基于mtDNA COⅠ基因序列的山香圆平背粉虱遗传多样性分析

为探究茶树害虫山香圆平背粉虱(Crenidorsum turpiniae)的遗传多样性,掌握山香圆平背粉虱的遗传分化现状及精准防控提供理论依据,通过基因组DNA提取、PCR扩增与测序,测定贵州省11个不同地理区域的山香圆平背粉虱种群mtDNA COⅠ基因序列片段,开展基因序列特征、单倍型及遗传多样性、遗传分化与基因交流、分子变异和单倍型系统发育分析。结果表明,山香圆平背粉虱mtDNA COⅠ基因序列片段扩增长度均为658 bp,序列具有明显的A+T偏倚性,共定义10个单倍型。贵州茶园山香圆平背粉虱总群体遗传多样性较高,表现出高单倍型多样性(Hd=0.800)和高核苷酸多样性(Pi=0.067 0)。11个地理种群的山香圆平背粉虱总群体遗传分化程度高(Fst=0.920 3),基因交流水平低(Nm=0.04)。AMOVA分析显示,山香圆平背粉虱的遗传变异主要来自组间(FCT=0.912 9);中性检验与错配分布分析综合表明,山香圆平背粉虱近期未发生过明显扩张现象;单倍型系统发育分析及中介网络图聚类结果均表明,山香圆平背粉虱聚为3分支,分化枝可能已达物种水平。

超声波辅助酶法提取山香圆叶中总黄酮的工艺优化

利用超声波辅助酶法提取山香圆叶中的总黄酮,选取纤维素酶添加量、超声时间、酶解时间为提取因素,以黄酮提取率为响应值,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken响应面法设计三因素三水平的优化试验。结果表明:优化后的工艺为纤维素酶添加量4mg、超声时间43min、酶解时间63min,在此条件下测得山香圆叶黄酮提取率为2.65%。该方法提取工艺简便、高效、没有有机溶剂残留,可为山香圆叶中总黄酮的提取提供参考。

山香圆有效成分的制备及HPLC测定质量标准建立

制备山香圆中有效成分女贞苷,并通过高效液相色谱(HPLC)建立了质量标准。以70%乙醇为溶剂加压提取山香圆中有效成分女贞苷,并以女贞苷得率为指标优化提取条件。结果显示,山香圆中有效成分女贞苷的较佳提取工艺:料液比为1∶30(g∶mL),提取温度为90℃,萃取时间为2.0 h;较佳纯化工艺:提取溶剂流速为1.0 mL/min,洗脱溶剂流速为2.0 BV/h,洗脱溶剂体积为2.0 BV/h。采用HPLC,C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为甲醇,B相为0.5%磷酸,流速为1.0 mL/min,检测波长为360 nm,柱温为室温;结果表明,女贞苷均在0.309~39.126μg/mL范围内线性关系良好(r2=0.9999),重复性RSD<4.0%(n=6),稳定性(24 h内)RSD<2.0%(n=6),平均加样回收率为95%~105%。山香圆有效成分制备工艺简单,HPLC测定质量标准方法简便、准确,重复性好,可为将来山香圆有效成分含量质量控制提供实验依据。

基于rDNA ITS 1基因序列的贵州山香圆平背粉虱遗传分化分析

【目的】探明茶树害虫山香圆平背粉虱不同地理种群的遗传多样性,掌握其遗传分化现状,为其科学防治提供依据。【方法】基于贵州茶园山香圆平背粉虱10个地理种群的rDNA ITS1基因序列片段,采用MEGA-X、DnaSP 5.10、Arlequin 3.5.2.2及SAMOVA 2.0等研究其种群遗传分化、基因交流、分子变异及种群遗传多样性。【结果】贵州茶园山香圆平背粉虱10个地理种群的rDNA ITS1基因序列共获得68条基因序列片段,其序列长度为434 bp,包含保守位点306个,变异位点78个,简约信息位点48个,其中9个位点发生转换,9个位点发生颠换,具有明显的G+C偏倚性;其共定义47个单倍型,包括5个共享单倍型和42个独享单倍型;总群体遗传多样性较高,表现出高单倍型多样性(H_(d)=0.968)和高核苷酸多样性(P_(i)=0.03628);总群体遗传分化程度高(F_(st)=0.72460),基因交流水平低(N_(m)=0.10);遗传变异主要来自组间(F ct=0.64620);单倍型系统发育分析表明,山香圆平背粉虱聚为两分支,MT、YQ、FG与SY种群聚成一类,MT、DZ、RH、HX、QX、JS与HHG种群聚成一类。【结论】贵州茶园山香圆平背粉虱总体遗传多样性水平较高,基因交流水平较低,具有显著的遗传分化。

药用山香圆苗木繁育关键技术

近年来,作为重要药用植物的山香圆资源被掠夺性利用,造成野生山香圆资源匮乏,远远不能满足药材市场的需求。为解决山香圆苗木人工繁育的问题,文中对山香圆扦插育苗(包括大田扦插及容器袋扦插)和种子育苗的关键技术进行了阐述。

山香圆叶化学成分的研究(一)

山香圆为省沽油科山香圆属植物的山香圆(Turpinia arguta seem.),我们从其叶的醇提取物中,分离出结晶甲和乙两个单体。本文主要报道结晶甲的分离和化学结构测定工作。经熔点、比旋光度、衍生物制备及四大光谱等一系列理化常数综合解析,确证结晶甲为2α,3β-二羟基熊果-12-烯-28-羧酸(2α,3β-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid)。

山香圆叶及其制剂的研究进展

按照中药材生产质量管理规范和药品生产质量管理规范等要求,根据我司山香圆叶生产技术规程,结合药理研究、临床应用、中国法典收载和国家药监部门网站信息等研究进展,以期通过学习、吸收、消化、再创新,为山香圆叶及制剂进一步研究和开发利用提供参考,保证药品生产更合理、药品质量控制更精准、药品临床使用更有效,推动中医药相关产业持续发展。

基于响应面法优化超声辅助提取山香圆叶多糖工艺（英文）

目的优化山香圆叶多糖提取工艺,获得最大多糖得率。方法应用响应面法联合Plackett-Burman设计、最陡爬坡法和Box-Behnken设计来获取山香圆叶多糖最佳提取工艺。利用Plackett-Burman设计筛选对多糖得率显著影响的因素,利用最陡爬坡法使各因素快速逼近最佳响应区域,采用Box-Behnken设计和响应面法来进一步研究各因素之间的相互作用,并得出最优值。结果 Plackett-Burman设计筛选出三个对多糖得率显著影响的因素:酶浓度、提取时间和液固比。在进一步研究中得到最大得率的最优条件为:酶浓度2.8%、提取时间为41 min和液固比为27 mL/g。在最优条件下山香圆叶多糖得率为3.08%,与预测值3.11%接近。结论本研究优化了山香圆叶多糖的提取工艺,有利于山香圆叶多糖后续的生产和利用。

山香圆总黄酮体外对大鼠佐剂性关节炎免疫功能的影响

目的观察山香圆总黄酮（total flavonoids of turpinia arguta seen，TFS）体外对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）大鼠免疫功能的影响。方法选择健康♂SD大鼠，采用弗氏完全佐剂（freunds complete adjuvant，FCA）诱导AA大鼠模型：将同一批号的的卡介苗80℃水浴1h灭活，用灭菌液体石蜡配成10g·L^-1的乳剂。d28处死大鼠，取AA大鼠的免疫细胞（脾细胞和腹腔巨噬细胞）体外给药培养并检测一些免疫指标：细胞增殖法检测ConA、LPS诱导的大鼠脾淋巴细胞增殖反应及IL-1、IL-2的分泌水平；放免法检测PGE2水平。结果与正常组相比，AA大鼠ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞增殖功能低下，脾淋巴细胞产生的IL-2活性下降，LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生的IL-1、PGE2水平明显升高。TFS（10^-8～10^-4）mg·L^-1可纠正AA大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应和脾细胞IL-2的产生，降低AA大鼠腹腔巨噬细胞产生过高的IL-1和PGE2。结论山香圆总黄酮对AA大鼠的异常免疫功能具有调节作用。

山香圆总黄酮的抗炎作用

目的 研究山香圆总黄酮 (TFS)的抗炎作用。方法 采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和福氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎模型。结果 TFS对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和福氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎具有抑制作用。结论 TFS具有较强的抗炎作用。

山香圆化学成分及药理活性的研究进展

山香圆具有抗菌、抗炎、镇痛等药理作用。现对山香圆的化学成分、药理作用及临床应用等的研究进展做一综述,以期为进一步研究和开发利用提供参考。

山香圆总黄酮对慢性咽炎模型大鼠NF-κB、IκBα表达的影响

以2.5%氨水喷咽部建立大鼠慢性咽炎模型,用HE染色法观察咽部病理形态学改变,用ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6,用RT-qPCR测定咽部组织NF-κBp65mRNA的表达,用Western blot检测咽部组织NF-κBp65和IκBα蛋白的表达,探讨山香圆总黄酮对慢性咽炎模型大鼠NF-κB、IκBα表达的影响.结果显示:山香圆总黄酮能明显改善模型大鼠咽部病理形态学;与模型组比较,山香圆总黄酮各组能不同程度地下调TNF-α、IL-1β、IL-6和NF-κBp65的表达并上调IκBα的表达,其中高剂量组最显著.这表明山香圆总黄酮能通过抑制NF-κB的表达和IκBα的解离下调炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,从而减轻炎症,发挥抗慢性咽炎作用.

山香圆属药学研究综述

对山香圆属的种属、成分、药理、临床应用等研究进行了综述,为深入开发利用提供科学依据。

山香圆含片的制备工艺研究

目的 :研究山香圆含片的制备工艺 ,优选最佳工艺。方法 :不同方法制备的山香圆叶进行抑菌试验、熊果酸含量比较。结果 :最佳制备工艺是 :将山香圆叶粗粉 ,用 70 %乙醇作溶剂 ,浸渍 72h ,渗漉 ,渗漉液浓缩 (d =1.2 0 ) ,以糖粉、糊精为基料 ,喷干制粒 ,压制成山香圆含片。结论 :山香圆含片的制备工艺合理。

山香圆叶化学成分研究

目的研究山香圆叶的化学成分。方法采用色谱技术进行分离、纯化，通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构。结果从山香圆叶中分离出10个化合物，分别为芹菜素（1），芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷（2），芹菜素。7-新橙皮糖苷（3），芹菜素-7-（2’-α-L-鼠李糖基）芸香糖苷（4），对羟基桂皮酸（5），没食子酸乙酯（6），没食子酸（7），eucomic acid（8），β-谷甾醇（9），胡萝卜苷（10）。结论化合物4～6，8，9为首次从该属植物中分离得到。

山香圆颗粒联合抗病毒颗粒治疗小儿急性上呼吸道感染的临床疗效和安全性

目的:观察山香圆颗粒联合抗病毒颗粒治疗小儿急性上呼吸道感染的临床疗效和安全性观察。方法:将812例急性上呼吸道感染患儿随机分组,其中治疗组406例,给予山香圆颗粒联合抗病毒颗粒治疗;对照组406例,给予抗病毒颗粒治疗;疗程均为3d。观察两组患儿临床治疗效果以及不良反应情况。并对比其流涕及鼻塞停止时间、退热时间、咽部充血消失时间以及咳嗽停止时间。结果:治疗组各项临床时间指标均短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患儿治疗过程中及治疗后均无不良反应发生;治疗组总有效率为91.6%,高于对照组的78.3%,差异显著(P<0.05)。结论:山香圆颗粒联合抗病毒颗粒治疗小儿急性上呼吸道感染安全性较高,临床疗效显著,无不良反应情况发生,值得临床推广应用。

山香圆含片治疗急性咽炎30例疗效观察

应用随机对照的方法评价了新中药山香圆含片治疗急性咽炎患者 30例的疗效和安全性。结果表明 ,其总有效率和显效率为 86.7%和 60 .0 % ,与对照组山香圆片的 80 .0 %和 5 5 .0 %比较 ,差别无统计学意义。两组的不良反应发生率分别为 6.7%和 5 .0 %。这表明山香圆含片临床应用是安全有效。

山香圆总黄酮提取工艺的研究

目的优化山香圆总黄酮提取工艺。方法采用乙醇回流浸提法,在单因素分析的基础上,通过L16(45)正交试验,优选出山香圆总黄酮的提取工艺。结果山香圆总黄酮的最佳提取工艺为:提取温度60℃、时间1.5 h、乙醇体积分数90%、料液比1:50、提取次数4次。结论该法适用于山香圆总黄酮的提取制备。

正交优化-微波辅助提取山香圆叶总黄酮的工艺研究

目的:研究微波辅助提取山香圆叶总黄酮的最佳工艺条件。方法:以总黄酮得率为指标,采用单因素试验与正交试验相结合的方法,优化微波辅助提取山香圆叶中总黄酮的提取工艺条件。结果:微波辅助法提取山香圆总黄酮的最佳工艺条件为乙醇浓度70%,微波辐射时间为6 min,微波功率为600 w,料液比为1∶40(g/mL)。在此条件下测得的提取率为1.606%。结论:微波辅助提取法可用于山香圆总黄酮的提取,其中乙醇浓度对总黄酮的提取有显著影响。