试菌的抑菌作用。结果:鉴定山莓叶挥发油19种成分,占挥发油总质量的87.54%,其中酚类及含氧衍生物63.55%,烃类19.79%,酯类2.54%,醛类1.66%。山莓叶挥发油对DPPH自由基的清除呈量效关系,但效果弱于芦丁和Vc,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、苏云金杆菌、沙门氏菌、痢疾志贺氏菌等五种供试菌均有抑菌作用,其中对痢疾志贺杆菌MIC为15.6μg/mL,效果明显好于卡拉霉素标准品。结论:山莓叶挥发油体外抗氧化能力相对较弱,对痢疾志贺杆菌抑制作用显著。

山莓叶挥发油化学成分的分析

本研究以水蒸气蒸馏法提取山莓叶挥发油,气相色谱-质谱法(GC-MS)鉴定挥发油的成分,峰面积归一化法确定各成分的相对含量,结果表明:山莓叶挥发油含化学成分133种,其中88种成分得以鉴定;在挥发油成分中,二十一烷(C21H44)相对含量最多,为15.7%,其次为植物醇(C20H40O)和(+)-香橙烯(C15H24),相对含量依次为12.3%,7.98%。

山莓叶挥发油提取优化及GC特征图谱比较

目的:优化山莓叶挥发油提取条件,建立山莓叶挥发油特征图谱。方法:采用水蒸馏提取、同时蒸馏萃取、微波辅助提取山莓叶挥发油,通过正交实验优化微波辅助条件,提取不同采收期山莓叶的挥发油,运用GC测定比较。结果:上述方法提取山莓叶挥发油得率分别0.203%、0.208%、0.278%。微波辅助最优条件为微波时间2 h、微波功率120 w、料液比1∶10。7月采收的山莓叶挥发油得率达到0.46%。不同采收期的挥发油GC图谱中八个共有峰,其占百分比在81%以上。结论:微波辅助提取方法稳定可靠,特征图谱方法简便,为山莓叶挥发油综合评价提供依据。

利用兔离体肠模型研究山莓叶的抗腹泻作用机理

以山莓叶醇提物(RE)和对羟基肉桂酸乙酯(EC,活性跟踪分离到的山莓叶中活性较强的物质)为材料,以兔离体肠运动为模型,研究了RE和EC抑制肠管运动的剂量效应,同时考察了RE和EC分别与抗腹泻相关的4个关键通道的4种致痉剂(乙酰胆碱、酚妥拉明、组胺和氯化钡)对肠管运动的影响。结果表明:RE浓度为1~10 mg/m L范围内,肠管的张力增量变化率(TVP)均为30%以上,且RE浓度为4 mg/m L时,TVP达到45.37%;浓度10~800μg/m L范围内,EC对肠管运动的抑制作用均极显著高于阿托品(P<0.01),且EC浓度为400μg/m L时,TVP达到最大(70.45%);RE主要通过作用于乙酰胆碱通道胆碱能M受体和组胺通道来抑制肠管运动;EC主要通过作用于肾上腺素α受体、组胺通道和钙离子通道来抑制肠管运动。因此,RE和EC是抗腹泻的高效的多靶点药物,且RE中的EC的抗腹泻效果极显著优于阿托品。

山莓叶成分的高效液相色谱-串联质谱分析

目的分析湘西常用于医治腹泻的苗药山莓叶的成分。方法采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)联用技术分析山莓叶甲醇提取物,根据紫外光谱、负离子模式下的一级和二级质谱信息,与文献数据和部分对照品对照,推测化合物的结构。结果推测了山莓叶中7种化合物的结构,其中3种为黄酮苷类化合物。结论对山莓叶化学成分有了进一步认识,为山莓叶资源的开发提供了依据。

山莓叶抑制兔离体肠运动活性物质的提取及活性稳定性研究

本研究以山莓叶为原料，以兔离体肠运动为模型，80％乙醇提取舌采用4种不同极性溶剂进行提取，筛选具有抗腹泻的活性组分，并考察温度、DH、光质、光照时间和脱鞣质处理对粗提物抑制兔离体肠运动活性的影响。结果表明：山莓叶抑制兔离体肠运动的活性物质主要在乙酸乙酯层，其它层提取物的活性大小依次为：石油醚层〉水层〉正丁醇层〉氯仿层；山莓叶醇提物在30℃~60℃范围内抑制兔离体肠运动活性稳定，高温（90℃和120℃璨件下离体肠的张力增量变化率较30℃处理分别下降了15．43％和32．45％；pH对抑制肠运动活性影响较大，酸性条件下活性最高，其次是中性，碱性条件下抑制其活性，pH12处理后张力增量变化率仅为11．90％；不同光质和不同光照时间处理后仍具有极显著抑制兔离体肠运动的作用（P〈0．01）；脱鞣质处理会使山莓叶醇提物抑制肠运动活性减弱，说明鞣质可能是山莓叶抗腹泻活性成分之一。