曼氏血吸虫感染小鼠对岩藻糖基化N-乙酰乳糖多聚糖的抗体应答及该聚糖在血吸虫中的表达

寄生蠕虫的感染可诱导产生针对碳水化合物抗原的体液免疫应答,提示该类抗原可用于疫苗或新的血清学诊断方法的研究。已证实,血吸虫中的聚糖可作为宿主体液免疫应答的主要靶抗原。为鉴定聚糖分子中的抗原性片段,已对血吸虫的糖蛋白和糖脂中的聚糖结构进行了大量研究。但对直接决定其抗原性的糖链组成和结构目前尚知之甚少,限制了此类研究的进一步发展。

蛋白质O连接N-乙酰半乳糖胺糖基化与心血管疾病

蛋白质O连接N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)糖基化是在多肽N-乙酰半乳糖胺基转移酶(GalNAc-T)的催化下将糖供者尿苷二磷酸GalNAc(UDP-GalNAc)的GalNAc连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸上,以α异构键形成Tn抗原,是O连接GalNAc糖基化蛋白质生物合成中的第一步^([1])。从目前研究可以发现,作为生物体内最重要的翻译后修饰之一,O连接GalNAc糖基化不仅参与正常细胞的代谢活动,还与恶性肿瘤、心血管疾病等在内的多种重大疾病的发生和发展密切相关,有望在临床上获得广泛的应用^([2])。我们围绕近年来O连接GalNAc糖基化在心血管疾病中的作用和机制进行总结,旨在为心血管疾病的临床治疗和预防提供依据。

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2在不同肿瘤组织中mRNA的表达差异

目的 :观察三种不同肿瘤组织中ppGalNAc T2的表达差异 ;方法 :本文采用RT PCR方法从mRNA水平上研究其表达 ,同时在同一反应管中进行内对照 β 微球蛋白的扩增以进行半定量分析 ;结果 :ppGalNAc T2在不同肿瘤组织中 ,其在肿瘤部分、癌旁部分与正常部分的表达水平不具有一致性 ;结论 :ppGalNAc T2具有组织特异性 ;不同肿瘤组织的糖基转移酶作为肿瘤标志基因有待进一步的研究。

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2真核表达载体的构建及在SHG-44细胞的表达

目的 :为探讨O 糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用和功能 ,构建pcDNA3/ppGalNAc T2真核表达质粒并转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4。方法 :采用PCR技术从pDONR2 0 1 T2得到ppGalNAc T2全长编码序列 ,亚克隆至真核表达载体pcDNA 3 1,脂质体介导基因转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4细胞 ,采用RT PCR法检测重组质粒的表达。结果 :酶切图谱分析和基因测序证实pcDNA3 1 T2真核表达质粒构建成功。RT PCR显示转染细胞有T2的表达。结论 :成功构建了真核表达载体pcDNA3 1 T2 ,并成功转染入SHG 4 4细胞 ,为进一步研究ppGalNAcT2的功能奠定了基础。

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(Polypeptide:N-Acetylgalactosaminyltransferases,pp-GalNAc-T2,E.C.2.4.1.41)的mRNA表达谱研究

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2是O-糖链合成第一步的糖基转移酶,而O-糖基化与血管内皮细胞的功能密切相关。随着近年来人类基因组计划的迅速发展,人们对糖基转移酶的功能也开始有了新的认识。本文采用RT—PCR法观察了六种不同组织中PP-CallNAC-T2的表达水平,发现PP—GalNAc—T2在胃肠道粘膜等呈高表达,在脑组织中也有一定的表达,提示它在不同组织中的分布与组织功能存在相关性,值得进一步研究。

多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌是全世界女性中最常见的癌症,也是与癌症相关死亡的第二大主要原因。乳腺癌的发生发展是一个复杂的过程,其中的分子机制尚不清楚,随着许多肿瘤标志物的发现,GALNT家族进入了人们的视野。本文针对GALNT家族在乳腺癌中的功能,综合其临床意义、治疗靶点、中医药治疗等方面进行简要综述,以更好地了解乳腺癌的进展并寻求新的治疗方法。

糖基化缺陷的血清IgA1与人脐静脉内皮细胞结合量的研究

目的:观察糖基化缺陷的血清IgA1是否可以与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)结合,并比较正常血清IgA1及糖基化缺陷的血清IgA1与HUVEC结合量的异同,探讨血清IgA1尤其是糖基化缺陷的IgA1在IgA肾病血管损伤中的作用。方法:Jacalin亲和层析提取正常人血清IgA1,唾液酸酶和 /或半乳糖酶去除血清IgA1分子铰链区O 糖上连接的唾液酸和 /或半乳糖,形成糖基化缺陷的IgA1,分别形成去唾液酸IgA1 (DesIgA1),去唾液酸去半乳糖IgA1 (Des/DeGalIgA1)。分别用特异结合半乳糖或N 乙酰氨基半乳糖的花生凝集素 (PNA)和蚕豆凝集素 (VVL),以ELISA的方法检测酶切的充分性。流氏细胞技术检测并比较正常血清IgA1及糖基化缺陷的血清IgA1与HUVEC的结合量。结果:正常IgA1及DesIgA1,Des/DeGalIgA1均能与HUVEC结合。IgA1, DesIgA1,Des/DeGa lIgA1与HUVEC的结合量用免疫荧光强度的中位数表示分别为 2. 67±0. 35, 4. 62±1. 09, 4. 08±0. 41 (IgA1与DesIgA1相比,P=0. 015;IgA1与DesIgA1 /DeGalIgA1相比,P=0. 049;DesIgA1与DesIgA1 /DeGalIgA1相比,P>0. 05)。结论:IgA1分子可以与HUVEC相结合,唾液酸和 /或半乳糖缺失的IgA1与HUVEC的结合量显著高于正常IgA1分子,提示血清IgA1尤其是糖基化缺陷的IgA1在IgA肾病的血管损伤中可能起着一定的作用。

不同级别恶性脑胶质瘤中N-乙酰氨基半乳糖转移酶-14的表达差异

目的 探讨N-乙酰氨基半乳糖转移酶-14 （GalNAc-T14）在不同级别恶性胶质瘤中的表达差异及其与胶质瘤恶性程度的关系.方法 采用实时荧光定量核酸扩增检测系统（QPCR）方法和免疫组织化学染色方法检测16例正常脑组织标本、11例Ⅱ级脑胶质瘤组织标本、14例Ⅲ级脑胶质瘤组织标本和9例Ⅳ级脑胶质瘤组织标本中GalNAc-T14的表达水平.结果 QPCR方法显示GalNAc-T14在正常脑组织标本及Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤细胞标本中的电泳条带的吸光度值分别为0.956 4±0.079 1、0.525 6±0.0647、0.298 9±0.080 8、0.151 4±0.0624.单因素方差分析及LSD、SNK-t分析比较,GalNAc-T14在胶质瘤细胞组中的表达与正常脑组织组差异有统计学意义（P＜0.05）;GalNAc-T14在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星型胶质瘤中的表达差异有统计学意义（P＜0.05）.免疫组织化学染色方法结果显示GalNAc-T14在正常脑组织标本中和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤细胞标本中的阳性表达率分别为68.7％、63.6％、42.9％和33.3％,x2检验及Fisher确切概率法分析比较,GalNAc-T14在胶质瘤细胞组中的表达与正常脑组织组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;不同级别的脑胶质瘤细胞中,表达存在一定差异.结论 GalNAc-T14在恶性胶质瘤细胞中的表达水平较正常脑组织中明显降低,与病情进展密切相关.

UDP-GalNAc:多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶-14

UDP-GalNAc:多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(简称GalNAc-T)是黏蛋白O-糖基化的起始酶,N-乙酰氨基半乳糖转移酶-14(GalNAc-T14)是该家族中最新发现的成员。近年来有人指出,O-糖基化可能与肿瘤的发生发展具有密切关系,因此对N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族的研究也受到越来越多重视。本文主要综述了GalNAc-T14的命名、结构、分布、功能以及潜在的应用价值。

疾病及发育中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶ppGalNAc-T的重要性

蛋白质的O-GalNAc糖基化是生物体内广泛存在的一种重要的蛋白质翻译后修饰,参与了众多生命活动过程。多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T酶)是调控蛋白质O-GalNAc糖基化修饰的起始糖基转移酶,它催化N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)共价结合到蛋白质丝氨酸或苏氨酸的侧链羟基上,形成Tn糖链抗原结构。人体内ppGalNAc-T酶家族共有20个成员,各成员在不同的组织和细胞中的表达具有时空特异性,同时对其修饰的底物蛋白存在选择性。ppGalNAc-T酶的异常表达与组织器官发育,以及肿瘤、家族性钙质沉积、冠心病、阿尔兹海默症、先天性心脏病等复杂性疾病的发生发展密切相关。该文总结了近年来关于ppGalNAc-T酶在组织器官发育过程以及复杂性疾病发生发展中的研究概况,为深入理解ppGalNAc-T酶和O-糖基化的功能及其生物学意义提供参考。

ppGalNacT2与B7-H3在胃癌患者组织中的表达及意义

目的探讨胃癌患者组织中多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNacT2）与共刺激分子B7-H3蛋白的表达及其临床意义。方法用免疫组化染色法检测54例胃癌组织及相应的癌旁组织中ppGalNacT2与B7-H3蛋白的表达,分析两者的相关性及其与胃癌患者临床病理参数的关系。结果胃癌患者癌组织中ppGalNacT2及B7-H3蛋白的阳性表达率分别为55.5%（30/54）及46.3%（25/54）,明显高于相应的对照组[7.4%（4/54）及9.2%（5/54）,χ~2=29.01,P〈0.05;χ~2=18.46,P〈0.05];在高、中度分化的胃癌患者ppGalNacT2及B7-H3蛋白的阳性表达率（11.1%,9.3%）均明显低于低分化者（44.4%,37%）,差异有统计学意义（P均〈0.05）。在胃癌组织中ppGalNacT2与B7-H3蛋白的表达水平呈正相关（r=0.46,P〈0.05）。结论ppGalNacT2与B7-H3均参与胃癌的发病,并与胃癌分化程度有关。

GALNT14与肿瘤

在过去的一个多世纪,许多肿瘤标志物被发现,其中包括多肽N-乙酰半乳糖胺基转移酶(polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase,ppGALNAc-T,简称GALNT)家族中的多个成员。GALNT家族是催化黏蛋白O-糖基化修饰的起始酶,其能够影响黏蛋白的O-糖基化,从而影响肿瘤细胞的发生、预后、增殖与迁移等。GALNT14是该家族中最新发现的成员之一,近年的研究发现,GALNT14在多种肿瘤中表达异常,并与肿瘤细胞的发生、侵袭、转移和凋亡等有关。本文主要对GALNT14蛋白的结构特点及其在肿瘤中的作用进行综述,为进一步研究GALNT14与肿瘤发病机制的关系以及作为潜在的药物靶点提供参考。

O-糖基化起始糖基转移酶的活性与结构研究

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T)是催化N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)结合到蛋白质Ser或Thr上的糖基转移酶,是黏蛋白型O-糖基化修饰的起始糖基转移酶。ppGalNAc-T是一个酶家族,表达产物均为Ⅱ型膜蛋白。虽然氨基酸序列高度同源,但各成员具有独特的底物特异性和动力学特征。因此,ppGalNAc-T的底物作用机制是O-糖基化研究领域中的关键课题。近年来,通过利用定点突变及晶体结构解析技术,ppGalNAc-T中与底物相互作用的重要氨基酸残基以及由这些残基所形成的对底物结合起关键作用的空间构象逐渐被揭示,为了解ppGalNAc-T酶家族的底物作用机制及其蛋白结构与催化活性间的关系提供了理论依据。

淀粉样前体蛋白糖基化修饰对其加工剪切的调控

β淀粉样肽(Aβ)的过量产生和沉积是阿尔兹海默症(AD)主要的病理特征。Aβ是淀粉样前体蛋白(APP)经β/γ-分泌酶依次剪切的产物,因此关于APP加工剪切过程的研究对深入理解AD的发生机制具有重要意义。APP是一种同时具有N-糖链和O-糖链修饰的糖基化蛋白,APP的糖基化可以影响其在细胞内的转运定位和成熟加工。多种糖基转移酶及糖苷酶,如多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T),O-GlcNAc糖苷酶(OGA)等可以调节APP糖基化水平进而影响Aβ产生。该文总结梳理了APP上N-糖基化、O-GalNAc糖基化、O-GlcNAc糖基化的表达情况及其对APP转运加工影响的研究进展,指出了糖基化调控的复杂性和存在的矛盾现象,为深入探索APP功能机制启发思路,同时为从糖基化角度寻找AD诊疗靶点提供理论依据。

GALNT3作为潜在肿瘤分子标志物及药物靶点的研究进展

黏蛋白型O-糖基化是蛋白质中最常见的翻译后修饰之一,可以改变蛋白质的空间构象与生物学功能,在细胞信号转导、细胞黏附、免疫应答等生物学过程中发挥着关键作用。而多肽N-乙酰半乳糖胺转移酶3(polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase3,GALNT3)作为黏蛋白型O-糖基化的起始酶,在维持人类细胞和组织的稳态中具有重要意义,而其功能失调已被发现在钙磷代谢紊乱、动脉粥样硬化等多种疾病中发挥作用。此外,GALNT3被发现在结直肠癌、肺癌、卵巢癌等多种肿瘤组织中异常表达,且与患者的临床病理特征和较差预后相关,可以作为肿瘤早期诊断和预后评估的潜在标志物。进一步研究表明,GALNT3既可通过调控糖基化水平,降低肿瘤细胞之间的黏附水平,也可通过激活多条代谢相关通路,促进肿瘤细胞的侵袭转移。该文就GALNT3在恶性肿瘤发生发展中的作用进行综述,并分析了靶向GALNT3开发抗肿瘤药物的前景与挑战。