不同土壤改良剂对川党参连作障碍的防控效果

以川党参种子为试材,采用大田试验的方法,研究了有机肥(OM)、生石灰(QL)和钙镁磷肥(CMP)3种改良剂对川党参连作障碍的防控效果,以期为通过土壤改良消减川党参连作障碍提供参考依据。结果表明:1)OM、QL和CMP处理均显著提高了川党参产量,增幅分别为37.9%、77.9%、117.4%。2)OM、QL和CMP处理均提高了叶绿素和类胡萝卜素含量,增幅分别为31.6%、18.2%、25.3%和28.7%、18.0%、24.0%。3)OM和QL处理下过氧化氢酶活性较CK显著提高,而O_(2)^(·)含量均显著降低。4)QL和CMP处理下川党参的黄酮含量较CK分别提高了31.5%和17.6%。OM处理下川党参生物碱含量显著提高了58.7%。5)QL和CMP处理的pH较CK分别提高了10.9%和9.8%,碱性磷酸酶活性分别提高了95.4%和69.1%。OM、QL和CMP处理下土壤过氧化氢酶活性较CK分别提高了16.7%、21.0%和20.1%。6)3种改良剂处理对川党参形态发育、产量和光合色素积累均具有一定的促进作用,其促进效果由大到小依次为生石灰(CE=1.31)>钙镁磷肥(CE=1.11)>有机肥(CE=1.02)。综上,土壤改良剂能够通过调控光合代谢、抗氧化系统及土壤酶活性来消减川党参连作胁迫。3种改良剂对连作川党参的促生增产效果由大到小依次为生石灰(3 000kg·hm^(-2))>钙镁磷肥(3 000kg·hm^(-2))>有机肥(4 500kg·hm^(-2))。

不同种植年限川党参根际土壤细菌群落结构研究

为了探究生长年限对川党参根际土壤细菌群落结构特征及其多样性的影响,阐明细菌群落变化规律,采用Illumina MiSeq高通量测序技术对1年生、2年生、3年生和4年生的川党参根际土壤细菌16S rRNA序列进行测序分析。结果表明:(1)生长年限显著影响川党参根际土壤细菌群落多样性,其OTU数、Alpha多样性指数均随生长年限增加呈先升高后降低的趋势;(2)生长年限改变了细菌群落组成,但在门水平上优势菌门(相对丰度>5%)相对稳定,均为变形菌门(Proteobacteria)、未分类细菌门(unclassified_Bacteria)、酸杆菌门(Aci-dobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和绿弯菌门(Chloroflexi),其相对丰度总和占85.71%~91.39%;在属水平上优势菌群相差较大,仅有全噬菌属(Holophaga)和念珠菌属(Candidatus Udaeo-bacter)是4个年限所共有的优势菌属,革兰氏阴性菌cTPY-13(Gram-negative bacterium cTPY-13)则为2年生独有优势菌属,其余则分别为不同年限有相应共有优势菌属;(3)PCoA分析与UPGMA聚类分析显示,各生长年限间细菌群落差异明显,随生长年限增加,不同组间细菌群落结构差异先增大后逐渐减小,细菌群落在2~3年生时演变较为剧烈;(4)土壤速效养分是影响根际土壤细菌群落的主要环境因子,其程度大小为水解氮(HN)>有效磷(AP)>速效钾(AK),优势菌门中酸杆菌门与AP、AK呈显著负相关(P<0.05),拟杆菌门与AP、AK呈显著正相关(P<0.05),而绿弯菌门与HN呈显著负相关(P<0.05)。综上所述,川党参生长年限延长会影响根际土壤细菌群落结构和多样性,从而改变其根际微生态系统。

种苗期川党参根际土壤细菌群落变化研究

目的:研究川党参种苗期根际土壤细菌群落的结构特征和多样性变化,掌握种苗期土壤微生物群落的演替规律,为川党参连作障碍的防治提供理论依据。方法:采集1年生(Op1)和2年生(Op2)的川党参根际土壤,采用Illumina MiSeq高通量测序技术进行细菌16S rRNA序列V3-V4区的高通量测序,对种苗期根际土壤细菌群落变化进行分析。结果:通过MiSeq测序共得到882369条优化序列,其中1年生注释到9926个OTU,2年生注释到7560个OTU。种苗期随生长年限的增加,川党参根际土壤速效养分、细菌群落丰富度和多样性均呈增加趋势。在细菌门分类水平上,1年生有5个优势菌群(相对丰度均大于5%),2年生有7个优势菌群,共有优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes);在属分类水平上排名前五菌群中只有全噬菌属(Holophaga)与念珠菌属(Candidatus Udaeobacter)为共有优势菌群,且1年生有11个独有菌群。PCoA分析与UPGMA聚类分析表明1年生与2年生川党参根际土壤细菌群落具有显著差异,随生长年限延长根际土壤细菌群落结构演变明显。结论:川党参种苗期根际土壤速效养分、土壤细菌群落多样性呈递增变化,细菌群落结构相似性呈递减变化。研究为揭示川党参种植和连作障碍形成的原因提供了理论依据。

川党参的化学成分及其与磷酸二酯酶4D2的分子对接研究

采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶以及反相高效液相色谱法等对川党参的乙酸乙酯和石油醚部位进行分离纯化,并通过^(1)H NMR和^(13)C NMR等波谱技术进行结构鉴定.利用Sybyl X 2.1.1软件,以Total score值为评价标准,评价川党参化学成分与磷酸二酯酶4D2(PDE4D2)的结合作用.利用Pymol和Discovery Studio 2017 R2 Client软件分析PDE4D2与化合物之间的相互作用力.结果从乙酸乙酯和石油醚部位分离出12个化合物,分别鉴定为mangnostellin D(1)、(7S,8S)-3-methoxy-3',7-epoxy-8,4'-oxyneoligna-4,9,9,'-triol(2)、isolariciresinol(3)、curcasinlignan B(4)、(4E,12Z)-threo-tetradeca-4,12-diene-8,10-diyne-1,6,7,14-tetraol(5)、(-)-(7R,8S,7'E)-3',4-dihydroxy-3-methoxy-8,4'-oxyneoligna-7'-ene-7,9,9'-triol(6)、tetradeca-4E,8E,12E-triene-10-yne-1,6,7-triol(7)、lobetyol(8)、1-α-linoleoylglycerol(9)、glycerol 1-(9,12,15-octadecatrienoate)(10)、3,5-二甲氧基-4-羟基-苯丙酮(11)、syringic acid ethyl ester(12);其中化合物1、4、10、11和12为首次从该植物中分离得到;分子对接结果表明化合物1、2、5和化合物6与PDE4D2有较好的结合活性.

HPLC测定不同产地川党参中党参炔苷的含量

目的：分析不同产地的川党参中党参炔苷的含量，为川党参的质量标准建立提供参考。方法：采用高效液相色谱分析，Supelco Discovery C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；乙腈-0.5％醋酸水（20：80）为流动相，检测波长268nm。结果：24批不同种与不同产地的党参中党参炔苷含量介于0.0403～0.9667mg·g^-1。结论：该方法操作简便，结果稳定可靠，可用于川党参的质量评价。

川党参种子发芽检验规程的研究

目的:探讨温度、光照、发芽床等因素对川党参种子发芽的影响。方法:常规发芽试验方法进行试验。结果与结论:川党参种子发芽最适温度为25℃,需光照,发芽床选纸上或纸间均可,发芽初次计数时间为置床后第10天,末次计数时间为置床后第18天。以赤霉素处理可显著提高川党参种子的发芽率。

川党参的高效液相色谱指纹图谱研究

目的利用HPLC-DAD方法,研究川党参药材的HPLC色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法色谱条件Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);乙腈-0.5%醋酸水溶液为流动相进行二元梯度洗脱;柱温30℃;检测波长268nm;流速1mL·min-1。以党参炔苷为参照物分析了19批不同产地的川党参,采用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A进行评价,建立了共有模式,并以相关系数评价指纹的相似性。结果19批川党参样品HPLC指纹图谱的相似度都在80%以上,精密度、稳定性、重复性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均<3%,可以明显区别川党参跟药典收载其他品种。结论本方法操作简便,结果稳定可靠,该法可以作为川党参药材的鉴别和质量控制。

川党参品质形成及影响因素研究

目的研究川党参品质变化规律和影响品质变化的因素。方法田间移栽、定期取样及室内处理分析相结合。结果川党参根的生物量积累主要集中在4月下旬至7月上旬,6月20日后基本趋于稳定;地上部生长与地下部相关显著;水分和温度及其相互作用对川党参化学成分有显著影响。结论川党参的品质易受环境因素的影响。

明党参与川明参群体遗传结构及分子鉴定的ISSR分析

目的:明党参和川明参群体遗传遗传多样性、遗传结构及分子鉴定的研究。方法:对7个不同野生群体的明党参和1个栽培群体的川明参进行ISSR分析。利用POPGENE分析软件分析了群体的遗传多样性和遗传结构。结果:共检测了152个位点,总的多态性位点百分率P为90.8％,群体遗传分化值Gst为57.5％,明党参群体水平的遗传多样性(A=1.272;P=27.26％;I=0.132;H=0.087)高于川明参群体(A=1.217;P=21.7％;I=0.103;H=0.067)。结论:明党参的遗传多样性较高,遗传变异主要存在于不同群体间。川明参的遗传多样性低于明党参。聚类分析结果表明,川明参与明党参在DNA水平出现了相当的遗传分化。并通过ISSR分析筛选出了川明参一个特有的分子标记。对明党参和川明参的系统发育关系也进行了探讨。

不同产地川党参土壤养分主成分分析和聚类分析

收集并测定了川党参主产地的27份土壤样品的16个养分指标,统计分析表明,土壤养分分布有偏斜。应用主成分分析法,可将16个养分指标简化为6个主成分,6个主成分所提供的信息量占全部信息量的85.30%。在主成分分析的基础上,对27份土壤样品进行聚类分析,若以num10作为分类标准,可将其划分为4类,第一类17个,第二类5个,第三类4个,第四类1个,63.0%的土壤样品可归为一类;若以num15作为分类标准,可将其划分为3类,第一类22个,第二类4个,第三类1个,81.5%的土壤样品可归为一类。

明党参和川明参种间遗传分化和系统关系的分子标记和ITS序列分析

为了阐明明党参（Changium smyrnioides）和川明参（Chuanminshen violaceum）种间遗传分化和系统关系，利用RAPD、ISSR和ITs序列分析方法对明党参和川明参不同居群，以及芹亚科（Apioideae）6个族的一些代表种进行研究．RAPD和ISSR分析表明，明党参与川明参种间在全基因组水平出现明显的遗传分化．ITS序列分析则表明，明党参的6个居群在ITS序列上稍有差异，ITS-1的GC含量为58．3％～59．2％，ITS2的GC含量为54．3％～56．6％．ITS-1的长度范围为215～219bp，ITS-2的长度范围为224～227bp．川明参与明党参种间的ITS序列也出现明显分化．芹亚科6个族一些代表种的ITS序列系统发育分析结果支持明党参置于美味芹族（SmyrnieaeKoch）的分类地位．在ITS系统树上，川明参与明党参为姐妹类群的置信度为100％，因此，提出将川明参置于美味芹族的分类学处理．

川党参生产的经济分析

目的:指导川党参产业化生产.方法:以2008年重庆市巫山县社会经济发展状况、川党参市场行情为基础,采用农业项目投资评估的方法,开展川党参生产(6.67 hm2为例,r=10%)的经济分析.结果:估算投入32.05万元、投资利润率14%、NPV 9.53万元、IRR 37.9%.产量及就地销售价格的盈亏平衡点(动态)分别为2 655 kg/hm2、14.4元/kg,销售价格对NPV的影响最敏感.结论:川党参种植的经济、社会效益明显,但具一定市场风险.

施肥对川党参产量和质量的影响研究

目的:研究施肥对川党参产量和质量的影响。方法:采用单因素和正交试验进行田间试验,田间统计产量,HPLC测定党参炔苷含量、UV测定党参多糖含量。结果:在单因素试验中,有机肥以5900kg～7900kg/667m2、尿素28.5kg/667m2、磷肥36kg/～47.5kg/667m2、钾肥21kg～28.5kg/667m2,川党参药材产量高;正交试验以处理组合,氮肥24kg/667m2、磷肥40kg/667m2、钾肥16kg/667m2、栽培密度55560株/667m2产量最高,方差分析表明,氮肥、磷肥、钾肥、氮磷互作、氮钾互作及磷钾互作对川党参产量均有显著影响;党参炔苷、党参多糖在施肥水平处理中差异不显著,磷肥能显著提高党参炔苷含量。结论:不同种类肥料之间存在相互作用,合理的配合施肥能提高川党参的产量和质量。

川党参锈病防治技术

川党参为桔梗科植物Codonopsis tangshen Oliv的根，以根供药用，具有补中益气、健脾益肺之功效；治脾肺虚弱、气短心悸、虚喘咳嗽、内热消渴等症。

川党参种子发芽检验标准化研究

[目的]通过研究不同温度、不同发芽床等条件对川党参种子萌发的影响,找出川党参种子发芽的最佳基本条件,从而为川党参的规范化栽培提供一定的依据。[方法]采用常规的发芽试验方法进行试验,不同温度(15,20,25,30,15/25,20/30℃)和不同发芽床(纸间、纸上、砂间、砂上)等处理对川党参种子进行发芽试验,测定发芽率和发芽指数。[结果]在25℃下川党参种子发芽率在第8天达到高峰,在15℃下川党参种子发芽率最低。发芽床以砂上为最佳,砂中为最差。[结论]在25℃进行砂上培养是川党参种子萌发检验的最适条件。

川党参药材质量标准研究

目的：对川党参主要产地的药材样品进行分析研究，建立川党参药材质量标准。方法：HPLC法测定党参炔苷含量，比色法测定党参多糖、川党参总皂苷，原子吸收光谱法测定川党参药材中As、Pb、Hg、Cd、Cu含量，气相色谱法测定BHC、DDT，其余检查项目参照《中国药典》收录方法测定。结果：川党参药材检查项水分、总灰分、酸不溶灰性分、醇溶性浸出物含量范围与均值分别是6.0%-9.4%、7.82%，2.01%-7.72%、4.62%，0.23%-3.65%、1.52%，51.74%-70.02%、61.03%；党参炔苷、党参多糖和党参总皂苷的含量范围与均值分别是0.44-2.4 mg·g-1、1.121 mg·g-1，13.85%-38.14%、21.67%，7.92-28.76 mg·g-1、11.27 mg·g-1。结论：川党参药材的水分不得高于8.7%，总灰分不得过6.5%，酸不溶性灰分不得过2.5%，醇溶性浸出物（热浸法）不得少于55.0%，党参炔苷不少于0.53 mg·g-1，党参多糖不得少于14.7%，党参总皂苷不得少于7.3 mg·g-1；重金属和有害元素不得超过“药用植物及制剂外经贸绿色行业标准（WM/T2-2004）”， BHC和DDT均不得检出。

川党参对土壤中重金属镉的积累特性研究

在野外条件下,采用盆栽方式,研究了川党参对土壤中重金属镉的积累特性。结果表明,川党参对土壤中的重金属镉具有富集作用,且随着土壤中添加镉浓度的增加,富集作用增强,但对川党参根长、根粗和根重的生长影响不显著。川党参茎叶对镉的富集作用强于根部,约为根部的1.5倍;而整株对镉的富集浓度约为土壤中的剩余镉浓度的6~12倍,具有显著的富集特性。不同采收月份,川党参根对镉的富集效果有差异,8月根中镉含量最低。不同地域试验中,巫山和武隆两地试验结果均显示,两地川党参对土壤中镉的吸收规律基本一致,但巫山川党参根和茎对土壤中镉的富集作用都强于武隆的。

川党参药材质量化学成分多指标综合评价研究

目的:探讨建立川党参药材质量的化学成分多指标评价方法。方法:权重分配按客观赋权法计算。TOPSIS评价川党参多指标的质量。结果:四种赋权方法的评价结果基本一致。结论:多指标综合评价与主成分聚类分析、遗传多样性分析和HPLC指纹图谱分析结果一致,并具有可量化的优点,可用于药材质量多指标评价。

川党参的化学成分研究

从川党参(Codonopsis tangshen Oliv.)根中分离得到11个化合物。本文报道其中的10个。经光谱法证明,它们依次是9,10,13,-三羟基-反-11-十八烯酸(9,10,13-trihydroxy-(E)-11-Octadecenoic acid)1,(6R,7R)-反,反-十四烷-4,12-二烯-8,10-二炔-1,6,7-三醇[(6R,7R)-E,E-tetradeca-4,12-diene-8,10-diyne-1,6,7-triol]2,蒲公英萜醇,蒲公英萜醇乙酸乙酯,木栓酮,α-菠甾醇,α-菠甾醇-β-D-葡萄糖甙,α-菠甾酮,香荚兰酸,5-羟甲基-2-糠醛。其中化合物1为首次从该属植物中获得,并有PGE样活性的报道。

川党参产地加工方法对化学成分的影响

目的:比较川党参产地的不同初加工方法对化学成分的影响,为党参药材的质量控制及饮片炮制提供参考。方法:以醇浸出物、党参多糖、党参皂苷、党参炔苷及5-HMF为指标,对川党参产地不同加工方法进行比较研究。结果:醇浸出物量随揉搓次数增加而升高,而揉搓次数对党参炔苷、党参多糖及党参皂苷无显著影响(P>0.05);抢水洗样品较浸洗样品党参炔苷含量高,而醇浸出物、党参多糖及党参皂苷含量无显著性差异(P>0.05);80℃干燥样品党参皂苷含量最高,但多糖含量最低,而5-HMF仅在80℃以上干燥条件下出现,党参炔苷含量随干燥温度升高而降低;传统川党参加工方法较工厂加工方法所得样品浸出物含量高,而其他成分无明显差异。结论:川党参传统"七搓八扳"方法劳动强度大,生产效率低,工厂加工方法生产效率高,更适合规模化生产。产地加工方法以抢水洗,70℃烘干为宜。