新型川芎嗪衍生物的合成及其抗癌活性研究

目的合成新型川芎嗪衍生物并对其抗癌活性和毒性进行评价。方法以中医经典方药中抗癌活性成分为原料,利用拼合原理,设计、合成川芎嗪衍生物,并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测川芎嗪衍生物对Hela(人宫颈癌)细胞模型的抗癌活性和对正常细胞MDCK(犬肾上皮细胞)的毒性。结果获得4个未见报道的川芎嗪类新化合物,均经光谱方法鉴定了结构,其中化合物10和12能明显抑制Hela细胞的增殖,抗癌活性显著高于其合成前体;且对MDCK细胞的毒性明显小于顺铂。结论该结果进一步验证以拼合原理为指导,从经典方药中发现新型低毒抗癌先导化合物的研究思路是可行的。

川芎嗪衍生物影响肝星状细胞增殖的作用机制研究

目的研究川芎嗪衍生物H168抑制肝星状细胞(HSC-T6)增殖的机制。方法 MTS比色法观察H168对HSC-T6细胞增殖的影响;流式细胞仪检测H168对细胞周期的影响;应用Western blot和Real time PCR方法观察H168对p21/p27蛋白及mRNA表达的影响。结果 MTS结果显示H168具有明显的抑制HSC-T6增殖的作用,随着药物浓度的增大,对HSC-T6增殖的抑制作用逐渐增强,呈现量效关系。流式细胞周期检测发现H168作用24 h后,G0/G1期细胞增多,S期及G2/M期细胞减少;Western blot结果显示H168通过促进p21/p27蛋白表达抑制细胞的增殖;进一步采用Real timePCR研究发现,H168能够从mRNA水平促进p21/p27表达。结论 H168能抑制HSC-T6细胞的增殖,这主要是通过促进p21/p27蛋白和mRNA的表达而抑制HSC-T6细胞增殖。

川芎嗪衍生物的合成及其抗自由基活性研究

为了改善川芎嗪的水溶性,且寻找到生物活性更好的川芎嗪衍生类化合物,对川芎嗪进行了化学修饰,合成了6种川芎嗪衍生物,其中5种未见文献报道.采用比色法测试了6种川芎嗪衍生物的抗自由基活性,并与川芎嗪进行了比较,结果表明,化合物Ⅵ对O2 的清除作用优于川芎嗪,所合成的6种川芎嗪衍生物对·OH的清除作用均优于川芎嗪.

川芎嗪衍生物对人阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙浓度的影响

目的研究川芎嗪(TMP)衍生物(A3-A6)对人阴茎海绵体平滑肌细胞(PCSMC)胞质内游离钙离子(Ca2+)浓度的影响。方法采用新型Ca2+荧光染色剂Fluo-3/AM负载人PCSMC,应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)实时测定胞质内[Ca2+]i变化。以母体川芎嗪和经典钙拮抗药维拉帕米(Ver)为阳性对照,分别观察A3-A6对去甲肾上腺素(NE)诱导胞质内钙浓度升高的影响。结果在浓度0.2 mmol.L-1时,A3-A6对NE诱发的人PCSMC内[Ca2+]i升高有明显抑制作用,抑制率分别为49.03%,54.83%,51.48%和50.31%,优于TMP(18.96%),远大于Ver(16.51%)(P<0.05)。结论A3-A6对人PCSMC电压依赖性钙通道均有抑制作用,能降低PCSMC胞质内Ca2+水平,其作用效果均比TMP强。

川芎嗪衍生物影响肝星状细胞凋亡作用及其机制研究

目的研究川芎嗪衍生物H168对大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSC)凋亡的影响及其作用机制。方法采用细胞乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒观察药物对LDH活性的影响;MTT实验检测药物对细胞增殖的影响;流式细胞仪AnnexinⅤ/PI双染方法检测药物对细胞凋亡率影响;应用Western blot方法观察药物对凋亡相关细胞因子Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。结果细胞毒性实验发现当H168作用终浓度低于150μmol.L-1时,不具有明显细胞毒作用;MTT实验研究发现药物浓度为10μmol.L-1和25μmol.L-1具有抑制细胞增殖的作用;流式细胞仪检测药物对细胞凋亡率的影响,发现H168具有促进HSC凋亡的作用,且呈量效关系;Western blot结果显示H168通过提高Bax/Bcl-2蛋白的比值和Caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡。结论 H168具有促进HSC-T6凋亡的作用,这种作用的发挥主要是通过提高Bax/Bcl-2蛋白的比值和Caspase-3蛋白的表达实现的。

川芎嗪衍生物构效关系研究进展

川芎嗪已广泛用于心脑血管疾病的治疗,但对其构效关系和结构优化的系统研究报道较少,需要更深入的研究和总结。综述了92个川芎嗪衍生物,包括衍生物醚类、酯类、哌嗪类和茋类,系统地分析了川芎嗪衍生物构效关系,为进一步开发川芎嗪先导化合物提供了一定的参考。

川芎嗪芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性

以具有活血化淤作用的中药有效成分川芎嗪、阿魏酸为先导物,按药物化学拼合原理,设计合成了6个全新结构的川芎嗪芳酸衍生物,其结构经IR,1HNMR,13CNMR及MS确证.体外药效筛选结果显示,部分川芎嗪芳酸衍生物对二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集具有较好的抑制活性,其中川芎嗪阿魏酸拼合物(1a)的抑制活性是奥扎格雷的5.7倍.

川芎嗪肉桂酰类双酯衍生物对内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的观察2,5-二(2,5-二甲氧基肉桂酰氧甲基)-3,6-二甲基吡嗪(TMPC)对H_2O_2引起的体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法 H_2O_2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤,观察TMPC对内皮细胞氧化损伤的保护作用。结果 TMPC对H_2O_2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤有明显的保护作用,能减少内皮细胞脂质过氧化物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的生成,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,减轻H_2O_2诱导的内皮细胞内游离钙离子升高引起的钙超载。结论 TMPC可有效保护H_2O_2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤,维持或恢复细胞正常的生理功能,其机制可能与TMPC能有效抑制细胞内钙超载,减少脂质过氧化物的生成,提高抗氧化物质的活性有关。

新型川芎嗪阿魏酸衍生物的合成及其抗血小板聚集活性

以阿魏酸及其类似物为原料,设计并合成了6个新型的川芎嗪阿魏酸衍生物,其结构经1H NMR,13 C NMR,IR及MS表征。初步药理活性测试结果显示,部分化合物的血小板抑制率较高。

川芎嗪硝酮衍生物在大鼠体内的组织分布研究

目的对正常大鼠体内川芎嗪(TMP)硝酮衍生物:(2-N-叔丁基硝酮)-3,5,6-三甲基吡嗪(2-[[(1,1-dimethylethyl)oxidoimino]methyl]-3,5,6-trimethylpyrazine,TBN)的组织分布进行研究。方法用Purospher C18柱(4.6mm×150.0 mm,5μm),以甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾水溶液(45∶55,pH3)为流动相,检测波长为295 nm,建立大鼠血浆及组织内TBN含量分析的HPLC-UV方法,用于组织分布研究。结果静脉(80 mg.kg-1)给药后,TBN在各种组织的AUC0-360在2.48～13.74 mg.min.g-1,从高到低依次为:血浆>肺>肾>肝>脾>脑>心;MRT0-360在129.50～161.95 min,由长到短依次为:肺>脾>肾>脑>肝>心>血浆。结论本研究建立的HPLC方法专属性强、简便、快速、准确;用此法得知,TBN静脉给药后,可快速分布于各组织中,包括脑组织。

川芎嗪哌嗪衍生物的合成与表征

以川芎嗪三水合物为原料,经氧化、酰化、水解、卤代和烃化反应合成了4个川芎嗪哌嗪衍生物,通过红外光谱、核磁共振氢谱和质谱对其结构进行了表征。

川芎嗪硝酮衍生物在脑缺血模型大鼠脑中浓度

目的考察脑缺血模型大鼠与正常大鼠脑组织中(2-N-叔丁基硝酮)-3,5,6-三甲基吡嗪(TBN)的浓度差异。方法用线栓法,建立大脑中动脉栓塞脑缺血大鼠模型,按不同剂量或在不同再灌注时间后给药,用HPLC方法测定脑组织中TBN浓度。结果以不同剂量、在不同再灌注时间后给药,TBN在模型大鼠脑中的浓度均基本高于正常大鼠。模型鼠脑中TBN浓度随剂量增加而增大,两者呈良好的线性关系。于不同再灌注时间后给药,对脑中TBN浓度影响明显。结论在脑缺血再灌注后,TBN能更有效地透过大鼠血脑屏障,产生更高的脑药浓度。

川芎嗪酯类衍生物在内皮细胞氧化损伤中的保护作用

目的观察川芎嗪酯类衍生物对H_2O_2引起的体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤的保护作用,并初步探讨川芎嗪双酯衍生物在家兔动脉内皮氧化损伤中的保护作用。方法 H_2O_2引起体外培养人脐静脉内皮细胞及家兔动脉内皮氧化性损伤,观察川芎嗪双酯衍生物对内皮细胞氧化损伤的保护作用。结果在各试验浓度,大多数川芎嗪双酯衍生物对H_2O_2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤有明显的保护及促增殖作用,A6在较高浓度对家兔动脉内皮的氧化损伤有保护作用。结论川芎嗪酯类衍生物对H_2O_2引起的体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤有明显保护作用,其中以A15效价最高,在其作用机制进一步研究中值得注意。

新型川芎嗪-香豆酸衍生物对拟脑缺血模型的形态保护作用

目的探讨新型川芎嗪-香豆酸衍生物(T-CA)对拟脑缺血模型的形态保护作用。方法通过体外培养,使用神经生长因子(NGF)诱导分化PC12细胞,预先给予一定浓度(60μmol·L^(-1))的新型川芎嗪-香豆酸衍生物保护后,加入氯化钴(CoCl_2,300μmol·L^(-1))损伤细胞。采用Giemsa染色、DAPI染色、吖啶橙(AO)及吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色等方法,观察T-CA对CoCl_2损伤PC12细胞模型的形态保护作用。同时观察T-CA对大脑中动脉缺血(MCAO)模型大鼠的存活情况及脑皮层神经细胞形态的影响。结果与损伤组相比,给药组可显著抑制CoCl_2损伤PC12细胞的凋亡,缓解其形态损伤并提高MCAO模型大鼠的存活率。结论新型川芎嗪-香豆酸衍生物T-CA对CoCl_2损伤PC12细胞模型具有显著的神经保护作用,可提高MCAO模型大鼠的存活率。

川芎嗪酯类衍生物的3D-QSAR研究

目的建立预测模型,进行合理的药物设计和修饰。方法应用构象系统搜索程序确定23个2-取代酰氧甲基-3,5,6-三甲基吡嗪衍生物的可能活性构象,并以此活性构象为模板构建了这23个小分子化合物的三维结构,采用CoMFA及CoMSIA法对衍生物进行系统的三维定量构效关系分析。结果与结论CoMFA模型交叉验证系数q2=0.694,回归系数R2=0.994,SEE=0.023,F=376.924。CoMSIA模型交叉验证系数q2=0.657,回归系数R2=0.987,SEE=0.034,F=166.815。两种方法得到的构效关系模型都具有较好的预测能力。通过分析分子场等值面图在空间的分布,可以观察到叠合分子周围分子场特征对化合物活性的影响,为该类化合物进一步结构优化提供了有价值的参考。

川芎嗪氨类衍生物合成方法工艺优化及抗血小板聚集活性评价

目的:通过单因素实验结果设计正交试验,确定反应的最佳实验条件,以提高目标物的产率。方法:采用生物电子等排和拼合原理合成川芎嗪氨类衍生物,以2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪和三溴化磷为原料合成溴代川芎嗪,再与氨类化合物反应,优化其合成工艺。结果:以DMF为溶剂,反应8 h,温度85℃,原料配比1∶1.2时为最佳条件,收率最高达到89%,IC 50=37.38<42.96。结论:该工艺具有操作简便、安全、收率高等优点,本实验结果可为合成川芎嗪衍生物的产率提高和抗血小板聚集药物的研制提供参考。

川芎嗪类衍生物药理活性的研究进展

川芎嗪是中药川芎的主要活性成分,已用于临床治疗脑血栓、冠心病和心绞痛药。因川芎嗪的代谢快、半衰期短、生物利用度低,严重制约了其在临床上的应用。故对其进行了化学结构改造和修饰,设计并合成川芎嗪的衍生物,成为提高川芎疗效的研究热点之一。目前,在人工合成哌嗪、肉桂酸、苯乙烯、酰基胍、酰胺、姜黄素和三萜衍生物等化合物方面已取得了一定成果,并获得了抗氧化、治疗心血管疾病、抗肿瘤、神经保护、抗菌及抗炎等药理学特性。现针对川芎嗪的化学结构修饰及其药理学活性研究进行综述,为川芎嗪的深入研究和临床合理应用提供参考。

川芎嗪的结构修饰及作用探讨

川芎嗪结构简单,药理作用广泛,以其为先导化合物,进行结构修饰与改造已有大量文献报道。研究人员希望从川芎嗪衍生物中寻找出对心脑血管疾病有较好疗效的药物,而对其抗凝血作用关注较少。通过对川芎嗪的结构修饰与改造,希望从中寻找出有较好抗凝血作用的药物。在新药研究中,以具有一定生物活性的天然产物成分为先导化合物,对其进行结构改造和修饰,开发高效低毒的新型药物,是寻找新药的重要途径。川芎嗪是我国自主开发研究的中药材有效成分,已被广泛应用于临床并取得了较好的疗效。然而代谢快、半衰期短等缺点使其应用受到限制。以川芎嗪为先导化合物进行结构改造,对于开发活性强、毒副作用小、疗效更好的川芎嗪衍生物类药物具有十分重要的理论和现实意义。

校正超滤法测定川芎嗪硝酮衍生物MPI-01的血浆蛋白结合率

目的:测定川芎嗪硝酮衍生物MPI-01在大鼠及人血浆中的蛋白结合率。方法:采用血浆超滤液测定超滤管与药物的非特异吸附系数,对超滤法进行校正,并验证校正超滤法的准确性。利用校正超滤法测定MPI-01血浆蛋白结合率,将所得结果与平衡透析法进行比较。结果:MPI-01与人及大鼠血浆蛋白结合率分别为8.3%～8.7%,7.5%～8.2%。结论:校正后的超滤法测定药物血浆蛋白结合率较为准确,尤其适于蛋白结合率低的药物。该法成功应用于MPI-01的血浆蛋白结合率测定,实验证明MPI-01与血浆蛋白结合程度低。

新型川芎嗪类衍生物的设计、合成及其生物活性的研究

以川芎嗪为先导化合物,设计合成了10个川芎嗪类衍生物,其结构经~1H NMR、^(13)C NMR、ESI-MS确证。采用MTT法考察目标化合物对A549、A549/DDP和HBE细胞株增殖的影响;采用划痕实验,transwell小室法考察目标化合物对A549迁移和侵袭能力的影响;采用Western印迹考察目标化合物对A549细胞迁移和侵袭的作用机制;另外,通过流式细胞仪分析其细胞周期。结果显示,目标化合物Z8和Z10有一定的抗增殖活性,其对A549细胞迁移和侵袭的能力有很强的抑制作用;其抑制作用与MMP-2和MMP-9浓度水平下降有关。细胞周期分析显示,目标化合物Z8和Z10会增强G2/M期细胞阻滞。