川芎醇对血管内皮细胞增殖与损伤保护作用的研究

目的:研究川芎醇促血管内皮细胞增殖与对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法:用过氧化氢致人胎儿脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)损伤,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活数量。结果:川芎醇在浓度0.1～1.5mmol·L-1具有促进正常HUVECs增殖的作用,并且浓度依赖性地拮抗过氧化氢抑制血管内皮细胞的增殖,其活性较川芎嗪强。结论:川芎醇具有促血管内皮细胞增殖及保护血管内皮细胞损伤的作用。

川芎醇提取物对马桑内酯致痫神经元胞浆游离钙的影响

目的 研究川芎醇提取物对马桑内酯致痫神经元胞浆内游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)的作用 ,寻找创新中药的理论基础。方法 采用体外培养 4～ 6d的大鼠皮层神经元 ,分为生理盐水空白对照组、乙醇本底对照组、尼莫地平阳性对照组、川芎醇提取物干预组。以胞浆内Ca2 + 特异性荧光探针Fluo 3负载神经元后 ,分别加入马桑内酯 80、12 0 μg·ml-1作用 5min ,用激光扫描共聚焦显微镜动态监测药物对神经元胞浆 [Ca2 + ]的影响。结果 马桑内酯 12 0 μg·ml-1促进神经元 [Ca2 + ]荧光强度增加 ,乙醇抑制马桑内酯所致神经元胞浆内 [Ca2 + ]增加 ,尼莫地平有这种作用趋势却无统计学意义 ,川芎的醇提部分 10 0 μg·ml-1能够抑制马桑内酯导致的神经元胞浆Ca2 + 荧光强度增加 (P <0 .0 5 )。结论 川芎的醇提部分对致痫神经元有钙通道拮抗作用 。

川芎醇提物抗氧化活性及抗食源性致病菌特性分析

为了研究川芎醇提物(Ligusticum chuanxiong alcohol extract,LCAE)抗氧化活性及对食源性致病菌的抑制特性。对LCAE的主要活性组分进行了初步分析,并测定其还原力、总抗氧化能力及对羟自由基、超氧阴离子的清除效果;采用打孔法和倍比稀释法研究了LCAE对5种常见食源性致病菌的抑制作用,并探究了各试验菌的生长趋势。结果表明:LCAE中主要的活性组分川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)、阿魏酸、游离酚及结合酚的含量分别为55.7、31.45、177.38及42.86 g/kg。LCAE溶液稀释100倍后的还原力与14.79μg/m L VC相当,LCAE总抗氧化能力为4.46 U/mg。0.9 g/L LCAE对羟自由基清除率为超氧阴离子的1.12倍。LCAE对革兰氏阴性菌抑制效果强于阳性菌:沙门氏菌>大肠杆菌>假单胞菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌,且存在明显的浓度依赖性,MIC介于6.25～25 g/L之间,MBC介于12.5～50 g/L之间。等价浓度下,纯品TMP和阿魏酸的抑菌效果比LCAE弱。药物处理下各种菌生长曲线特性显示,随着LCAE浓度的增加,其中革兰氏阴性试验菌在对数期生长受到明显抑制,阳性菌稳定期延长。

梓醇-川芎嗪方对AD模型小鼠学习记忆行为及炎性因子的影响

目的探讨梓醇-川芎嗪方对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆行为及相关炎性因子的影响。方法将50只SPF级APPswe/PS1ΔE9双转基因雄性小鼠随机分为模型组、安理申组及梓醇-川芎嗪方低、中、高剂量组,每组10只;选取同月龄C57BL/6J野生型雄性小鼠10只作为正常组。梓醇-川芎嗪方低、中、高剂量组分别给予25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg梓醇-川芎嗪方灌胃,安理申组给予安理申溶液5 mg/kg灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,均每天1次,连续灌胃8周。Morris水迷宫实验检测记录第1~5天小鼠逃避潜伏期和第6天的穿越原平台次数,新物体识别测试小鼠1 h、24 h对新物体的偏好指数,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清和脑组织海马区神经相关蛋白[β淀粉样蛋白(Aβ)、Tau蛋白、磷酸化Tau蛋白(p-Tau)]含量和炎性因子[白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果第3~5天,梓醇-川芎嗪方各组和安理申组小鼠的逃避潜伏期均明显短于模型组(P均<0.05);梓醇-川芎嗪方高剂量组第4天、第5天的逃避潜伏期均明显短于川芎嗪方中剂量组和安理申组(P均<0.05);梓醇-川芎嗪方各组和安理申组小鼠穿越原平台次数均明显多于模型组(P均<0.05),且梓醇-川芎嗪方高剂量组明显多于梓醇-川芎嗪方低、中剂量组及安理申组(P均<0.05)。梓醇-川芎嗪方各组和安理申组1 h、24 h对新物体的偏好指数均明显高于模型组(P均<0.05),且梓醇-川芎嗪方高剂量组明显高于梓醇-川芎嗪方低、中剂量组及安理申组(P均<0.05),梓醇-川芎嗪方中剂量组及安理申组均明显高于梓醇-川芎嗪方低剂量组(P均<0.05)。梓醇-川芎嗪方各组和安理申组小鼠血清和脑组织海马区Aβ、Tau、p-Tau蛋白含量和IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α水平均明显低于模型组(P均<0.05),且梓醇-川芎嗪方高剂量组明显低于梓醇-川芎嗪方低、中剂量组及安理申组(P均<0.05),梓醇-川芎嗪方中剂量组及安理申组均明显低于梓醇-川芎嗪方低剂量组(P均<0.05)。结论梓醇-川芎嗪方可以改善APPswe/PS1ΔE9小鼠的学习记忆行为,且其作用与剂量呈正相关,机制可能与其可以降低血清和脑组织海马区Aβ、Tau、p-Tau蛋白含量和炎性因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α水平有关。

梓醇-川芎嗪方干预APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的作用机制研究

目的:探究梓醇-川芎嗪方干预APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的作用机制。方法:将3月龄C57BL/6J野生型小鼠为对照组(control组),构建阿尔茨海默病模型后,将同月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组(model组)、梓醇-川芎嗪方低剂量组(CT-L组)、梓醇-川芎嗪方中剂量组(CT-M组)、梓醇-川芎嗪方高剂量(CT-H组)、安理申组,对照组及模型组均给予生理盐水灌胃,各用药组以相应药物灌胃,每日灌胃1次,连续8周。对各组小鼠进行行为学观察,检测各组小鼠海马组织乙酰胆碱酯酶(AChE)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)及血清中β淀粉样蛋白42(Aβ42)。结果:行为学观察:与model组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组长时程学习和参考记忆能力、自主探究能力、情景识别记忆能力、短期工作记忆能力、条件恐惧记忆能力,缓解焦虑、抑郁状态等7项行为学指标均明显好转(P<0.01);与CT-L组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组7项行为学指标均明显好转(P<0.05或P<0.01);与CT-M组比较,CT-H组7项行为学指标均明显好转(P<0.05);与Arceipt组比较,CT-H组7项行为学指标均明显好转(P<0.05)。生化检测方面:与model组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高,AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与CT-L组比较,CT-M组、CT-H组、Arceipt组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高,AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与CT-M组比较,CT-H组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.05),AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低(P<0.05);与Arceipt组比较,CT-H组海马组织SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.05),AChE活性、iNOS、IL-6、TNF-α、MDA水平及血清Aβ42水平均降低(P<0.05)。结论:梓醇-川芎嗪方可以改善阿尔茨海默病模型小鼠的长时程学习和参考记忆能力、自主探究能力、情景识别记忆能力、短期工作记忆能力、条件恐惧记忆能力,缓解焦虑、抑郁状态,且其效应呈剂量依赖性,高剂量梓醇-川芎嗪方优于安理申。其作用机制可能与提高海马组织SOD、GSH-Px水平,降低AChE活性及iNOS、IL-6、TNF-α、MDA、Aβ42水平有关。

川芎对高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的影响

川芎煎液和醇提液ｉｇ和ｓｃ注射给药均能明显提高大、小鼠高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）含量和降低低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）含量。提示川芎不仅减少胆固醇在肠道的吸收，加速胆固醇在体内的转化，可能还增加高密度脂蛋白（ＨＤＬ）对血中胆固醇的转运和低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体对ＬＤＬ的摄取。

梓醇-川芎嗪方对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的影响

目的探讨梓醇-川芎嗪(CL)方对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠认知功能的影响。方法选用APPswe/PS1dE9双转基因模型小鼠,随机分为模型组、梓醇组、川芎嗪组、CL方组、盐酸多奈哌齐(安理申)组,每组10只。6月龄C57BL/6J小鼠10只作为对照组。梓醇组、川芎嗪组、CL方组及安理申组小鼠每天给予相对应剂量的梓醇、川芎嗪、CL方及安理申灌胃。对照组和模型组小鼠每天给予等体积的生理盐水灌胃,各组均为每天1次,连续灌胃8周,进行行为学测试即Morris水迷宫检测和新物体识别(NOR)检测。结果CL方可以明显缩短APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的逃避潜伏期、增加目标象限出现次数、延长目标象限游程、提高目标象限游程比、延长目标象限时间、提高目标象限时间比、增加穿台次数、缩短首次穿越平台时间、提高NOR测试中相对识别指数(P<0.05),以上作用不仅优于梓醇组、川芎嗪组,而且也优于安理申组。结论CL方可以有效改善AD模型小鼠的认知障碍,其效果既优于其单一成分,也优于安理申。

川芎嗪聚乙稀醇药膜预防硬膜外粘连实验研究

目的探讨自制川芎嗪聚乙稀醇药膜预防椎板切除术后硬膜外粘连的效果。方法将48只成年雄性新西兰白兔随机分为两组,实验组(n=24):行L5椎板切除术并植入自制川芎嗪聚乙稀醇药膜;对照组(n=24):单纯L5椎板切除处。每组分别在术后的第2、4、6、8周随机处死6只,采用改良Rydell标准进行大体观察的粘连分级和计算机图像分析法计算成纤维细胞数以评估瘢痕形成的量。结果术后2周时,两组改良Rydell粘连分级无显著的统计学差异(P=0.18),但是在术后4、6、8周时实验组改良Rydell粘连分级显著低于对照组(P<0.05);实验组硬膜外成纤维细胞数在术后各时间点均显著低于对照组(P<0.05)。结论在兔模型中,川芎嗪聚乙稀醇药膜能有效的减少椎板切除术硬膜外纤维化和瘢痕粘连。

川芎嗪聚乙稀醇膜预防椎板切除术后硬膜外粘连的有效性分析

目的:探讨川芎嗪聚乙稀醇膜预防椎板切除术后硬膜外粘连的有效性及可行性。方法:选取32只新西兰白兔随机分为A、B、C、D共四组,各8只,所有白兔均采用手术将L5椎板切除,将硬脊膜12mm×6mm部位进行裸露,并对神经根部进行探查。A组作为空白组,注射1ml生理盐水,B组填充1ml聚乙稀醇膜,C组椎板缺损区的硬脊膜表面注入半流质状丹参液,逐层缝合切口,D组白兔注射1ml的川芎嗪聚乙稀醇膜进行填充,并建立L5椎板,观察4组小白兔术后2、4、6、8周的组织学形态及术后效果,同时在术后6周对4组白兔行硬模外致密度及瘀痕定量分析。结果:外观观察情况:A组白兔术后明显出现粘连,B、C组白兔术后出现轻度粘连,D组小白兔术后无出现粘连情况。瘀痕密度:B组、D组白兔瘀痕面积百分比分别为(15.78±1.98)%、(13.25±1.68)%,A组、C组瘀痕面积分别为(62.45±6.12)%、(53.12±3.48)%,瘀痕面积比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪聚乙稀醇膜能有效预防椎板切除术后硬膜外粘连的情况,有利于预后。

川芎水煎醇沉液对家兔动脉血压及心率的影响

采用动脉血压直接测定方法观察不同剂量的川芎水煎醇沉液对家兔动脉血压及心率的影响。将家兔麻醉,分别耳缘静脉注射1g/kg、2 g/kg、4 g/kg剂量的川芎水煎醇沉液,通过BL-420E生物信号采集系统分别记录家兔给药前后收缩压、舒张压和脉压的变化。结果显示,与用药前比较,各剂量处理后家兔收缩压均有显著上升(P<0.01),高剂量组随药物作用时间延长收缩压降低。各剂量处理后家兔舒张压均有显著降低(P<0.01),高剂量组处理后动脉压均明显增加(P<0.01),且2 g/kg川芎水煎醇沉液可使家兔的动脉压明显提高;心率随给药剂量的增加而显著降低(P<0.01)。提示川芎水煎醇沉液对家兔有降压作用,各剂量组收缩压升高,舒张压降低,动脉压升高,心率降低。

梓醇-川芎嗪方对阿尔茨海默病模型小鼠的作用及对水通道蛋白4表达的影响

目的探讨梓醇-川芎嗪方(CT方)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的作用及对水通道蛋白4表达的影响。方法将β-淀粉样前体蛋白swe基因/早老蛋白1dE9基因(APPswe/PS1dE9)双转基因模型小鼠50只随机分为模型组、盐酸多奈哌齐片(安理申)组、梓醇-川芎嗪方低剂量组(CT-L组)、梓醇-川芎嗪方中剂量组(CT-M组)、梓醇-川芎嗪方高剂量组(CT-H组),每组10只。同月龄C57BL/6J小鼠10只为对照组。安理申组、CT-L组、CT-M组及CT-H组小鼠每天给予相应剂量的安理申及梓醇-川芎嗪方灌胃。对照组和模型组小鼠每天给予等体积的生理盐水灌胃,各组均为每天1次,连续灌胃8周,进行Morris水迷宫行为学检测,测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及总抗氧化能力(T-AOC)水平,测定脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)水平,检测水通道蛋白-4(AQP4)表达水平。结果梓醇-川芎嗪方可以明显缩短APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的逃避潜伏期、游泳距离、首次到达平台时间,增加穿越平台次数,降低脑内可溶性及不可溶性Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)水平,升高海马体和血清SOD、CAT和T-AOC水平,降低MDA水平,上调室周脑组织AQP4蛋白表达水平(P<0.05)。结论梓醇-川芎嗪方可以有效提高AD模型小鼠的认知和记忆能力,作用优于安理申。其作用机制可能与降低AD模型小鼠脑组织中Aβ沉积、调节氧化应激、上调AD模型小鼠室周脑组织AQP4蛋白表达水平有关。

川芎嗪乙醇液湿敷治疗皮肤溃疡

川芎嗪乙醇液湿敷治疗皮肤溃疡李少华邓范周采用自制的川芎嗪乙醇液湿敷治疗皮肤溃疡，效果满意。报告如下。１病例与方法１．１病例：中风后致皮肤损害者１４例，溃疡面２４处，溃疡面积＜５ｃｍ２１３处，５～１０ｃｍ２８处，＞１０ｃｍ２３处。１．２方法：１．２．１...

缺血再灌注对血管内皮细胞功能的影响及药物干预作用观察

目的 :探讨缺血再灌注 (缺氧再给氧 )对内皮细胞免疫功能的影响及川芎醇的干预效果。方法 :用人脐静脉内皮细胞株ECV30 4缺氧再给氧模型模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤 ,并用川芎醇干预其缺氧再给氧过程。间接免疫荧光染色显示胞内核因子 κΒ(ΝF κΒ) ,流式细胞术检测细胞表面HLA ABC ,HLA DR ,CD86和CD5 4 ,并将内皮细胞与同种异体淋巴细胞混合培养 (MELR) ,检测淋巴细胞增殖程度、IL 2的产生及凋亡淋巴细胞百分率。结果 :缺氧再给氧使ECV30 4细胞变圆、收缩、脱落 ,胞浆NF κB表达增高 ,且由胞浆阳性为主转为胞核阳性为主 ,细胞表面HLA ABC ,HLA DR ,CD86增高 ,CD5 4无显著变化 ,MELR中3 H TdR掺入量、IL 2生成量显著增多 ,凋亡淋巴细胞百分率降低。川芎醇干预后ECV30 4细胞形态基本恢复正常 ,NF κB表达未下调 ,但核阳性细胞百分率降低 ,以核浆阳性为主 ,其他多项检测指标的改变得以逆转。结论 :缺氧再给氧影响了ECV30 4细胞几种重要免疫相关分子的表达 ,川芎醇可发挥拮抗作用 。

川芎干预Panx1-Src-NMDAR-2B信号通路对神经病理性疼痛模型大鼠中枢敏化的作用机制研究

兴奋性毒性(excitatory toxicity, ET)是中枢敏化(central sensitization, CS)引发神经病理性疼痛(neuropathic pain, NPP)的重要因素,而血清缝隙连接蛋白-1(pannexin^(-1), Panx1)-Src-N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 2B,NMDAR-2B)关联是ET启动CS的一条新的重要通路,揭示川芎中枢止痛作用是否通过同步调控脊髓/脑Panx1-Src-NMDAR-2B通路来实现。该研究采用动态活体的脑/脊髓同步微透析技术,结合行为学、高效液相荧光法、ISCUSflex微透析分析仪、超敏多因子电化学发光分析法、ELISA和Western blot法,以坐骨神经部分损伤(sciatic nerve injury, SNI)大鼠为工具,考察川芎醇提物对脊髓背角(spinal dorsal horn, SDH)和脑前扣带回(anterior cingulate cortex, ACC)区NMDAR-2B、Src和Panx1蛋白表达以及细胞外液兴奋性氨基酸、细胞因子、能量代谢物质和P物质变化规律的影响。与假手术组相比,SNI模型组大鼠机械痛阈显著降低(P<0.01),冷痛敏评分显著升高(P<0.01);ACC细胞外液中谷氨酸(glutamate, Glu)、丝氨酸(D-serine, D-Ser)和甘氨酸(glycine, Gly)水平显著升高(P<0.05),SDH细胞外液中Glu、D-Ser、白细胞介素-1β(interleukin^(-1)β, IL^(-1)β)、乳酸(lactic acid, Lac)水平显著升高(P<0.05),而肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平显著降低(P<0.05);脑ACC组织中NMDAR-2B、Src和Panx1蛋白水平显著升高(P<0.05)。与SNI模型组相比,川芎醇提物高、中剂量组均能显著提高模型大鼠机械痛阈的镇痛活性(P<0.05),而川芎醇提物中剂量组也能显著降低冷痛敏评分(P<0.05)。川芎醇提物高、中剂量组显著抑制SNI大鼠脑ACC细胞外液中Glu、D-Ser和Gly的含量(P<0.05),也能抑制脊髓SDH细胞外液中Glu含量(P<0.05)。川芎醇提物中剂量组也能明显升高SDH细胞外液中葡萄糖(glucose, Gluc)、Lac、干扰素-γ(interferon-gamma, IFN-γ)、角质形成细胞趋化因子/人生长调节癌基因趋化因子(keratinocyte chemoattractant/rat homologues of human growth-regulated oncogenes, GRO/KC)和白细胞介素-4(interleukin-4)的含量(P<0.05)。川芎醇提物不同剂量组也能显著抑制大鼠脑ACC和脊髓SDH组织中NMDAR-2B、Src和Panx1蛋白水平(P<0.05)。川芎的中枢镇痛作用可能与其抑制大鼠脑ACC和脊髓SDH细胞外液中Glu、D-Ser和Gly的释放,降低两区域内NMDAR-2B、Src和Panx1蛋白表达,调控脊髓、脑2个水平上Panx1-Src-NMDAR-2B通路有关。以上结果可阐明川芎临床止痛功效的科学依据。