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携带全长抗CD20抗体的嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20载体构建与表达研究
1
作者
杨秋梅
吴红平
+4 位作者
周秀梅
李林芳
王春红
姜梨华
钱其军
《浙江理工大学学报(自然科学版)》
2009年第5期743-746,共4页
构建Ad5F11b-Anti-CD20嵌合型腺病毒载体并探索该腺病毒在体外表达全长抗体的能力。合成部核糖体进入位点(IRES)序列,将其与美罗华抗体重轻链连接,克隆到pDC338质粒载体上,并与以11b型腺病毒(Ad11b)Fiber替代5型腺病毒(Ad5)Fiber的嵌合...
构建Ad5F11b-Anti-CD20嵌合型腺病毒载体并探索该腺病毒在体外表达全长抗体的能力。合成部核糖体进入位点(IRES)序列,将其与美罗华抗体重轻链连接,克隆到pDC338质粒载体上,并与以11b型腺病毒(Ad11b)Fiber替代5型腺病毒(Ad5)Fiber的嵌合型腺病毒骨架质粒pAd5F11b进行重组,获得Ad5F11b-Anti-CD20嵌合型腺病毒。将鉴定正确的病毒空斑感染293细胞,ELISA检测其表达水平以及间接免疫荧光检测该病毒表达抗体的特异性。结果表明,嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20在293细胞中的表达量高达3.78μg/ml±0.30μg/ml,间接免疫荧光(IFA)显示该病毒表达的抗体只与CD20+的Raji细胞有特异性结合,而与CD20-的Molt-4细胞无结合能力。成功构建了高效表达抗CD20抗体的嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20。
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关键词
全长抗体
嵌合型腺病毒ad5f11b
抗CD20抗体
IRES
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题名
携带全长抗CD20抗体的嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20载体构建与表达研究
1
作者
杨秋梅
吴红平
周秀梅
李林芳
王春红
姜梨华
钱其军
机构
浙江理工大学生命科学学院
第二军医大学东方肝胆外科医院
出处
《浙江理工大学学报(自然科学版)》
2009年第5期743-746,共4页
基金
国家高技术研究发展计划"863"重点项目资助(2007AA021108)
浙江省重中之重学科开放基金资助(SWYX0809)
文摘
构建Ad5F11b-Anti-CD20嵌合型腺病毒载体并探索该腺病毒在体外表达全长抗体的能力。合成部核糖体进入位点(IRES)序列,将其与美罗华抗体重轻链连接,克隆到pDC338质粒载体上,并与以11b型腺病毒(Ad11b)Fiber替代5型腺病毒(Ad5)Fiber的嵌合型腺病毒骨架质粒pAd5F11b进行重组,获得Ad5F11b-Anti-CD20嵌合型腺病毒。将鉴定正确的病毒空斑感染293细胞,ELISA检测其表达水平以及间接免疫荧光检测该病毒表达抗体的特异性。结果表明,嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20在293细胞中的表达量高达3.78μg/ml±0.30μg/ml,间接免疫荧光(IFA)显示该病毒表达的抗体只与CD20+的Raji细胞有特异性结合,而与CD20-的Molt-4细胞无结合能力。成功构建了高效表达抗CD20抗体的嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20。
关键词
全长抗体
嵌合型腺病毒ad5f11b
抗CD20抗体
IRES
Keywords
f
ull length anti
b
ody
chimeric
ad
enovirus
ad
S
f
11
b
anti-CD20
IRES
分类号
R73-362 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
携带全长抗CD20抗体的嵌合型腺病毒Ad5F11b-Anti-CD20载体构建与表达研究
杨秋梅
吴红平
周秀梅
李林芳
王春红
姜梨华
钱其军
《浙江理工大学学报(自然科学版)》
2009
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