基于神经元凋亡和自噬交互作用研究岭南头皮针对脑外伤昏迷大鼠的促醒作用

目的:探讨岭南头皮针通过自噬相关蛋白(Beclin-1、p-62、LC3B)-凋亡相关蛋白(Cleaved-Caspase3、Bcl-2)信号轴交互促进脑外伤昏迷大鼠苏醒机制。方法:将40只健康成年SD雄性大鼠按体重随机分为对照组、模型组、假针刺组、岭南头皮针组,每组各10只。采用自由落体撞击法构建外伤昏迷(TBI)大鼠模型,岭南头皮针组采用TBI+岭南头皮针法干预,假针刺组采用TBI+普通针刺法干预,比较各组大鼠神经功能缺损量表(mNSS)评分,HE染色观察皮层、海马组织病理变化,Western Blot法检测自噬蛋白[LC3B、p-62、Beclin-1]以及凋亡蛋白[Caspase-3、Bcl-2]水平的变化。结果:第0、7、14天,TBI组、假针刺组、岭南头皮针组神经功能缺损评分均高于对照组(P<0.01);第7、14天,假针刺组、岭南头皮针组神经功能缺损评分均低于TBI组(P<0.01),岭南头皮针组大鼠神经功能缺损评分均低于假针刺组(P<0.01),且第14天,岭南头皮针组大鼠神经功能缺损评分低于第7天神经功能缺损评分(P<0.01)。进行岭南头皮针刺治疗后,岭南头皮针组皮层神经元数量丰富,局部排列不规则,皮层可见少量神经元胞核皱缩深染,胞核、胞质分界不清晰,海马体神经细胞形态规则,排列整齐密集,胞核大而圆,呈均匀淡蓝色或蓝色,核仁清楚,细胞质丰富。与对照组相比,TBI组凋亡蛋白Cleaved-Caspase3表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05),自噬蛋白LC3B表达上升(P<0.05)、Beclin-1表达上升(P<0.01),p-62表达下降(P<0.05);与TBI组比,假针刺组凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),自噬蛋白LC3B表达下降(P<0.01),两组p-62、Beclin-1、Cleaved-Caspase3表达差异无统计学意义(P>0.05),岭南头皮针组,凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),自噬蛋白LC3B、Beclin-1表达下降(P<0.01),两组p-62、Cleaved-Caspase3表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:岭南头皮针可以有效促进颅脑损伤昏迷大鼠苏醒,其机制可能与抑制自噬、凋亡蛋白的表达有关。