山香圆叶及其制剂的研究进展

按照中药材生产质量管理规范和药品生产质量管理规范等要求,根据我司山香圆叶生产技术规程,结合药理研究、临床应用、中国法典收载和国家药监部门网站信息等研究进展,以期通过学习、吸收、消化、再创新,为山香圆叶及制剂进一步研究和开发利用提供参考,保证药品生产更合理、药品质量控制更精准、药品临床使用更有效,推动中医药相关产业持续发展。

山香圆叶化学成分研究

目的研究山香圆叶的化学成分。方法采用色谱技术进行分离、纯化，通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构。结果从山香圆叶中分离出10个化合物，分别为芹菜素（1），芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷（2），芹菜素。7-新橙皮糖苷（3），芹菜素-7-（2’-α-L-鼠李糖基）芸香糖苷（4），对羟基桂皮酸（5），没食子酸乙酯（6），没食子酸（7），eucomic acid（8），β-谷甾醇（9），胡萝卜苷（10）。结论化合物4～6，8，9为首次从该属植物中分离得到。

正交优化-微波辅助提取山香圆叶总黄酮的工艺研究

目的:研究微波辅助提取山香圆叶总黄酮的最佳工艺条件。方法:以总黄酮得率为指标,采用单因素试验与正交试验相结合的方法,优化微波辅助提取山香圆叶中总黄酮的提取工艺条件。结果:微波辅助法提取山香圆总黄酮的最佳工艺条件为乙醇浓度70%,微波辐射时间为6 min,微波功率为600 w,料液比为1∶40(g/mL)。在此条件下测得的提取率为1.606%。结论:微波辅助提取法可用于山香圆总黄酮的提取,其中乙醇浓度对总黄酮的提取有显著影响。

山香圆叶挥发油化学成分及抗氧化和抗炎活性研究

山香圆叶具有较好的临床疗效,但其挥发油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文应用超临界萃取法提取其挥发油,采用GC-MS对其小极性物质进行全面分析(甲酯化和非甲酯化),并对其中等极性物质进行LC-MS分析,采用了DPPH法和ABTS法测定了其抗氧化活性,采用LPS诱导RAW 264.7细胞模型探索山香圆叶挥发油的抗炎活性。GC-MS非甲酯化和甲酯化分别鉴定了38和42个化合物,主要为亚油酸、γ-谷甾醇、角鲨烯、2,2′-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、反-9-十八碳烯酸、棕榈酸等物质。LC-MS的正负离子模式下,共鉴定出256个化合物,主要为萜类、苯丙素类、酚类、黄酮类、生物碱类、香豆素及其衍生物类、脂肪酰类、倍半萜类、脂肪酸类等化合物。活性研究表明,山香圆叶挥发油具有较好的抗DPPH和ABTS自由基能力,同时能显著抑制LPS诱导RAW 264.7细胞NO和IL-6的释放量,且成剂量依赖性。以上结果表明,山香圆叶挥发油具有较复杂的化学成分,并具有较好的抗氧化和抗炎作用,可作为开发功能性食品和药品的天然来源。

山香圆叶药材高效液相指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法(HPLC)对山香圆叶药材的指纹图谱进行分析。方法色谱柱为Eclipse XDB-C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸水溶液,进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长200~400 nm。结果建立了山香圆叶药材高效液相指纹图谱,并得到了10个共有峰,相似度在0.85~0.98。结论此方法稳定可靠,重复性良好,可为山香圆叶药材质量控制提供参考。

山香圆叶提取物对文昌鸡生长性能、血清免疫和抗氧化功能以及肠道微生物的影响

本试验旨在研究饲粮中添加山香圆叶提取物(TFE)对文昌鸡生长性能、血清免疫和抗氧化功能及肠道微生物的影响。选择同批次的42日龄雌性文昌鸡432羽,随机分为4组,每组6个重复,每个重复18羽。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中分别添加0.015%、0.030%、0.060%TFE的试验饲粮,试验期为42 d。结果表明:1)随着饲粮中TFE添加水平的增加,文昌鸡终末体重呈显著线性升高(P<0.05),料重比(F/G)呈显著线性和二次曲线变化(P<0.05)。与对照组相比,添加0.030%和0.060%的TFE显著提高了文昌鸡的平均日增重(ADG)(P<0.05)。2)随着TFE添加水平的增加,文昌鸡血清总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量呈显著线性和二次曲线变化(P<0.05),血清免疫球蛋白M(IgM)含量呈显著线性增加(P<0.05)。与对照组相比,添加0.030%和0.060%的TFE显著提高了血清免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)含量(P<0.05),显著降低了血清丙二醛(MDA)、IL-6和TNF-α含量;添加0.060%的TFE显著提高了血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和IL-10含量(P<0.05),不同添加水平的TFE均显著提高了文昌鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05),显著降低了血清IL-1β含量(P<0.05)。3)随着TFE添加水平的增加,空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度呈显著线性和二次曲线变化(P<0.05)。4)与对照组相比,添加0.060%的TFE显著降低了盲肠变形菌门相对丰度(P<0.05),显著提高了粪肠杆菌属和乳酸杆菌属的相对丰度(P<0.05)。5)通过二次函数拟合,确定TFE最适添加水平为0.056%。综上所述,饲粮中添加TFE能够改善文昌鸡生长性能,提高文昌鸡血清免疫和抗氧化功能,可以通过提高血清抗炎因子含量,降低促炎因子含量,从而缓解机体炎症损伤,改善肠道组织形态,促进肠道对营养物质的吸收。本试验条件下,推荐42~84日龄文昌鸡TFE最适添加水平为0.056%。

山香圆叶提取物对湿热条件下文昌鸡生长性能、屠宰性能、血清免疫和抗氧化功能及肠道微生态的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平山香圆叶提取物(TFE)对夏季自然湿热条件下文昌鸡生长性能、屠宰性能、血清免疫和抗氧化功能及肠道微生态的影响。选取同一饲养条件下生长至84日龄、体重接近的健康文昌鸡母鸡240羽,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽。对照组饲喂不添加TFE的基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中分别添加0.02%、0.04%、0.08%TFE的试验饲粮,试验期为35 d,整个饲养期舍内处于湿热环境(日均温度28.26~34.80℃,日均相对湿度67.00%~87.58%)。结果表明:1)随着饲粮TFE添加水平的增加,平均日增重(ADG)呈显著线性(P=0.004)和二次曲线(P=0.001)变化。与对照组相比,试验组料重比(F/G)呈下降趋势(0.05≤P<0.10)。2)与对照组相比,试验组血清总蛋白(TP)、免疫球蛋白M(IgM)、胰岛素(INS)含量呈升高趋势(0.05≤P<0.10);随着饲粮TFE添加水平的增加,血清白细胞介素-10(IL-10)含量呈显著线性(P=0.002)和二次曲线(P=0.006)变化;血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量呈显著线性(P=0.004,P=0.005)和二次曲线(P=0.009,P=0.005)变化。与对照组相比,饲粮添加0.04%和0.08%TFE显著降低了血清葡萄糖(GLU)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、热应激蛋白70(HSP70)和丙二醛(MDA)含量(P<0.05),显著提高了血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、IL-10含量以及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05)。3)随着饲粮TFE添加水平增加,脾脏指数呈显著二次曲线变化(P=0.043)。4)0.04%和0.08%TFE组空肠绒毛高(VH)和绒毛高度/隐窝深度(VH/CD)显著高于对照组(P<0.05)。5)随着饲粮TFE添加水平的增加,盲肠变形菌门相对丰度呈显著线性(P=0.016)和二次曲线(P=0.011)变化。与对照组相比,试验组双歧杆菌属相对丰度呈增加趋势(0.05≤P<0.10)。与对照组相比,饲粮添加0.04%和0.08%TFE显著降低了盲肠梭杆菌门和普雷沃氏菌科_UCG-001相对丰度(P<0.05);添加0.08%TFE显著提高了盲肠厚壁菌门和乳酸菌属相对丰度(P<0.05)。综上所述,在饲粮中添加TFE可提高文昌鸡的生长性能,增强血清免疫和抗氧化功能,改善肠道黏膜形态,调节肠道菌群,缓解夏季湿热对机体的炎症损伤。在本试验条件下,基于回归模型分析,文昌鸡饲粮中TFE的适宜添加水平为0.067%。

山香圆叶化学成分的研究

目的:对省沽油科山香圆属植物山香圆Turpinia arguta Seem.叶乙醇提取物的正丁醇部位的化学成分进行研究。方法:通过大孔树脂柱层析、聚酰胺柱层析、硅胶柱层析、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和制备液相等色谱技术进行分离纯化,并应用核磁共振(NMR)以及质谱等波谱技术进行化合物结构鉴定。结果:从山香圆叶中分离鉴定了12个化合物,分别为:科罗索酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、坡模酸(2)、23-羟基齐墩果酸(3)、积雪草苷A(4)、2α,3α,23-三羟乌苏酸(5)、乌苏酸(6)、咖啡酸(7)、3,4-二羟基苯甲酸(8)、对羟基苯甲酸(9)、绿原酸(10)、对羟基肉桂酸(11)、没食子酸(12)。结论:其中,化合物1、3~5、7~10为首次从该植物中分离得到。

不同产地山香圆叶药材的质量评价

目的对不同产地山香圆叶药材进行质量研究,以确定优质山香圆叶的产区。方法按照2010版《中国药典》Ⅰ部山香圆叶含量测定方法,测定不同产地山香圆叶中女贞苷和野漆树苷的含量。结果来自江西山香药业有限公司安远基地种植的山香圆叶药材质量最优,其女贞苷和野漆树苷的含量最高,且远高于2010版《中国药典》含量标准。结论不同产地的山香圆叶药材中女贞苷和野漆树苷的含量有显著的差异,为推广种植山香圆基地的选择提供参考依据。

HPLC法测定不同产地山香圆叶中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的:测定不同产地山香圆叶中齐墩果酸和熊果酸的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为ACE Excel 3 C_(18)-AR(4.6 mm×150 mm,3μm);以甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为20℃,检测波长为210 nm。结果:齐墩果酸在5.7803~17.3409μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率(n=9)为100.3%;熊果酸在12.1703~36.5110μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率(n=9)为96.9%。结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于山香圆叶中齐墩果酸和熊果酸的含量测定。

山香圆叶饮片

炮制：除去杂质，喷淋清水，稍润，切丝，干燥。性味：苦，寒。归经：归肺、肝经。功能：清热解毒，利咽消肿，活血止痛。主治：用于乳蛾喉痹，咽喉肿痛，疮疡肿毒，跌扑伤痛。

山香圆叶中黄酮苷类成分及其抗炎活性研究

应用大孔树脂、聚酰胺、Sephadex LH-20,HPLC等各种色谱技术对山香圆叶95%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水部位进行分离纯化,分离得到8个黄酮苷类化合物,采用NMR等谱学方法分别鉴定为:野漆树苷(1),女贞苷(2),刺槐素-7-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),刺槐素-7-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(密蒙花新苷,4),木犀草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),金圣草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),刺槐素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(蒙花苷,7),芹菜素6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。其中化合物3～8为首次从该植物中分离获得。采用脂多糖(LPS)刺激RAM264.7巨噬细胞炎症模型对分离得到的化合物进行抗炎活性评价,结果表明化合物2,3在1×10-5mol.L-1浓度下,对LPS刺激RAW264.7细胞NO生成的抑制率分别为33.7%和23.8%,提示化合物2,3具有较弱的抗炎活性。

大孔树脂纯化山香圆叶中的总黄酮

目的研究大孔树脂纯化山香圆叶中总黄酮的工艺条件。方法采用静态吸附法筛选6种大孔树脂,再用动态吸附法优化山香圆叶中总黄酮的纯化工艺。结果山香圆叶中总黄酮的最佳纯化工艺为:上样浓度为0.1 g·m L-1(以生药计),上样速率为2 BV·h-1,上样体积为2 BV,用2 BV去离子水洗脱、5 BV 50%乙醇以2 BV·h-1的速率洗脱;在此工艺下,总黄酮的转移率为60.48%,产物中总黄酮的纯度为41.11%。结论 HPD400型大孔树脂对山香圆叶中总黄酮有良好的纯化效果。

薄层扫描法测定山香圆叶中熊果酸的含量

应用薄层扫描法测定山香圆叶中熊果酸的含量，回收率为97．8％，RSD为2．01％．该法准确、可靠．

山香圆叶药材中鞣花酸的提取分离与含量测定

目的：建立山香圆叶药材中鞣花酸的制备工艺及含量测定方法，比较不同产地山香圆叶药材中鞣花酸的含量。方法：采用溶剂提取、大孔树脂及反相硅胶柱色谱和重结晶等提取分离手段得到鞣花酸对照品；用高效液相色谱法测定山香圆叶药材中鞣花酸的含量，Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mm250 mm，5 μm），流动相乙腈-0.1%磷酸（19∶81），流速1.0 mL·min^-1，检测波长254 nm，柱温30 ℃。结果：所得鞣花酸的纯度在98.5%以上，鞣花酸进样量在0.020 0-0.400 8 μg线性关系良好（r=0.999 8），平均回收率为101.25%；10个产地的山香圆叶中鞣花酸含量在0.37%-1.56%。结论：提取分离工艺得到的鞣花酸纯度高，可作为含量测定用对照品；含量测定方法简便、快速、定量准确，可用于山香圆叶中鞣花酸的含量测定；不同产地山香圆叶药材中鞣花酸的含量差异明显，为山香圆叶药材的资源开发提供了参考依据。

山香圆叶黄酮类化合物的研究

通过大孔树脂柱色谱、聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱和制备液相等技术对山香圆叶乙醇提取物的正丁醇部位进行分离纯化,并应用核磁共振以及质谱等波谱技术进行化合物结构鉴定。从山香圆叶中分离鉴定了15个黄酮类化合物,分别为:argutoside F (1)、木犀草素-7-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、女贞苷(3)、刺槐素-7-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、芹菜素(5)、槲皮素(6)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、野漆树苷(8)、木犀草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、刺槐素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、木犀草素(12)、neodiosmin (13)、芹菜素-7-O-芸香糖苷(14)和槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(15)。其中化合物1为新化合物,化合物2、7、9、13~15为首次从该植物中获得。

山香圆叶中黄酮类成分研究

目的：研究中药山香圆叶的化学成分,为阐明其有效成分提供依据。方法：利用聚酰胺、Sephadex LH-20,反相硅胶十八烷基硅烷色谱进行分离,根据化合物的理化性质和波谱数据（UV,1H-NMR,13C-NMR）鉴定其结构。结果：从山香圆叶中分离得到4个黄酮类化合物,分别鉴定为：金丝桃苷（1）,槲皮素-3-O-洋槐糖苷（2）,野漆树苷（3）,女贞苷（4）。结论：化合物1-4为首次从本属植物中得到。

山香圆中三萜类化合物的研究

目的研究山香圆叶的化学成分。方法采用色谱技术分离、纯化,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构。结果从山香圆叶分离出9个五环三萜化合物,分别为熊果酸(I),pomolic acid(II),corosolic acid(III),tormentic acid(IV),maslinic acid(V),tormentic acid-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(VI),arjunolic acid-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(VII),2α,3β,23,29-四羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(VIII),2α,3β,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(IX)。结论化合物V-IX均为首次从该属植物中分离得到。