岷山红三叶草异黄酮对运动大鼠免疫功能及运动能力的影响

目的:研究岷山红三叶草异黄酮对大鼠免疫功能及运动能力的影响。方法:将40只大鼠随机均分为四组:安静组、安静给药组、运动组和运动给药组,建立递增运动负荷大鼠模型,测量运动大鼠力竭时间、免疫脏器指数、大鼠免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群含量。结果:经过6周的大强度运动,服用岷山红三叶草异黄酮大鼠组与相应的对照组比较,其力竭运动时间明显延长,免疫脏器指数和T淋巴细胞亚群(CD_(4)^(++)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+))、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)的含量均有明显上升和变化。结论:(1)岷山红三叶草异黄酮可明显提高大强度耐力训练大鼠力竭运动时间,提高运动能力;(2)岷山红三叶草异黄酮对运动大鼠的免疫系统产生影响,可以通过调节免疫细胞的功能,增强机体的免疫能力,并且对免疫抑制有一定改善。

岷山红三叶根际优良促生菌对其宿主生长和品质的影响

从岷山红三叶根际分离出高效溶磷菌,并对其分泌生长激素、拮抗病原菌特性进行测定,筛选出优良促生菌6株,根瘤菌1株,按照一定比例混合制成复合菌肥,进行盆栽试验,研究复合菌肥对岷山红三叶产量、品质及异黄酮含量的影响。结果表明:利用筛选的优良促生菌和根瘤菌研制的复合微生物菌肥符合《微生物肥料》标准(NY227-94)。75%化肥+PGPR菌肥处理使岷山红三叶干草总产量较CK增加4.76%,同时,该处理可提高红三叶粗蛋白、粗灰分、钙、磷含量,降低中、酸性洗涤纤维含量;50%化肥+PGPR菌肥处理对岷山红三叶的总干草产量、营养品质以及4种异黄酮的含量均没有显著影响。

岷山红三叶茎叶水浸液对3种植物种子萌发及幼苗生长的影响

以岷山红三叶(Trifolium pratense cv.Minshan)的茎、叶为供体植物,用蒸馏水浸泡48h制备水浸液。设0.05、0.10、0.15和0.20g.mL-1 4个浓度梯度,以蒸馏水为对照,对燕麦(Avena sativa)、小白菜(Brassicachinensis)、披碱草(Elymus dahuricus)3种受体植物种子进行发芽试验和幼苗生长的生物测定。结果表明,不同浓度岷山红三叶茎叶水浸液对不同受体植物种子萌发和幼苗的生长发育有不同的化感效应。各浓度水浸液对种子萌发均没有显著影响(P>0.05),但对小白菜幼苗的生长均有显著的抑制作用(P<0.05);0.20g.mL-1浓度的水浸液对燕麦、披碱草和小白菜根生长抑制率分别为23.76%、35.73%和62.50%,且抑制作用显著;0.05g.mL-1浓度水浸液对披碱草幼芽的生长促进作用显著;在3种受体植物中,小白菜受到抑制作用较强,燕麦和披碱草则较弱。

岷山红三叶异黄酮对去卵巢大鼠生长和免疫及抗氧化指标的影响

为研究岷山红三叶异黄酮的促生长、免疫及抗氧化作用,选择80只SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠,随机分为8组,每组10只,其中1～7组为去卵巢+红三叶异黄酮组,分别按320,160,80,40,20,10和0mg/(kg BW.d)的量灌胃红三叶异黄酮,第8组为假手术组,灌服等量生理盐水。结果表明,1)红三叶异黄酮对去卵巢雌性大鼠生长有一定的抑制作用,但不存在量效关系。2)低剂量的红三叶异黄酮具有提高大鼠T淋巴细胞转化率的作用,可以作为畜禽免疫增强剂,提高畜禽免疫力,以10mg/(kg BW.d)的添加量比较适宜。3)岷山红三叶异黄酮具有明显的抗氧化作用,适量(>80mg/kg BW.d)添加可降低血清CHO(total cho1esterol,总胆固醇)、HDL(high densi-ty lipoprotein cholesterol,高密度脂蛋白胆固醇)和LDL(low density lipoprotein cholesterol,低密度脂蛋白胆固醇)浓度,提高血清SOD(superoxide dismutase,超氧化物歧化酶)含量。4)岷山红三叶异黄酮具有弱的雌激素作用和较好的使用安全性。5)综合各指标,岷山红三叶异黄酮的适宜添加量为80mg/(kg BW.d)。

岷山红三叶愈伤组织诱导和植株再生研究

通过对岷山红三叶下胚轴和子叶再生体系建立的研究，获得愈伤组织诱导的最佳培养基为：Ms＋2mg／L 2，4D＋0．5mg／L 6-BA＋2％蔗糖＋0．6％琼脂，胚性愈伤组织诱导培养基为：MS＋0．1mg／L IAA＋0．5mg／L 6-BA＋2％蔗糖＋0．6％琼脂，芽诱导培养基为：B5＋0．06mg／L NAA＋2％蔗糖＋0．6％琼脂，每瓶可以长出2～10条茎，将茎转入生根培养基后愈伤继代可持续出芽。最佳的生根培养基为：1／2MS＋0．05mg／L NAA＋1．5％蔗糖＋0．8％琼脂。建立再生植株约需160d。

灌水和施肥对岷山红三叶生产性能的影响

研究了不同灌水量和施肥量对岷山红三叶生产性能的影响。结果表明:鲜草产量和干草产量极显著正相关,株高和干草产量显著正相关,株高和分枝数显著负相关,分枝数和草产量相关性极低。不施磷肥或不灌水的情况下,分别增大灌水量(1 000 m3/hm2)和施肥量(P2O5360 kg/hm2+K2O 90 kg/hm2),岷山红三叶的分枝数较多,草产量较高;如果磷肥施用量增加(P2O5120 kg/hm2+K2O 90 kg/hm2),可适当减少灌水量(500 m3/hm2),分枝数和草产量也较高。灌水量和施肥量对红三叶株高无显著影响。

钼、播种量和行距对岷山红三叶产量及异黄酮含量的影响

采用L9(34)正交试验设计,进行钼(钼酸铵)、播种量和行距三因素,3个不同水平组合,对岷山红三叶生长发育、异黄酮含量和种子生产的影响进行研究。结果表明,钼、播种量和行距对岷山红三叶盛花期鲜草产量、异黄酮含量、种子生产的影响不同。钼虽然对岷山红三叶鲜草产量和异黄酮含量没有显著影响,但可显著提高单位面积岷山红三叶的有效分枝数、花序数、种子产量;适当增加播种量有利于提高岷山红三叶鲜草产量和异黄酮含量。

提高岷山红三叶种子发芽率的研究

试验采用H2SO4、NaOH、KNO3和丙酮药剂对岷山红三叶Trifoliumpratense种子进行浸泡处理,以观察这些药剂对种子休眠的破除效果。结果表明,4种药剂均能有效破除种子休眠,提高发芽率;不同药剂、不同质量分数和不同处理时间对发芽率的影响不同,4种药剂中,用40%H2SO4溶液处理10min的效果最佳,其发芽率比对照(50%)提高37%。其次是30%H2SO4溶液处理15min、0.2%KNO3溶液处理12h、40%NaOH溶液处理10min、30%NaOH溶液处理15min和10min,发芽率分别比对照提高34%、31%、30%、30%和29%。丙酮溶液处理的效果较差,仅使发芽率提高20%。

岷山红三叶草异黄酮合酶基因的克隆及序列分析

从岷山红三叶克隆异黄酮合酶基因,并对序列进行比对和进化分析。建立岷山红三叶愈伤组织培养体系,采用RT-PCR扩增从愈伤组织总RNA中分离了异黄酮合酶基因,并将其克隆到pGEM-T Easy载体,测序,得到全长1575bp的片段。序列分析表明,异黄酮合酶基因含1575个核苷酸,和大豆等其他植物中异黄酮合酶具有很高的同源性。

根癌农杆菌介导IFS基因对岷山红三叶遗传转化研究

以岷山红三叶草为试材,以其子叶和叶柄的愈伤组织为受体,采用根癌农村菌介导法,研究其遗传转化的条件,以期建立根癌农杆菌介导的异黄酮合酶IFS基因遗传转化体系。结果表明:利用该转化体系,获得的抗性愈伤组织,通过提取其基因组进行PCR扩增鉴定,证实为转化子。提示根癌农杆菌介导转化岷山红三叶愈伤组织是完全可行的,为利用基因工程方法改良红三叶的品种并获得高产异黄酮品系奠定了基础。

集饲用和药用价值于一体的牧草新秀——岷山红三叶

岷山红三叶Trifolium pratense 是甘肃省岷县的优良地方牧草品种,是集饲用和药用价值于一体的优质豆科牧草,是发展当地草产业的龙头产品。为此对该牧草的产地环境条件、生物学特性及栽培技术、饲用价值、药用价值、产业化进程及市场前景进行了探讨。

浅谈岷山红三叶的播种与田间管理

岷山红三叶是岷县二阴地区特有的牧草品种之一,用途广泛,草质优良。随着岷山红三叶中含有丰富异黄酮的发现,草产品已供不应求,岷山红三叶青干草产品远销湖南、四川、陕西等地,极大地激发了农民种草的积极性。对于促进农业增效、农民增收,推动新农村建设中发挥着越来越重要的作用。本文对岷山红三叶的播种与田间管理等方面进行了研究分析。

氮磷肥对岷山红三叶草产量和品质的影响

[目的]研究氮磷肥施用量对岷山红三叶草产量和品质的影响。[方法]以岷山红三叶为试材,采用裂区试验设计,施氮肥为主区,设4个水平(0、50、100、150 kg/hm2),施磷肥为副区,设4个水平(0、120、240、360 kg/hm2),分别测定不同氮磷肥料及其组合处理的红三叶草的分枝数、茎叶比(LSR)、干鲜比(DFR)、鲜草和干草的产量。[结果]A2B4(N50 kg/hm2、P2O5360 kg/hm2)处理的红三叶草分枝数最多。获得较高LSR和DFR的N、P肥最佳配比分别为A3B4(N100 kg/hm2、P2O5360 kg/hm2)和A3B1(N 100 kg/hm2、P2O50kg/hm2)。施肥量分别为A2B4(N50 kg/hm2、P2O5360 kg/hm2)和A2B2(N50 kg/hm2、P2O5120 kg/hm2)时,鲜草和干草的产量最高。[结论]P肥施用量对岷山红三叶的草产量和品质无显著影响,N肥施用量对岷山红三叶草产量和品质影响较大。

复合菌肥对岷山红三叶生产性能和营养品质的影响

将生长旺盛的岷山红三叶(Trifolium pratense‘Minshan’)根际分离出的溶磷菌与其根部分离的根瘤菌及生防菌共同研制成复合菌肥,连续两年对比菌肥和化肥单一施用以及二者按不同比例配施对岷山红三叶株高、产量、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)、钙(Ca)和磷(P)等指标的影响,找到最佳的肥料组合。结果表明,75%化肥+复合菌肥组合作用效果最佳,不仅能够有效促进岷山红三叶植株生长,干草产量比单施化肥处理(CK)增加12.95%,还能改善其营养品质,岷山红三叶的CP、EE、Ca、P含量分别较CK提高了18.36%、59.90%、9.23%和21.06%,ADF和NDF含量较CK分别降低了8.62%、7.81%,明显提高了岷山红三叶的相对饲喂价值(RFV)。50%化肥+复合菌肥和25%化肥+复合菌肥组合的效果虽不及前者,但可以大大降低化肥的用量,有利于减轻环境污染,生产中可以根据增产或改善环境目的不同来选择使用;菌肥单一施用虽能改善岷山红三叶的品质,但产草量低,生产中不建议推广应用。

岷山红三叶示范推广及产业化开发进程

从岷山红三叶Trifolium pratense品种来源、品种特性、示范推广及产业化进程,产业化过程中存在的问题和风险等方面进行了论述,最后提出了解决这些问题的建议。

岷山红三叶与冬小麦保护播种技术研究

通过比较岷山红三叶与冬小麦保护播种,岷山红三叶春播后生长期喷施盖草能化学除草和岷山红三叶春播苗期人工除草3种不同处理的株高、草产量、投入、产出等各项指标,结果表明:运用岷山红三叶与冬小麦保护播种技术,比盖草能除草和人工除草经济适用,不仅降低了播种当年杂草对岷山红三叶的危害程度,且播种第2年的株高、鲜干草产量均和其他2处理组差异显著(P<0.05),同时提高了岷山红三叶播种当年和第2年后的经济效益,是目前人工防治田间杂草的有效措施。

岷山红三叶改良亚高山草甸退化草地效果研究

研究了岷山红三叶对亚高山草甸退化草地的改良效果,结果表明:运用岷山红三叶改良退化的亚高山草甸草地,可抑制马先蒿等毒害草的生长,迅速提高天然草地的草丛高度,使地上植物量提高30%,可食植植量所占百分比显著增加,极大地改善了亚高山草甸草地的质量和生产能力,表明运用岷山红三叶改良亚高山退化草地技术具有推广应用价值。

岷山红三叶改良退化山地草甸效果研究

2 0 0 1 -2 0 0 3年进行了岷山红三叶Trifolitmpretense直播改良长花马先蒿Pedicularislongiflora退化山地草甸效果研究。经过观察生育期、盖度和地上生物量测定 ,结果表明 :岷山红三叶在山地草甸的生长发育推迟1～ 2个生育期 ;岷山红三叶竞争性强 ,含有对长花马先蒿相克的未知因子 ,第 3年盖度由 1 8 3%下降为0 3% ,而成为优势种 ,盖度达 38 7% ;岷山红三叶改良退化草甸效果显著 ,第 3年鲜草产量 434 7 0kg/hm2 ,占草甸产草量的 37 3%。

接种根瘤菌与施肥对岷山红三叶异黄酮含量的影响

通过L9(34)正交试验,研究不同根瘤菌梯度、接种方式和氮肥梯度对岷山红三叶Trifolium pratense异黄酮含量和产量的影响。结果表明,接种根瘤菌,对岷山红三叶异黄酮含量和产量都有显著影响(P<0.05),以每千克岷山红三叶种子接种16 g根瘤菌效果较好。接种根瘤菌方式、氮肥梯度对岷山红三叶异黄酮含量和产量不存在显著影响,但以拌种和不施氮肥效果较好。综合根瘤菌梯度、接种方式和氮肥梯度对岷山红三叶异黄酮含量和产量影响以每千克岷山红三叶种子与16 g根瘤菌肥拌种,不施氮肥效果最优。

岷山红三叶及其产业化发展思路

经过长期的自然选择和人工选育,岷山红三叶已形成了适应高寒阴湿气候条件的特性,在海拔2 000-3 000 m的地区生长良好,鲜草产量达30 000-52 500 kg/hm2,粗蛋白质含量19.75%,且含异黄酮8‰-10‰,是集草、药用一体的优良豆科牧草品种。通过分析岷山红三叶产业的科研基础、区域环境、群众基础和政策环境等方面的优势,提出了产业化发展的思路。