青岛市隐匿性乙型肝炎的分子流行病学调查研究

目的:由于国内目前尚无检测隐匿性乙型肝炎病毒(Occult Hepatitis B Virus;OHBV)感染的试剂盒且OHBV患者的特点是HBsAg阴性,血清中存在低水平的HBV DNA,用常规的检测方法不能检测出来;急需研制灵敏度高、特异性强的PCR方法,来探讨青岛市是否存在OHBV感染。方法根据OHBV血清图谱的特点随机收集了OHBV可疑样本100份,采用试剂盒和酚/氯仿两种方法提取DNA,PCR扩增及其引物设计按Kanneko等的方法进行并进行了改进。结果1.经改进的酚/氯仿法提取OHBV DNA优于试剂盒法。2.常规PCR引物组合109-588扩增,所有样品的109-588组合均无扩增产物;使用嵌套式PCR引物组合1763-1778-2017-2032进行扩增,33份样品出现了HBV特异性扩增带。3.在OHBV不同血清图谱样品中均检出OHBV DNA,总检出率为33%,其中anti-HBs+anti-HBc阳性组中OHBV DNA检出率最高(43.33%);anti-HBe+anti-HBc阳性组中OHBV DNA检出率最低(18.18%)。结论酚/氯仿法提取OHBV DNA经改良,优于试剂盒法,常规PCR方法不能检测出OHBV DNA,而嵌套式PCR方法可达到诊断OHBV的目的。本实验首次在青岛运用自行设计的OHBV检测体系,在OHBV可疑人群中检测出OHBV DNA。