川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束的体外评价及在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布

目的探索川芎嗪聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)纳米胶束在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布。方法采用(PEG-PLGA)纳米胶束包载川芎嗪,制备川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束,对载药系统进行表征,采用体外释药和急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布试验对该载药系统进行评价。结果川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束粒径为(15.8±0.9)nm,Zeta电势为-(20.5±0.4)mV,载药量电镜结果表明川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束明显的圆球形结纳米胶束呈现良好的光束,散射良好;体外释药试验发现川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束释药缓慢,组织分布试验发现川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束在正常大鼠脏器中AUC分布大小表现为肺>肝>脾>心≈肾>脑,但是,该纳米胶束在急性心肌缺血模型大鼠中AUC分布大小却表现为肺>肝>心>脾>肾>脑,川芎嗪PEG-PLGA心脏中的1.68倍,且差异有统计学意义(P <0.05)。结论这些结果表明川芎嗪PEG-PLGA纳米胶束具有良好的载药性能和缓释药物特点,可将药物蓄积于缺血心肌,具有良好的心脏靶向性。

川芎嗪PEG-PE纳米胶束的体外评价、细胞摄取及抗心肌细胞凋亡研究

目的制备川芎嗪PEG-PE纳米胶束,并评价该纳米胶束的细胞摄取和抗心肌细胞凋亡效果。方法采用薄膜水化法制备川芎嗪PEG-PE纳米胶束,并进行表征。采用体外释药、细胞摄取和细胞凋亡试验对该载药系统进行评价。结果川芎嗪PEG-PE纳米胶束粒径为(15.8±0.9)nm,Zeta电势为-(20.5±0.4)mV,载药量为(5.7±0.3)%,包封率为(87.2±5.4)%。电镜结果表明川芎嗪PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度约为5.3μg·mL-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物的细胞摄取量,细胞外残留量减少;川芎嗪PEG-PE纳米胶束在10%胎牛血清DMEM培养基稳定性良好,采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞凋亡,Hoechst染色提示凋亡心肌细胞出现了大量形态学改变,而川芎嗪PEG-PE纳米胶束可以明显减少凋亡细胞和促凋亡Caspase-3活性、抑制促凋亡蛋白Bax表达,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,均显著优于川芎嗪(P<0.01)。结论川芎嗪PEG-PE纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优势,可很大程度上提高川芎嗪的心肌细胞摄取量,增强药物的抗心肌细胞凋亡作用。

黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束的制备、表征及在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布

目的制备黄芩苷-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)载药纳米胶束,并研究其体外释药性能及在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布。方法采用正交试验优选黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束的制备工艺,优化的黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束再进行粒径、Zeta电位和透射电子显微镜(TEM)检测表征,采用体外释放实验、组织分布实验对该载药系统进行评价。结果黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束优选的制备工艺条件为黄芩苷-PEG-PLGA的质量比为1∶10,旋转蒸发仪转动速率为80 r/min,水化温度为40℃,优化的黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束粒径为(18.5±0.5)nm,Zeta电位为(-10.9±0.7)mV,载药量为(7.9±0.3)%,包封率为(86.2±2.5)%。采用芘测定法检测PEG-PLGA纳米胶束的临界胶束质量浓度为3.8μg/mL,TEM检测发现黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束呈现粒径均一的圆球型;体外释放实验表明,黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束具有明显的缓释特征;组织分布实验表明黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束在正常大鼠脏器中分布大小顺序为肝>脾>心>肾>肺>脑,而在急性心肌缺血模型大鼠脏器分布大小顺序为肝>心>脾>肾>肺>脑,与正常大鼠比较,急性心肌缺血模型大鼠心脏中药物浓度在各时间段都呈现明显升高的趋势,在120 min时最高药物质量浓度可达(2 897±135)ng/mL,显著高于正常大鼠中心脏的最高药物浓度(2 411±89)ng/mL,该结果表明,黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束在急性心肌缺血区域具有良好的靶向性。结论黄芩苷PEG-PLGA纳米胶束具有良好的载药性能,体外释药缓慢,且可以将药物蓄积于缺血心肌部位,具有良好的心脏靶向性。

葛根素PEG-PLGA纳米胶束的体外评价、细胞摄取及抗急性心肌缺血的研究

PUE@PEG-PLGA纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优良特点。TEM电镜结果表明PUE@PEG-PLGA纳米胶束呈核壳状圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PLGA纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)大约为4.8 mg·L-1;激光共聚焦试验表明,PEG-PLGA纳米胶束可以增强香豆素-6细胞摄取量,且可聚集在线粒体周围,细胞外药物残留量定量结果也可间接证实,PEG-PLGA纳米胶束可以促进药物的细胞摄取。采用结扎冠状动脉制备急性心肌缺血模型大鼠,再随机分为假手术组,模型组,PUE组和PUE@PEG-PLGA高、中、低剂量组,在结扎后5 min各给药组尾iv给药。监测心电图ST段变化,测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙二醛(MDA)水平,并测量心肌梗死面积。PUE和PUE@PEG-PLGA纳米胶束均能降低升高的ST段,降低血清中CK,LDH,AST,MDA水平,减少心肌梗死面积;其中PUE@PEG-PLGA中、高剂量组的药效明显强于PUE组,低剂量组基本与PUE组等效。PUE@PEG-PLGA纳米胶束很大程度上提高PUE心肌细胞摄取量,增强药物抗急性心肌缺血作用,减少给药剂量。