基于GEO数据库联合网络药理学研究川芎-赤芍药对治疗动脉粥样硬化的药理过程及分子机制

目的:探讨活血化瘀中药药对川芎-赤芍拮抗动脉粥样硬化的潜在分子机制及药理过程。方法:使用R语言Limma包分析GEO数据库GSE43292数据集,对有表达差异的动脉粥样硬化基因进行筛选和提取。川芎-赤芍药对所含的化学活性组分及靶点通过中药系统药理学数据库与分析平台检索。合并差异基因和药物作用靶点以获得共同的靶点。利用在线分析工具STRING和Cytoscape构建药物和靶点的调控网络以及靶点间的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。然后利用R语言注释靶点基因的基因本体(GO)功能,分析京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路,再进行基因集富集分析(GSEA)以验证KEGG的通路和富集的情况,确定靶点基因的调控功能和参与基因调控功能的信号转导通道。结果:共筛选出动脉粥样硬化差异基因1244个,川芎-赤芍药对含36个生物活性成分,其中靶点为环加氧酶1、肾上腺素受体、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ、激酶插入域受体、孕激素受体、基质金属蛋白酶9、CXC趋化因子配体8、蛋白激酶Cβ、白细胞介素6、CD14、二肽基肽酶-4、PIK3CG、肾上腺素受体α1B、微管相关蛋白2、尿激酶纤溶酶原激活剂和单胺氧化酶B。靶点在GO中主要富集在合成DNA过程的调控、DNA生物合成的过程、含胶原的细胞外基质、细胞外基质、蛋白酶结合、细胞迁移、血管形成过程、膜筏结构、转录的调节等与动脉粥样硬化炎症、脂肪代谢及血管生成相关的生物学注释。脂质与动脉粥样硬化通路和核因子κB信号通路与动脉粥样硬化关系最为密切,并且在KEGG信号通路和GSEA均显示出富集。结论:川芎-赤芍药对通过潜在的13个活性成分作用于可能的16个靶点调控相关信号转导通路,通过抗炎、调脂和保护血管等方式产生抗动脉粥样硬化的作用。

川芎-赤芍药对及其有效成分抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化及铁调素的作用机制

目的:观察川芎-赤芍药对及其有效成分能否减缓细胞泡沫化,并探讨其作用机制。方法:采用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人单核细胞白血病(THP-1)细胞建立泡沫化模型,将川芎-赤芍药对及其有效成分分别作用于ox-LDL诱导的THP-1细胞。采用油红O染色分析细胞泡沫化程度,通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测铁代谢相关铁调素(Hep)、膜铁转运蛋白(FPN)、铁调素调节蛋白(HJV)、血色素沉着症基因(HFE)、转铁蛋白受体2(TfR2)mRNA表达情况。结果:油红O细胞染色后镜下可见,染色后的红色脂滴因川芎-赤芍药对及其有效成分干预而减少。与对照组比较,模型组Hep、FPN、HFE、TfR2 mRNA表达上升,HJV mRNA表达减少;与模型组比较,川芎-赤芍药对及其有效成分干预组抑制作用明显,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:川芎-赤芍药对及其有效成分可抑制ox-LDL诱导的THP-1源巨噬细胞泡沫化,作用机制与川芎-赤芍药对及其有效成分调节铁代谢相关基因表达有关。

川芎-赤芍药对差异性调节冠心病血管新生的研究进展

改善心肌缺血和抗动脉粥样硬化是冠心病防治的重点。血管新生对冠心病存在双面性作用,可促进缺血心肌侧支血管生长但又易导致动脉粥样硬化斑块破裂,中医整体观指导下的活血化瘀治法可能有效解决冠心病治疗中的这一矛盾。川芎-赤芍药对是活血化瘀经典药对,临床对动脉粥样硬化、冠心病心绞痛和PCI术后再狭窄等有较好疗效,可促进缺血心肌血管新生而改善心肌缺血、抑制斑块内血管新生而抗动脉粥样硬化,其差异性调节血管新生的机制可能是通过调节以缺氧或炎症为主导的不同微环境、同一分子与不同受体/亚型的结合、共同的血管新生靶点实现的,提示活血化瘀方药可同步实现“弱者彰之”“亢者承之”的差异性调节作用,最终在整体水平上改善冠心病。

川芎-赤芍药对干预心肌梗死合并动脉粥样硬化复合模型的circRNA/lncRNA表达谱研究

探索川芎-赤芍药对(Chuanxiong-Chishao herb pair,CX-CS)对心肌梗死合并动脉粥样硬化(myocardial infarction-atherosclerosis,MI-AS)小鼠复合模型的干预作用,并探讨其对缺血心肌、主动脉组织环状RNA(circular RNA,circRNA)/长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的影响。将60只雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组,CX-CS高(7.8 g·kg^(-1))、中(3.9 g·kg^(-1))、低(1.95 g·kg^(-1))剂量组,阳性药组(美托洛尔26 mg·kg^(-1),辛伐他汀5.2 mg·kg^(-1)),每组12只。假手术组采用雄性C57BL/6J小鼠。模型组及药物干预组给予高脂喂养10周后进行冠状动脉前降支结扎术,术后继续给予高脂饲料2周,建立MI-AS模型。假手术组给予普通饲料喂养,手术时只穿线不接扎。药物干预组于高脂喂养第9周起给予CX-CS、阳性药灌胃4周,模型组和假手术组给予等体积生理盐水。给药结束后取CX-CS中剂量组、模型组、假手术组心脏和主动脉组织行全转录组测序。结果发现,CX-CS高、中剂量组小鼠心功能显著改善、心肌纤维化面积缩小,CX-CS中剂量组斑块面积显著减小。CX-CS处理可逆转复合模型中粥样硬化主动脉的circRNA_07227、circRNA_11464以及缺血心肌的circRNA_11505等circRNA的表达。主动脉CX-CS(ACC)组与主动脉模型(AM)组间的差异circRNA主要富集在脂质合成、代谢及转运、炎症、血管新生等过程。心脏CX-CS(HCC)组与模型(HM)组间差异circRNA主要富集在血管新生、血压调节等过程。CX-CS处理可逆转复合模型中粥样硬化主动脉的ENSMUST00000162209以及缺血心肌的TCONS_00002123等lncRNA表达变化。ACC组与AM组间的差异lncRNA主要富集在脂质代谢、血管新生、自噬、凋亡、铁死亡等过程。HCC组与HM组间差异lncRNA主要富集在血管新生、自噬、铁死亡等过程。综上,CX-CS可调控多种circRNA及lncRNA的表达,其干预冠心病的机制可能与调控缺血心肌血管新生、炎症以及AS主动脉的脂质代谢及转运、炎症、血管新生等过程有关。

川芎—赤芍药对研究进展

川芎—赤芍是著名的活血化瘀药对,川芎活血行气、祛风止痛,赤芍清热凉血、散瘀止痛,二者均为活血要药,配伍后达到同类相须、相辅相成、相互促进等功用,能够发挥抗动脉粥样硬化,改善血液流变性,改善心肌缺血,保护内皮功能,保护脑组织及神经等作用。芎芍胶囊是川芎和赤芍有效组分配伍的典型应用,主要用于治疗心血管疾病。本文从功效及物质基础、药理研究、临床应用方面对川芎—赤芍药对的研究进行了系统的阐述,以期为川芎—赤芍药对的进一步研究与开发提供依据。

多指标-响应曲面法优选赤芍-川芎药对(1∶1)提取工艺

目的:采用多指标-Box-behnken design(BBD)效应面法,优选赤芍-川芎药对(1∶1)最佳提取工艺。方法:在单因素试验的基础上,采用三因素三水平BBD试验设计对赤芍-川芎(1∶1)中4成分成分提取工艺参数进行优选。以乙醇浓度、料液比、提取时间为自变量,以芍药内酯苷、芍药苷、洋川芎内酯A及藁本内酯含量为因变量,采用Hassan方法计算总评“归一值”,并用多元线性回归及二项式拟合,建立总评归一值与自变量之间的数学关系,经效应面法预测最佳工艺条件。结果:最佳提取工艺为乙醇浓度68%、料液比1∶11、提取时间79 min,提取2次;芍药内酯苷、芍药苷、洋川芎内酯A及藁本内酯含量分别为7.5870,46.1920,8.7840,25.7310 mg·g^(-1)。结论:实测值与预测值接近,表明采用多指标-效应面法优化后得到的综合提取工艺参数可用于赤芍-川芎药对(1∶1)中有效成分的提取。

中药药对的化学成分研究——川芎赤芍挥发油的GC/MS分析

中药药对是复方的最小组成单位,具有中药配伍的基本特点.药对化学是复方化学的核心内容.联用色谱和化学计量学方法为中药复杂体系的分离与分辨提供了强有力的工具.采用GCMS法分离测定中药药对川芎赤芍、单味药川芎和赤芍的挥发油成分,并对其中的重叠色谱峰采用化学计量学解析方法(CRM)进行分辨,得到药对和各单味药的纯色谱曲线和质谱图,药对川芎赤芍、单味药川芎和赤芍分别分辨出82,78和57个色谱峰,通过质谱库对分辨的纯组分进行定性,分别得到61,52和33个定性结果,占总含量的90.18%,95.14%和95.82%.