川续断中大花双参苷A含量的反相高效液相色谱法测定

目的建立反相高效液相色谱法测定川续断药材中大花双参苷A的含量。方法采用PhenomenexRP—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相：A相：甲醇；B相：水，梯度洗脱；流速1．0m1．min^-1，柱温为30℃，检测波长230nm。结果大花双参苷A在线性范围0．21—1．26g内线性关系良好；平均回收率（n=6）为99．48％。结论该方法为川续断药材的质量控制提供实验依据，该方法具有简便、快速、准确、重现性好的特点。

UPLC-MS/MS法测定腰息痛胶囊中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定腰息痛胶囊中川续断皂苷Ⅵ的含量。方法液相条件为Waters ACQUITY UPLC®BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温35℃,进样量5μL;质谱条件为电喷雾离子源(ESI)、正离子扫描模式,以多反应监测模式(MRM)进行数据采集,川续断皂苷Ⅵ的定量离子对为m/z 946.4→455.3。结果川续断皂苷Ⅵ在0.0787~3.9327μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9987),精密度、重复性、稳定性的RSD分别为2.5%、4.1%、5.3%,平均加标回收率为95.9%。16批样品中川续断皂苷Ⅵ的含量范围为18.07~659.78μg/g。结论所建立的方法能对腰息痛胶囊中川续断皂苷Ⅵ的含量进行快速测定,有助于提升该制剂的质量。

HPLC法测定大鼠血浆中川续断皂苷VI的浓度

目的:建立了高效液相色谱测定大鼠血浆中川续断皂苷VI浓度的方法。方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用HPLC法测定。色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-甲醇-水(32:17:51,v/v);检测波长205nm;柱温为室温;流速1.0mL·min-1。动物实验使用Wistar大鼠6只,采用腹腔注射给药(55mg·kg-1),进行血药浓度测定和药动学参数计算。结果:大鼠血浆内源物质对药物测定无干扰,在血药浓度5.0～500.0μg·mL-1范围内,浓度对峰面积有良好的线性关系(r=0.9946),定量下限为5.0μg·mL-1;低、中、高3种浓度样品的回收率分别为85.0%、83.6%和86.6%,平均为85.0%;日内、日间精密度RSD均小于7.8%(n=9)。采用非房室模型分析方法进行数据处理,所得参数符合药物动力学变化趋势。结论:该法准确、简便,可用于川续断皂苷VI在大鼠血浆中的浓度测定和药物动力学研究。

HPLC法同时测定艾附暖宫丸中芍药苷、阿魏酸和川续断皂苷Ⅵ

目的建立同时测定艾附暖宫丸中芍药苷、阿魏酸、川续断皂苷Ⅵ的高效液相色谱法。方法艾附暖宫丸50%甲醇提取液的高效液相色谱分析以C18色谱柱为固定相,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,体积流量1mL/min,柱温为30℃,线性梯度洗脱,芍药苷、川续断皂苷Ⅵ检测波长为230nm、阿魏酸检测波长为321nm。结果芍药苷在0.502-5.016 7μg（r=0.999 3）范围内、阿魏酸在0.147-1.760μg（r=0.999 8）范围内、川续断皂苷Ⅵ在0.975-11.480μg（r=0.999 5）范围内,对照品进样质量和色谱峰峰面积呈良好线性关系,加样回收率分别为97.8%、100.5%和97.6%,RSD值分别为2.0%、2.0%和1.8%。结论建立的高效液相色谱法简便稳定、准确可靠,可用于艾附暖宫丸的质量控制。

重庆产区不同居群续断中总皂苷与川续断皂苷Ⅵ的含量分析

目的测定重庆产区不同居群续断中总皂苷与川续断皂苷Ⅵ的含量,探讨其在居群间的含量差异。方法以香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色体系,采用分光光度法测定续段中总皂苷的含量;采用HPLC法测定续断中川续断皂苷Ⅵ的含量。结果各居群续断均能达到药典规定的药用标准,但不同居群续断中皂苷类成分的含量差异较大,以武隆产续断中皂苷成分含量较高。结论实验方法适用于续断的质量分析,可以为续断的质量评价提供参考。

HPLC-ELSD同时测定山银花中绿原酸、木犀草苷和川续断皂苷乙的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定山银花中绿原酸、木犀草苷和川续断皂苷乙的方法。方法:采用Col-umn XB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,用乙腈(A)-0.5%冰醋酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,以蒸发光散射检测器检测绿原酸和川续断皂苷乙。梯度程序为:0 min(A:9%,B:91%)保持10→12 min(A:29%,B:71%)→20 min(A:33%,B:67%)→25 min(A:45%,B:55%),流速1.0 ml/min;检测器漂移管温度100℃,载气流速为3.0 ml/min。结果:绿原酸、木犀草苷及川续断皂苷乙的回归方程分别为:Y绿原酸=1.341 1X+4.360 1,r=0.999 5;Y木犀草苷=25 948.31X-22.863 41,r=0.999 92,Y川续断皂苷乙=5.688 8 X+5.350 6,r=0.999 6。线性范围分别为:绿原酸0.005-0.045 mg/ml;木犀草苷0.017 7-0.085 5 mg/ml,川续断皂苷乙0.048 6-0.243 mg/ml。结论:该方法操作简便、结果准确,专属性强,分离效果和重现性好,可有效缩短总分析时间,为较全面控制金银花药材的质量控制提供了简便可靠的方法。

HPLC-UV及ELSD法测定续断皂苷VI的比较研究

目的:比较两种检测方法优劣,为丰富续断药材质量控制方法提供参考。方法:采用HPLC-UV及ELSD串联检测技术同时检测续断皂苷VI。结果:紫外检测器基线易漂移且有溶剂峰,蒸发光散射检测器基线平稳,但出峰不多;对两种检测器均有响应的续断皂苷VI,其出峰时间基本一致,蒸发光散射检测器下所得色谱峰明显高于紫外检测器;紫外检测方式的重复性、线性关系及加样回收率略优于蒸发光散射检测,两者均符合含量测定要求,且两种检测方式测定的样品结果相当。结论:紫外检测器灵敏度及稳定性较好;蒸发光散射检测器适用范围更广,能消除流动相配比变化对基线产生的影响,可以很好的支持梯度洗脱;HPLC-UV,HPLC-ELSD及HPLC-UV/ELSD串联均可作为续断药材含量测定方法。

高效液相色谱法测定黔不同产地的续断中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的:用HPLC法测定黔不同产地的中药材续断中川续断皂苷Ⅵ的含量,为评价贵州省药材续断的质量标准提供参考。方法:采用高效液相色谱法测定16个贵州省不同地区的续断药材,色谱柱为Hypersil ODS(4.6 mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(30∶70);流速1.0mL.min-1;检测波长212 nm;柱温35℃。结果:川续断皂苷Ⅵ在该色谱条件下获得良好分离,线性范围为0.007 41～0.051 87 mg.L-1,r=0.999 6,平均加样回收率为96.82%,RSD为2.4%,重复性RSD为2.7%。结论:方法快速简便,结果准确可靠。

高效液相色谱-电喷雾质谱分析川续断皂苷Ⅵ在大鼠体内的代谢产物

目的:研究川续断皂苷Ⅵ在大鼠体内的代谢。方法:采用高效液相色谱-电喷雾质谱检测大鼠灌胃川续断皂苷Ⅵ后血浆、尿液、胆汁和粪便中的代谢产物。使用Agilent公司Zorbax Extend-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5!m),以0.05%甲酸乙腈-0.05%甲酸水为流动相梯度洗脱(0～12 min,25%B→27%B;12～30 min,27%B→50%B;30～40 min,50%B→80%B;40～45 min,80%B→90%B;45～50 min,90%B),进行色谱分离,并与电喷雾质谱联用,毛细管电压为2.50 kV,锥孔电压为35 V,干燥气流速为320 L.h-1以及离子源温度为120℃,根据全扫描检测正、负离子模式下获得的准分子离子峰推测化合物的分子量信息及其可能的化学结构。结果:在大鼠血浆、尿液、粪便和胆汁中均检测到原型成分,粪便中检测到川续断皂苷Ⅵ脱去1分子(RM1,RM2)、2分子(RM3,RM4)及全部糖基(RM5)的5个代谢产物,血浆和胆汁中检测出脱去2分子葡萄糖残基的代谢产物(RM4),此外在胆汁中首次发现川续断皂苷Ⅵ的羟基化产物(RM6)。结论:川续断皂苷Ⅵ在大鼠体内的转化主要是在肠道的脱糖基代谢及在肝脏的羟基化反应。

珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定

目的建立高效液相色谱法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法供试品用60%乙醇超声提取40min,滤过,取续滤液作为供试品溶液;高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱：InertsilODS-sp（5μm,4.6 mm×150 mm）;流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（35∶65）;柱温：30℃;流速：1.0 ml/min;检测波长：203 nm。结果珠子参中竹节参皂苷Ⅳa与其他组分分离良好,保留时间12.5 min。竹节参皂苷Ⅳa对照品线性范围1.007 6~10.076μg,r=0.999 9,平均回收率为103.46%,RSD为0.81%。结论该法操作简便,方法稳定性,分离度好,灵敏度高,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定。

黄芪药材提取纯化过程中黄芪皂苷Ⅳ含量变化及相关成分分析

该文建立了准确测定黄芪药材中游离黄芪皂苷Ⅳ含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,并研究了2015年版《中国药典》黄芪项下黄芪皂苷Ⅳ(黄芪甲苷)含量测定前处理操作对黄芪皂苷Ⅳ含量的影响。分别比较索氏提取后、正丁醇萃取后和氨试液除杂后黄芪皂苷Ⅳ的含量变化,并利用具有超高分辨率的傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR-MS)分析其成分的差异性。结果表明,在优化条件下,黄芪药材中黄芪皂苷Ⅳ在0.3870~24.75 mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.9998,检出限(LOD)为1.0 mg/kg,定量下限(LOQ)为3.0 mg/kg,加标回收率为94.5%~105%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.4%。研究发现甲醇直接提取的黄芪皂苷Ⅰ相对含量最高,正丁醇萃取后的氨试液除杂过程会导致黄芪皂苷Ⅰ及其他黄芪皂苷Ⅳ同系物水解,黄芪皂苷Ⅰ的相对含量显著降低,而黄芪皂苷Ⅳ的含量显著升高;并发现黄芪药材中存在目前尚未报道的黄芪皂苷Ⅱ异构体,将其命名为新黄芪皂苷Ⅱ。

高效液相色谱法测定不同产地续断药材中木通皂苷D的含量

【目的】考察不同来源续断药材中木通皂苷D的含量，为评价续断药材质量提供参考。【方法】采用反相高效液相色谱法测定续断药材中木通皂苷D的含量，色谱柱KromasilC18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水梯度洗脱，检测波长212nm，流速为1．0ml／min。【结果】在实验条件下木通皂苷D分离效果良好，0．036～3．695μg范围内其线性关系良好（r=0．9999）；平均加样回收率为104．87％，RSD为1．85％。【结论】该方法准确、可靠，为续断药材的质量评价提供研究基础。

山银花皂苷提取条件优化研究

首次建立山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的最佳提取工艺。采用单因素试验和正交试验考察提取溶剂浓度、提取时间、提取温度、料液比对灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的影响。结果表明,两种皂苷的最佳提取工艺条件如下:以浓度为90%的乙醇溶液作为提取剂,回流时间为120 min,料液比为1∶10(m∶V),回流温度为80℃,该条件下灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙的总提取率可达到7.9%。

热痹痛合剂HPLC指纹图谱的建立和芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷Ⅵ的测定

目的建立热痹痛合剂的HPLC指纹图谱和热痹痛合剂中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI的HPLC测定方法。方法指纹图谱分析采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈–0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为212 nm;体积流量为1 mL/min;柱温30℃;进样量10μL。对指纹图谱进行相似度评价,并运用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法–判别分析分析热痹痛合剂样品图谱。采用HPLC法测定芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI,采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈–0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长230 nm(芍药苷)、280 nm(柚皮苷、黄芩苷)、260 nm(川续断皂苷VI);体积流量1 mL/min;柱温30℃;进样量为10μL。结果10批热痹痛合剂样品的指纹图谱中有26个共有峰,相似度均大于0.99,化学模式识别将10批样品分为2大类,OPLS-DA分析筛选出4个对制剂质量差异影响较大的化合物。含量测定中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI分别在27.238~272.384、38.207~382.066、77.864~778.642、51.015~510.015μg/mL线性良好,平均回收率分别为95.34%、103.51%、103.51%、102.68%,RSD值分别0.65%、1.12%、0.86%、2.41%。结论所建立的方法准确、合理,重复性好,可用于热痹痛合剂的质量控制和评价。

HPLC-ESI/MS法测定续断“发汗”前后绿原酸和川续断皂苷Ⅵ的含量

目的:建立续断"发汗"前后绿原酸和川续断皂苷Ⅵ的高效液相色谱-电喷雾-三重四极杆质谱联用测定方法。方法:采用Agilent Zorbax SB C18(3.5 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以水(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱(0～3 min,60%B→100%B;3～7 min,100%B;7～10 min,100%B→60%B)。绿原酸以m/z 353.0为母离子,m/z 191.0、127.0为子离子,川续断皂苷Ⅵ以m/z 927.5为母离子,m/z 603.3、323.3为子离子,采用多反应监测(MRM)负离子模式对续断"发汗"前后进行检测。结果:5个不同批次的续断经"发汗"后,绿原酸含量均有所降低,分别降低了41.18%、20.54%、20.51%、54.27%、5.02%;川续断皂苷Ⅵ的含量均有所增加,分别增加了15.45%、1.18%、12.08%、9.22%、119.72%。结论:产地加工—"发汗"影响续断中绿原酸和川续断皂苷Ⅵ的含量,实验结果为进一步研究"发汗"机理提供依据。

HPLC法同时测定腰痛片中芍药苷、川续断皂苷Ⅵ、补骨脂素和异补骨脂素含量

目的：建立同时测定腰痛片（杜仲叶、赤芍、补骨脂、续断、狗脊等）中活性成分芍药苷、川续断皂苷Ⅵ、补骨脂素与异补骨脂素含量的方法。方法：采用HPLC法,色谱柱为Inert Sustain C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈（A）-水（B）,梯度洗脱（0 min,10%A;60 min,50%A）,流速1 m L·min-1,柱温25℃,检测波长为212 nm（川续断皂苷Ⅵ）、238 nm（芍药苷、补骨脂素和异补骨脂素）,进样量10μL。结果：芍药苷、川续断皂苷Ⅵ、补骨脂素与异补骨脂素质量浓度分别在201.6-4 032μg·m L-1（r=0.999 5）、80-2 000μg·m L-1（r=0.999 9）、11.04-220.8μg·m L-1（r=1.00 0）、8.7-174μg·m L-1（r=0.999 7）范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率（n=9）分别为100.6%、100.6%、100.4%、99.93%,精密度试验RSD均小于0.80%。结论：经方法学验证,该法能同时测定4种成分的含量,适用于腰痛片的质量控制。

续断“发汗”前后两个主要成分在大鼠体内的药代动力学研究

目的:建立基于高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS)测定大鼠口服“发汗”前后续断中主要成分马钱苷和川续断皂苷Ⅵ的血药浓度测定方法,研究其药代动力学特征。方法:通过给大鼠灌胃服用“发汗”前后续断水煎液,分别于给药前和给药后在指定时间取眼眶窦血。采用HPLC-MS技术测定大鼠血浆中“发汗”前后续断中马钱苷与川续断皂苷Ⅵ的浓度。结果:大鼠口服给药5 min后,血中可以检测到马钱苷与川续断皂苷Ⅵ,“发汗”前续断马钱苷:半衰期为93.79 min,川续断皂苷Ⅵ的半衰期为86.51 min;“发汗”后续断:马钱苷和川续断皂苷Ⅵ的半衰期为69.71 min,85.78 min;“发汗”前续断的马钱苷与川续断皂苷Ⅵ的Cmax和AUC较大,表明“发汗”前续断的马钱苷与川续断皂苷Ⅵ更有利于发挥疗效。结论:该方法适用于“发汗”前后的续断在大鼠体内马钱苷和川续断皂苷Ⅵ血药浓度的测定及药代动力学研究,实验结果表明,未“发汗”续断中的马钱苷与川续断皂苷Ⅵ更有利于发挥疗效。

HPLC法测定更年乐片中朝藿定C、淫羊藿苷、川续断皂苷Ⅵ和大花双参苷A

目的：建立多波长HPLC梯度洗脱法同时测定更年乐片中朝藿定C、淫羊藿苷、川续断皂苷Ⅵ和大花双参苷A的方法。方法依利特C18柱（250 mm＆#215;4.6 mm，5μm）；流动相为乙腈–0.1%磷酸溶液，梯度洗脱；检测波长：270 nm（朝藿定C和淫羊藿苷）、210 nm（川续断皂苷Ⅵ）、230 nm（大花双参苷A）；体积流量为1.2 mL/min；柱温为室温；进样量20μL。结果朝藿定C、淫羊藿苷、川续断皂苷Ⅵ和大花双参苷A分别在7.14～142.80μg/mL（r＝0.9998）、5.64～112.80μg/mL （r＝0.9996）、6.35～127.00μg/mL（r＝0.9995）、7.90～158.00μg/mL（r＝0.9993）与其峰面积呈良好的线性关系；朝藿定C、淫羊藿苷、川续断皂苷Ⅵ和大花双参苷A的平均回收率分别为99.24%、96.93%、97.81%、98.32%，RSD值分别为1.28%、0.94%、1.24%、1.50%。结论该方法是一种快速、灵敏、准确的分析方法，可作为更年乐片的质量控制方法。

HILIC-HPLC测续断药材中多种皂苷含量

目的:建立同时测定续断药材中3种主要皂苷(川续断皂苷Ⅵ、Ⅹ和Ⅻ)含量的HILIC-HPLC方法,对不同产地、商品等级、药材部位的药材质量进行分析。方法:Venusil HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为水-乙腈线性梯度洗脱;流速1 mL.min-1;柱温25℃;检测波长203 nm。结果:建立同时测定续断药材中3种皂苷含量的方法。不同产地药材川续断皂苷Ⅵ、Ⅹ和Ⅻ的含量范围分别为0.77%～14.31%,0.39%～3.19%,0.41%～1.49%,云南、四川含量较高,湖北、贵州含量较低;商品等级低的药材含量较高;芦头、残茎和须根含量低于主根。结论:本方法操作简便、结果准确,可用于续断药材中皂苷含量的测定,为其质量评价提供了参考。

竹节参不同部位竹节参皂苷Ⅳa含量测定

目的测定竹节参根、茎、叶中竹节参皂苷Ⅳa含量,挖掘其开发价值。方法采用HPLC法测定竹节参根、茎、叶中竹节参皂苷Ⅳa含量,色谱柱为Inertsil ODS(4.6 mm×150 mm,5 μm),乙腈-0.2%磷酸(35∶65)为流动相,流速1 ml/min,柱温35 ℃,检测波长210 nm。结果竹节参皂苷Ⅳa在1~10 μg范围内线性关系良好(r=0.999 5),竹节参根、茎、叶中竹节参皂苷Ⅳa含量分别为2.169%、0.269%、0.169%。结论竹节参根、茎、叶中均含有竹节参皂苷Ⅳa,以根中含量最高,茎中次之,叶中最少;根可作为其药用部位,茎和叶也有一定的开发价值。